HIV抗體快速檢測SOP文獻 科室：檢查科目錄第一部分工作制度 2實驗室工作制度 2HIV標本采集與接受登記制度 3艾滋病實驗室保密制度 3艾滋病篩查實驗室常規消毒清理工作制度 4差錯事故解決制度 5報告單簽發審核制度 6設備管理制度 7試劑管理制度 8艾滋病篩查實驗室安全防護制度 9艾滋病病毒職業暴露防止解決方案 10第二部分原則操作規程 13第一章樣品采集與解決 13第二章原則操作程序 15第三章成果報告與注意事項 16第三部分流程圖 18一、HIV抗體快速檢測流程圖 18二、暴露級別的評定 21第一部分工作制度實驗室工作制度室內應經常保持整潔，多個儀器設備要安裝適宜，器皿試劑擺放整潔，標志清晰，有良好的通風設備。實驗室工作人員工作時一律穿制服，保持衣帽整潔，實驗過程中應用心致志、認真負責，堅守工作崗位，不得隨意串崗、閑談，保持實驗室安靜，下班離開實驗室前要檢查并關好水、電、門、窗等，注意實驗室安全。認真開展實驗室質量控制工作，儀器設備應定時保養，有溫度統計，檢測標本的保存規定符合規范規定。實驗室不得放置與測試無關的物品，水、溫、濕度、光照、防震、防塵、防噪聲等，環境必須符合實驗室的工作規定。實驗和樓道內必須配備足夠的安全防火方法，并定時檢查保養。對不同屬性、品種和含量水平的試樣，應有足夠的實驗區域，予以分離檢查，特別是已知含有生物危害的試樣必須分離檢查。避免損害工作人員健康和污染環境。與檢查無關人員不得進入實驗室，外單位人員聯系工作，一律在辦公室接待。實驗結束后，應及時清理實驗現場和用品，對染菌帶毒的器具廢棄物應嚴格進行消毒無菌解決。實驗室內嚴禁吸煙、用餐和進食。HIV標本采集與接受登記制度采樣前和接受標本時應核對病人身份，嚴格執行核對制度。采血時應戴好手套、帽子、口罩。HIV標本采集應建立具體的統計本，統計內容涉及：送檢單位、病人姓名、門診號、數量、種類（血清）、送樣者、接受者或采集者。采集后，應將HIV樣本單獨分裝，勿與其它項目共用。艾滋病實驗室保密制度為確保艾滋病實驗室全部資料嚴格保密，應恪守下列制度1、與HIV/AIDS有關檢測項目的全部資料均應嚴格保密，涉及采樣統計與檢測統計的保管，報告單的發放和送確認實驗室檢測等。2、工作人員不得向無關人員提供檢查成果，要妥善保存多個實驗統計。3、對初篩疑似陽性感染者不能告訴受檢者本人，更不能到處亂講。4、實驗室的有關檢查資料，檔案、成果統計其別人不得翻錄查閱，修改和銷毀。5、實驗室工作人員，不能在非正式場合對外提供任何成果、數據。艾滋病篩查實驗室常規消毒清理工作制度1、檢測可疑樣品時，充足準備好廢棄物消毒具及消毒藥、液。如：次氯酸鈉含有效氯—5000mg/L，75%乙醇和2%戊二醛。2、實驗室用的吸頭及時打入消毒器皿中。3、一次性手套，隔離服更換后，應丟棄在一次性垃圾袋內。4、慣用消毒辦法4.1、物理消毒辦法4.1.1、高壓蒸汽消毒，121°C，保持15—20min；4.2、化學消毒辦法4.2.1、廢棄物缸：5000mg/L次氯酸鈉4.2.2、工作臺面及儀器表面：75%乙醇4.2.3、溢出物：5000mg/L次氯酸鈉4.2.4、污染的臺面和器具：mg/L次氯酸鈉5、實驗室中發生可疑樣品溢出時，應及時用75%乙醇噴灑，然后用消毒劑浸泡的吸水物質覆蓋10-15分鐘，最后再用消毒劑清洗該地方，擦干。6、全部實驗工作結束后，應對實驗臺、儀器、設備（接觸部位）地面進行徹底消毒解決。7、廢棄物解決

