藍布正的藥理作用及急性毒性試驗

蘭布是薔薇科水生楊梅屬植物的一種溫和毛綠植物（gypnb.var.colu）和路綠植物jacq）。它是貴州苗族人民常用的材料。據報道藍布正主要功能為益氣補血、養陰潤肺、壯陽補虛等,民間廣泛用以治療頭昏、頭痛、體虛及風寒感冒等病癥。藍布正已收載入《貴州省中藥材、民族藥材質量標準》(2003年版);在《貴州省藥品標準》(1994年版)中有3個成方制劑(“圣寧感冒液”、“風寒感冒膠囊”、“安腦舒膠囊”)中應用藍布正作原料藥。筆者曾對藍布正鎮痛、鎮靜、抗驚厥藥理作用及急性毒性試驗進行研究報告。為進一步探討藍布正藥理作用,本實驗選擇對免疫功能影響及抗炎等指標對藍布正進行了研究,其結果提示藍布正對免疫功能有增強作用,為臨床用藥提供了藥理學研究依據。1實驗材料和設備1.1藍布正水提液制備藥材采自貴陽孟關,經我院藥學系何順志研究員鑒定為柔毛路邊青GeumjaponicumThunb.Var.chinenseF.Bolle。藍布正水提液制備:將全草晾干、粉碎,取適量用水提取,收集濾液,濃縮后徐徐加入乙醇攪拌,使之成為70%的乙醇液,靜置過夜后離心棄去沉淀,取上清液水浴揮干成浸膏,收得率為4.85%,臨用時配制成一定濃度的水溶液(AE-G)供試。劑量分別采用高、中、低劑量組,對照組用等容積的生理鹽水(NS)。1.2男性,男性KM小白鼠,體重20±2g;和13±2g,雌雄均用。由貴陽醫學院實驗動物中心提供,動物合格證號:SCXK(黔)2002-0001。1.3儀器721-分光光度計,上海第三分析儀器廠;HH-S-21-6電熱恒溫水浴箱,北京長安科學儀器廠。2方法和結果2.1不同藥物對小鼠體內吸收nd將18～22g小鼠40只,隨機分成4組,每組10只;給藥組分別按20g/kg、10g/kg、5g/kg不同濃度灌胃給予AE-G,對照組給予等容積的生理鹽水,每天一次,連續7天,于最后一天給藥1小時后,從尾靜脈注射印度墨汁0.1ml/10g,然后分別于2min、10min從小鼠眼球后靜脈叢取血20μl,加入預置有2ml體積分數為0.1%的碳酸氫鈉溶液的試管中,搖勻,在波長600nm處測定光密度值(OD值);最后斷頸處死小鼠,分別稱取肝、脾質量,并計算出吞噬指數K值、校正吞噬指數α值。見表1。各用藥組數據與對照組采用t檢驗比較,其K值、α值增加表示該藥物能提高小鼠巨噬細胞的吞噬指數和校正吞噬指數,有免疫增強作用。實驗結果顯示AE-G各劑量組與對照組比較均有差異,尤以20g/kg組和10g/kg組有顯著性差異(P<0.05),提示AE-G各劑量組均能明顯增強小鼠腹腔巨噬細胞的吞噬能力。2.2兩組大鼠前、后斷頸參數比較實驗選擇幼齡小鼠40只,體重13±2g,雌雄兼用,分組、給藥方法及給藥時間同前。于最后一天給藥1小時后斷頸處死,取其胸腺、脾臟稱重,并計算出指數。見表2。各劑量組與對照組比較,經統計學處理均有顯著性差異(P<0.05)。提示AE-G灌胃能明顯提高小鼠胸腺指數和脾指數。2.3小鼠體內溶血素含量的檢測取體重20±2g小鼠40只,分組、給藥方法同前。按文獻方法操作,于給藥的第一天,給動物腹腔注射5%的雞紅細胞,0.2ml/只,刺激溶血素(IgM)的產生,在最后一天給藥1小時后,將小鼠斷頸取血,以3000r/min離心,10min,取血清再加入5%的雞紅細胞,10%補體各0.5ml,37℃水浴孵育30min后,離心取上清液,用721型分光光度計于540nm處測OD值,計算出溶血素(HC)含量。見表3。其溶血素的含量可綜合反應抗體IgM的數量及作用,即反應藥物對實驗動物體液免疫功能的影響。實驗結果顯示,給藥組與對照組比較,無論是高、中、低劑量組均有顯著性差異(P<0.05),但不同劑量的組間差異不明顯,說明藍布正對小鼠體液免疫有其促進作用。2.4水腫抑制率測定取小鼠40只,體重20±2g,分組及給藥方法同前,于末次灌胃給藥后30min,每只小鼠右耳內外兩面均勻涂抹0.05ml二甲苯進行攻擊,致炎2h后拉脫頸椎處死,以8mm打孔器取左右耳片,稱重,兩耳片重量差為腫脹度。計算腫脹抑制率,結果見表4。實驗結果表明,各給藥組與對照組比較,差異無統計學意義(P>0.05)。提示AE-G對二甲苯致小鼠耳廓腫炎癥無明顯對抗作用。2.5皮下注射和地塞米松對大鼠炎癥增殖期的影響取小鼠40只,仍隨機分為四組,取消中劑量組,增加了陽性對照組(地塞米松組),陰性對照組仍為生理鹽水,給藥方法同前,給藥時間為14天。實驗采用動物局部皮下植入棉球的方法,產生與炎癥后期病理變化相似的肉芽增生,實驗可反應藥物對炎癥增殖期有無抑制效應。陽性對照組用藥為地塞米松,以35mg/kg劑量皮下注射,隔日一次給藥。結果見表5。實驗結果顯示:無論是高、低劑量組與陰性對照組比較均無顯著性差異(P>0.05),而與陽性對照組相比則有明顯差異(P<0.05)。說明AE-G對增殖期炎癥效果不明顯。3血清溶血素igm抗體水平3.1試驗研究結果表明,藍布正既能顯著提高小鼠巨噬細胞的吞噬能力,增強小鼠非特異免疫功能;又能明顯提高小鼠胸腺指數和脾指數;明顯增加小鼠脾細胞分泌溶血素的能力,提高正常小鼠血清溶血素IgM抗體水平,增強小鼠特異免疫功能。提示藍布正水提液對非特異免疫功能和體液免疫功能有促進作用。這為苗族及民間傳統用以治療頭昏頭暈、感冒頭痛等癥提供了一定藥理實驗依據。3.2藍布正在《貴州省藥品標準》(1994年版)中已有3個成方制劑(“圣寧感冒液