第九節、生物技術藥物的臨床前評價1、生物技術藥物的特殊性2、臨床前評價的目的和一般原則3、動物種屬、模型的選擇4、給藥途徑和劑量的選擇5、免疫原性6、藥效學評價7、藥代動力學評價8、毒理學評價1、生物技術藥物的特殊性（1）種屬特異性多肽蛋白類藥物的生物學活性隨動物種屬而不同，有的對某種動物僅有部分有限的活性，有的根本沒有活性，如人干擾素具有高度的種特異性，對鼠狗沒有生物活性，因此在人體比在其它動物中有更強的藥理活性，這在安全性評價和藥理評價中必須加以考慮。生物信息網1、生物技術藥物的特殊性（2）免疫原性同一種生物技術活性多肽蛋白類藥物，在種屬間有不同的氨基酸序列，人的活性多肽和蛋白質的氨基酸序列通常明顯不同于其它動物種屬中天然存在的天然的副本，因而這些蛋白質在外源宿主中經常產生免疫學反應，最終改變它們的藥理學上的作用，也可導致由于形成免疫復合物而產生毒性。當然這樣的毒性，在人體宿主中預期對產物的安全性可能沒有多大影響。1、生物技術藥物的特殊性（3）非預期的多向性活性有些生物藥物例如細胞因子往往有多種生物活性，而多種細胞因子又可具有同一生物活性，它是以網絡形式發生作用的，它的功能因種類、濃度、靶細胞因子作用的先后次序，體液因子和其他調節物質的存在與否而不同，一種細胞因子可協同或拮抗其他細胞因子的作用，可誘導或抑制其他細胞因子受體的表達及調節自身受體的表達。這些將直接影響機體的免疫應答和藥物的治療作用。2、臨床前評價的目的和一般原則生物技術藥物臨床前評價的目的是確定藥理學和毒理學效應，主要是①確定人用最初的起始劑量和隨后的擴大劑量的方案；②確定潛在的毒性靶器官和可逆的可能性；③確定臨床監測的參數。臨床前評價的一般原則如下：①提供臨床前評價的產品質量。對于生物技術藥物臨床前評價提供的產品，一定要考慮它們的制造過程，以及產品的復雜的結構和生理學特征。因此在臨床研究前，應用相關的實驗技術充分確定其為安全合格的產品是必要的。②生物技術藥物臨床前評價，應遵循新藥臨床前評價的基本原則。但因其特殊性，需要一個更可塑的途徑進行評價，這在美國、歐洲、日本和我國都有共識。臨床前評價的一般原則③應根據生物技術藥物的生物活性和特性選擇建立合適的臨床前動物模型。建立模型需考慮：動物種屬和生理狀態選擇；釋放方式，包括劑量、給藥途徑和治療方案的選擇。如果沒有相關動物種屬時，可采用同源蛋白于相應的動物種屬中進行。但用同源蛋白得到的有關資料，應注意生產過程、雜質范圍/污染物、藥代動力學和確切的藥理學機理在同源蛋白和準備臨床應用產品間可能的不同臨床前評價的一般原則④對生物技術藥物，常規的毒性評價試驗方法可能不完全適用，須采用范圍很廣的藥理學、生物化學、免疫學、毒理學和組織病理的研究技術，評估其產品的作用及在急性和慢性暴露期間不同的劑量范圍的影響。當某些生物技術活性蛋白藥物對人體的潛在毒性，應用化學藥物臨床前安全試驗的標準毒性評價方法，不能作出有用的測定時，采用體外生物學試驗是有用的，例如肯定特異的活性、種特異性和免疫化學特性的試驗將有助于試驗種類的選擇。臨床前評價的一般原則⑤當生物技術藥物在結構上和藥理上與臨床應用已有廣泛經驗的產品相當時，在一定情況下，尤其在證實有相似的動力學圖譜時，可進行廣泛性較少的毒性試驗。3、動物種屬、模型的選擇生物技術藥物的藥理活性與動物模型、組織特異性有關，也與免疫性有關。采用通用動物種屬（如大鼠和狗）進行試驗，對某些產品常常受阻，必須考慮選擇與特殊產品有關的動物種類。