從HIV實驗室出來的全部廢棄物，涉及不再需要的樣品、包裝盒和其它物品，均應視為感染性廢棄物。差錯事故解決制度艾滋病檢測工作人員必須要有高度的責任心和嚴肅的法制觀念，嚴防差錯事故的發生。由于責任心不強、不認真執行規章制度，不恪守操作規程或技術因素而引發檢查錯誤，對病人未造成嚴重后果的，稱為差錯。差錯按程度不同，分為普通差錯和嚴重差錯。一級差錯記差錯一次，二級差錯扣款50元，三級差錯扣除當月效益工資。一級差錯：

（1）違反操作規程，造成標本損壞，需重新采集標本或由于接受標本未認真核對，違反核對制度，影響檢查者。（2）工作環境不能做到5S管理、違反生物安全者。（3）未準時統計成果、繪制質控圖、當發現失控時隱瞞不報者。二級差錯：（1）未準時間先后次序使用試劑，造成試劑過期或由于寄存不當造成試劑變質者。（2）項目漏查、做錯項目，且標本已解決，需再次采用標本檢查者。(3)因操作不當，造成設備故障，影響較大者。三級差錯：（1）漏做、錯做普通標本的檢查目的，編錯試管號碼，標錯標本聯號、采錯病人標本，寫錯檢查成果并已發出報告者。（2）粗心大意寫錯報告難以挽回者。(3)因責任心不強、管理不善造成陽性標本丟失者。報告單簽發審核制度各崗位的工作由本崗位人員進行操作檢查，然后填寫檢查報告單。工作完畢后，再對本崗位全部的檢查報告進行核查一次，在你認為能夠發出時，蓋上檢查者印章，填寫好報告日期。交給本實驗室負責人或有資質的高年資檢查人員核查簽名；但在危急狀況下或單獨一人值班時（如夜班）除外。沒有上崗證人員不得單獨簽發檢查成果報告單。專業責任主管技師對本專業的全部報告單進行審核，審核的基本內容有：臨床醫師所申請的檢查項目與否已全部檢查，有無漏項；檢查成果的填寫與否清晰、對的；檢查報告單上全部內容與否全部填寫完整；有無非常異常的、難以解釋的成果；有無書寫錯誤；與否有需要復查的成果當發現檢查成果有凝議時可指令本崗位人員對檢查項目進行復查。確認報告無問題時蓋章后，方可發出報告。設備管理制度由科主任或科室主管負責監督和檢查儀器設備的使用狀況，定時校準儀器的精確度。各科應對本科室儀器設備建立臺賬明細。每月應向總庫遞交儀器設備使用狀況表，并存檔。貴重儀器應由專人負責管理。儀器操作前必須培訓、考核，認真閱讀儀器操作闡明書，純熟掌握該儀器的使用辦法及維護方法，考核合格后方可操作。當班者在使用中應嚴格恪守操作規程，碰到問題應作及時解決，并具體統計。問題嚴重者，應及時上報科主任或主管加以解決。每次使用完畢，應檢查儀器的電源、廢液傾倒狀況，并具體統計該次使用狀況。對有溫度規定的儀器設備，如冰箱冷藏室、冷凍室及恒溫培養箱、水浴箱等，均應建立登記本，每天監測溫度。試劑管理制度為了更加好地管理檢查科試劑，由主管對檢查科試劑申購、品牌、質量、價格、使用及管理狀況進行督查。每七天上報周計劃，各組人員根據各崗狀況，認真、具體填寫計劃表，務必注明具體的名稱、規格、數量及品牌。檢查科試劑必須由主管審核，并負責報物流中心采購，品牌不得隨意更改。杜絕浪費和積壓。所用的試劑必須符合質量規定，必須有三證。不得使用過期、劣質試劑。供應商所送的試劑由總庫清點后才干接受，特殊試劑由檢查科主管清點后才干在貨單上簽字，有出入者必須向科主任或物流中心主任報告，再將貨單交物流中心統一結賬。領用時應檢查物品質量和試劑品名、廠家、人份、批號、過期時間及外包裝有無滲漏等，若有問題，應及時向總庫反映。冰箱內不能貯存乙醚、異戊烷或類似的易燃、可燃性液體。艾滋病篩查實驗室安全防護制度為確保實驗室人員的工作安全，避免交叉感染，請嚴格恪守安全防護制度1、工作人員要完畢與工作有關的充足有效的技術培訓，要理解HIV危害，提高全員安全意識，實驗室安全負責人要對工作和環境的安全負責，全部工作人員都有責任保護自己和別人的安全。3、對有放試劑、樣品血清的冰箱專人管理。4、實驗人員應純熟掌握操作知識和消毒技術。5、進入實驗室應穿隔離衣，戴手套，傳染性危險大時應戴雙層手套，戴防護鏡，口罩，如防護用品破損應及時更換，不用戴手套的手觸摸暴露的皮膚等部位。6、實驗期間盡量避免使用利器，易碎器皿，嚴禁采用口腔吸液管。7、送檢樣品應視為有潛在傳染性，由專人接管，登記，寄存，提取。9、實驗用吸頭、手套、隔離服、污染物、廢棄物均放在指定垃圾袋中統一進行消毒，焚燒到無害化解決。10、不得在實驗室中吃食物，化妝打扮等，不得在實驗室會客。11、實驗室用品（涉及工作服）不得用于其它用途，不可將私人和無關的物品帶入實驗室。12、工作完畢，脫去手套后洗手，再脫去工作服，用肥皂和流動水洗手，洗手后離開實驗室。

13、實驗結束后，要對工作平臺、儀器、地面進行消毒解決。14、遇故意外事故，應立刻口頭和書面報告上級部門，并進行局部解決，如含氯消毒劑浸泡傷口，洗眼，漱口等，如遇高危意外事故，除進行局部解決外，同時應立刻采用防止方法，涉及對其隨訪，HIV檢測，休息并暫離崗位二個月，按醫囑服用HIV藥品等。艾滋病病毒職業暴露防止解決方案為維護醫務人員及其它部門有關人員的職業安全，有效防止在工作中發生職業暴露感染艾滋病病毒，一旦發生職業暴露后最大程度的避免或減少艾滋病病毒感染，特制訂本方案。

一、職業暴露（一）職業暴露是指醫務人員以及有關工作人員，在從事艾滋病防治工作及有關工作的過程中意外被艾滋病毒感染者或者艾滋病患者的血液、體液污染了皮膚或者粘膜，或者被含有艾滋病病毒的血液、體液污染了的針頭及其它銳器刺破皮膚，有可能被艾滋病病毒感染的狀況。（二）數據分析表明，醫護和防止保健等人員對艾滋病病毒和艾滋病患者從事醫療和實驗檢測活動是比較安全的。執行嚴格的安全操作及防護方法，醫護及檢查等人員的暴露事件是能夠避免的。二、職業暴露的防止1、醫務人員對全部病人的血液、體液(涉及羊水、心包液、胸腔液、腹腔液、腦脊液、滑液、陰道分泌物等人體物質，下同)及被血液、體液污染的物品均視為含有傳染性的病原物質，在接觸這些物質時，必須采用防護方法。2、醫務人員進行有可能接觸血液、體液的診療和護理操作時必須戴手套，操作完畢，脫去手套后立刻洗手，必要時進行手消毒。3、在診療、護理操作過程中，有可能發生病人血液、體液飛濺到醫務人員的面部時，醫務人員應當戴手套、含有防滲入性能的口罩、防護眼鏡；有可能發生血液、體液大面積飛濺或者有可能污染醫務人員的身體時，還應當穿戴含有防滲性能的隔離衣或者圍裙。4、醫務人員手部皮膚發生破損，在進行有可能接觸病人血液、體液的診療和護理操作時必須戴雙層手套。5、醫務人員在進行侵襲性診療、護理操作過程中，要確保充足的陽光，并特別注意避免被針頭、縫合針、刀片等銳器刺傷或劃傷。