安全性評價，正常應包括兩種有關種屬，但不需要和不鼓勵在與藥理無關的種屬中進行。在某些情況下一種有關種屬就夠，但應提供這些情況的理由。如果體外臨床前研究不能確定有關動物種屬時，可謹慎先用某種嚙齒和非嚙齒動物進行。如果研究預計超過四周期限，應考慮選用已知對受試藥物抗體產生低反應的試驗動物種類。如果不存在有關動物種屬時，當受試藥物能與人源化受體相互作用，且在人類中預期有相互作用的生理后果時，采用能表達人受體的轉基因動物是合適的。4、給藥途徑和劑量的選擇給藥途徑和頻數的應盡可能接近今后推薦臨床使用的途徑與頻數，而且應考慮到所用動物種屬中產品的藥代動力學和生物利用度，以及在受試動物中能安全使用與人應用容積相同的體積，采取的措施應便于與人臨床研究計劃相比擬。5、免疫原性許多生物技術藥物對動物有免疫原性，所以在臨床前評價進行重復給藥時，應測定給予這類產品形成的抗體。應了解抗體反應特點（如是中和抗體或非中和抗體）及其出現與藥理學、毒理學變化的關系，尤其應考慮抗體形成對藥代動力學/藥效特征的影響，包括不良反應的嚴重性或出現新毒性效應。6、藥效學評價藥效學研究應該用不同的試驗技術在主要生理系統之內，提供藥理學的主要效應的類型和作用方式的資料。通過藥效學研究建立治療的理論基礎，闡明劑量-反應關系。這種研究應該在生理的劑量下，調查一種產品的作用和功能的相互關系。若可能的話，受試的生物技術藥物的藥效應與同種天然的藥效同時進行比較。藥效學測定方法隨所研究制劑的類型而不同。由于生物技術藥物的種屬專一性，體內分析時選擇同一種適宜動物進行試驗是很重要的，也可應用評價生物活性的體外分析方法，確定產品與臨床活性有關的效應。應用細胞株和原代細胞培養，檢查對細胞表型和增殖的直接作用是有效的。哺乳動物細胞株可在體外預測體內特殊方面的活性，如受體占領、受體親和力、藥理學效應和幫助選擇一種適宜動物種屬進行體內藥效研究等。7、藥代動力學評價生物技術藥物由于其產品的特殊性，它們的吸收、分布、代謝和排泄（ADME）的特點不同于傳統小分子藥物。動物種屬間差別必須考慮。生物技術藥物藥代動力學的分析方法有生物檢定法、同位素示蹤法和免疫檢定法。生物技術藥物活性多肽蛋白產品的藥代動力學有以下特點：（1）在體內降解迅速，分布容積比較小，某些藥物有非線性消除動力學；（2）體內分布有組織特異性，這與受體介導有關；（3）降解部位廣泛，大多數組織中均有降解發生。8、毒理學評價生物技術藥物的毒性評價應依據受試藥品所提供的藥物代謝動力學、藥效學和免疫反應性方面的技術資料，并考慮到人和動物之間潛在的差異，正確選擇動物種類、劑量、給予途徑、治療或試驗期限和動物數量是很重要的。單劑量毒性研究主要獲得劑量與全身和局部毒性相關關系的有用資料。當單劑量毒性研究的結果不足以評估產品的安全性時，必須進行多次重復劑量的毒性研究。生物技術局部用藥，對其潛在的毒性評估，可按照化學合成藥物的評估原則和方法進行。8、毒理學評價對于生物技術藥物有關生殖毒性、致癌毒性和免疫毒性試驗的特殊毒性進行評價，有其特殊性，按照新生物制品審批辦法要求進行。對有些產品，擔心其有致癌潛力時（如生長因子），采用常規致癌性生物檢定是不夠的，應考慮專一性的評價方法。8、毒理學評價對于生物技術藥物的免疫毒性，重點偵查產品的免疫原性：①是否誘導抗體形成和隨后的免疫復合物的形成；②是否與宿主免疫球蛋白或