6、使用后的銳器應當直接放入耐刺、防滲漏的利器盒，或者運用針頭解決設備進行安全處置，也能夠使用品有安全性能的注射器、輸液器等醫用銳器，以防刺傷。7、嚴禁將使用后的一次性針頭重新套上針頭套。嚴禁用手直接接觸使用后的針頭、刀片等銳器。三、艾滋病病毒暴露后的防止解決（一）緊急局部解決：1、用肥皂液和流動水清洗污染的皮膚，用生理鹽水沖洗粘膜。2、如有傷口，應當在傷口旁端輕輕擠壓，盡量擠出損傷處的血液，用再肥皂液和流動清水沖洗；嚴禁進行傷口的局部擠壓。3、受傷部位的傷口沖洗后，應當用消毒液，如70%乙醇或者0.5%碘伏進行消毒，并包扎傷口；被暴露的粘膜，應當重復用生理鹽水沖洗干凈。（二）暴露后的報告及解決程序1、醫護人員發生艾滋病病毒職業暴露后，要立刻上報醫院領導（具體由醫院擬定院內程序，注意給暴露者保密）。及時報告天山區疾控中心，組織專家對暴露的級別和暴露源的病毒載量水平進行評定和擬定。2、醫務人員發生艾滋病病毒職業暴露后，區疾控中心應當會同有關醫療衛生單位對其進行隨訪和咨詢。隨訪和咨詢的內容涉及：在暴露后第4周、第8周、第12周及6個月時對艾滋病病毒抗體進行檢測，對服用藥品的毒性進行監控解決，觀察和統計艾滋病病毒感染的早期癥狀等。不進行暴露后防止用藥者，也要定時檢測艾滋病病毒抗體，檢測時間同上。3、在對艾滋病病毒職業暴露事件的整個解決過程中，必須始終做好保密工作。凡涉及暴露者個人的有關資料，不得向無關單位和人員泄露。四、暴露后防止性用藥

對發生艾滋病病毒職業暴露的醫務人員應當根據暴露源病毒載量水平實施防止性用藥方案。

防止性用藥應當在發生艾滋病病毒職業暴露后盡早開始，最佳在4小時內實施，最遲不得超出24小時；即使超出24小時，也應當實施防止性用藥。暴露后防止性用藥的推薦方案：1、基本用藥程序：兩種逆轉錄酶克制劑，使用常規治療劑量，持續服用28天。如雙汰芝（AZT與3TC聯合制劑）

300

mg/次，每日2次，用藥時間為持續服用28天。或參考抗病毒治療指導方案。本程序合用于輕度低危暴露。2、強化用藥程序：基本用藥程序加一種蛋白酶克制劑，如佳息患或利托那韋。均使用常規治療劑量，持續服用28天。本程序合用于嚴重暴露。鑒于醫務人員暴露后的感染率很低而用藥的毒、副作用很大，因此應嚴格掌握用藥的指征。第二部分原則操作規程第一章樣品采集與解決樣本采集接患者申請單后，填寫血樣采集統計，統計涉及患者日期、姓名、年紀、門診號、采集人簽名等。用帶分離膠的負壓管采集一定量的靜脈血，顛倒混勻5~6次，室溫下自然放置半小時，待血液凝固、血塊收縮后再用3000r/min離心15min。標本采集注意事項樣本采集嚴格按靜脈穿刺規范操作。采集樣本時應注意安全，直接接觸HIV感染/艾滋病病人血液的操作，應戴雙層手套，里層是PE手套，外層為乳膠手套。樣本保存在一周內檢測的樣本，可寄存于2~8℃；在一周后來檢測的樣本，須寄存于-20℃。樣本運輸樣本運輸普通為血清或血漿，不運輸全血。細菌污染，嚴重溶血或脂血標本不能作測定。容器規定：①血清應置于帶蓋的1.5ml離心管內，管外應有明顯的標記，姓名與門診號要清晰；②在離心周邊應墊有可緩沖吸水材料，以免破碎；③隨樣品應附有送檢單，送檢單應與樣本分開放置。④外層容器規定耐受性好、防滲漏、容納并保護第一層容器。天氣過熱，需采用干冰或冰壺冷藏運輸。五、試劑1、試劑名稱：人類免疫缺點病毒（HIV-1+2）抗體診療試劑（膠體金法）。2、試劑生產廠家：天津中新科炬生物制藥有限公司。3、包裝規格：1個測試/包裝袋；25個測試/盒。4、試劑盒構成：單人份包裝測試板，每盒25人份。闡明書一份。第二章原則操作程序【原理】運用雙抗原夾心法檢測HIV抗體。標本加入反映板，若標本中含有HIV抗體時，先與金標抗原反映，形成抗體-金標抗體復合物，在虹吸作用下向前移動，碰到包被抗原形成抗原-抗體-金標抗原復合物，并出現紅色沉淀線。包被膜上同時帶有一條質控包被線作為對照，因此當出現一條紅色質控線和一條（或兩條）紅色反映線時判斷為陽性。當待測標本中無HIV抗體時，只出現一條紅色質控線則判斷為陰性。作為質控，不管成果為陽性或陰性，都會出現一條紅色質控線。如無紅色質控線（或只有反映線）出現，則實驗無效。【HIV篩查實驗操作程序】實驗前準備：實驗開始前將試劑和樣品放置于室溫（18~23℃）半小時。換隔離衣，戴好帽子、口罩、雙層手套。實驗操作：1、去掉外包裝，標記上血清編號；

2、用移液器加50ul的血清或血漿樣品至反映塹；

3、如是全血則需加入1滴Chase緩沖液；

4、等最少15分鐘后讀取成果，最遲不超出60分鐘。

（三）實驗成果1、陽性：出現兩條或三條紅線均為陽性反映。

2、陰性：僅出現質控一條紅線，則實驗成果為陰性。

3、無效：如無紅線（或只有反映線）出現，表明實驗無效，須重新檢測。（四）報告：對呈陰性反映的樣品，可由實施檢測的實驗室出具HIV抗體快速檢測陰性報告；對呈陽性反映的樣品，須進行復檢，不能出陽性報告。第三章成果報告與注意事項【復檢實驗】對快速檢測呈陽性反映的樣品用原有試劑和另外一種不同原理或不同廠家的篩查試劑重復檢測。如兩種試劑復測均呈陰性反映，則報告HIV抗體陰性；如均呈陽性反映，或一陰一陽，需送艾滋病確認實驗室進行確認。（具體詳見流程圖）【篩實驗成果的報告】對HIV抗體快速檢測實驗，呈陰性反映者可出具“HIV抗體陰性”報告。對快速檢測實驗呈陽性反映者不能出陽性報告，可出具“HIV抗體待復查”報告。【初篩實驗呈陽性反映樣品的轉送】如需送上級實驗室進行復測或確認，需要填寫“HIV抗體復測送檢單”，經1名檢查人員和1名含有中級以上技術職稱的人員審核簽字，與血樣品一同送天山區疾控中心實驗室，再轉送市疾控中心艾滋病確認實驗室，或在本實驗室復檢后直接送確認實驗室。【操作臺消毒解決】用3~5%84消毒液擦拭臺面，如工作臺被溢出物污染，則用消毒液浸泡30分鐘后，再行擦拭。【房間消毒】

每日用紫外線照射30~60min【辦法學特性及注意事項】試劑盒4~30℃干燥保存。使用期16個月。抗凝全血應采用EDTA，樣品應避免溶血。樣品應在收集后7天內檢測，2~8℃保存，如果不不大于7天，應冷凍保存。測試卡僅用于HIV抗體的現場初篩，檢測陽性必須用ELISA辦法進一步確認。樣本的加樣應使用微量加樣器精確加入。實驗環境應保持一定濕度、避風，18~25℃進行。本試劑盒應視為有感染源的物品，應按生物危險樣品解決。第三部分流程圖HIV快速檢測方略，根據檢測點現場條件可分為下列二類3.1當檢測點上有兩種快速檢測試劑時3.1.1常規檢測：3.1.1.1初篩實驗，用敏感性高的快速檢測試劑，成果為陰性，則報告陰性；成果為陽性反映，則進入復檢實驗。3.1.1.2復檢實驗，在同一