1.實驗原理：

2.影響植物組織培養(yǎng)的因素專題3植物的組織培養(yǎng)專題4酶的研究與應用一、植物組織培養(yǎng)的實驗原理、影響因素、過程植物細胞的全能性影響植物組織培養(yǎng)的因素1.材料因素的影響不同的植物組織，培養(yǎng)的難易程度差別很大，容易進行無性繁殖的植物也容易進行組織培養(yǎng)。同一種植物材料，材料的年齡、保存時間的長短也有影響。幼齡、保存時間短的植物材料容易培養(yǎng)成功。2.營養(yǎng)因素的影響學.科.網zxxk.需要配制適宜的培養(yǎng)基，常用的一種培養(yǎng)基是MS培養(yǎng)基，其主要成分包括：大量元素、微量元素、有機物以及蔗糖等。3.激素的影響植物激素中生長素和細胞分裂素是啟動細胞分裂、脫分化和再分化的關鍵激素。植物激素的濃度、使用的先后順序以及用量的比例等，都會影響實驗結果。

(1)按照不同的順序使用這兩種激素，會得到不同的實驗結果有利于細胞分裂，但細胞不分化細胞既分裂又分化分化頻率提高(2)兩種用量的比例影響植物細胞的發(fā)育方向

4.pH、溫度、光照等條件的影響不同的植物對各種條件的要求往往不同。有利于根的分化，抑制芽的形成有利于芽的分化，抑制根的形成促進愈傷組織的生長3、植物組織培養(yǎng)過程:離體組織或細胞植物體脫分化細胞分裂素≈生長素愈傷組織芽根細胞分裂素>生長素細胞分裂素<生長素再分化不需要光需要光1.植物組織培養(yǎng)是指(

)A.離體的植物器官、組織或細胞培育成愈傷組織B.愈傷組織培育成植株學.科.網zxxk.C.離體的植物器官、組織或細胞培育成完整植物體D.愈傷組織形成并液泡化【答案】C2．利用植物組織培養(yǎng)的方法可快速、大量繁殖植物，在培養(yǎng)過程中，取該植物的花芽并將其分別培養(yǎng)在含有不同比例的吲哚乙酸和細胞分裂素的培養(yǎng)基中，花芽的生長狀況如下表所示：(1)在此過程中能實現(xiàn)脫分化的花芽是________組。從實驗結果可以看出，能誘導新的花芽形成的條件是________________________。(2)上述實驗結果說明，在植物組織培養(yǎng)過程中，誘導芽和根形成的關鍵是___________________________。在生產實踐中，欲快速大量獲得此植物的花芽，可選用________組的培養(yǎng)基進行擴大生產。

培養(yǎng)基中細胞分裂素含量與生長素含量之間的比例(或培養(yǎng)基中細胞分裂素與生長素的濃度比B、C、D細胞分裂素濃度大于生長素濃度D二、被子植物花粉的發(fā)育過程雙核期小孢子四分體時期單核期小孢子母細胞花粉母細胞小孢子減數(shù)分裂有絲分裂花粉管細胞核生殖細胞核有分絲裂精子1個營養(yǎng)細胞生殖細胞4個4個4個4個4個8個（小孢子四分體時期單核居中期單核靠邊期雙核期）三、產生花粉植株的兩種途徑①②移栽花藥中的花粉胚狀體脫分化愈傷組織花藥中的花粉脫分化分化叢芽再分化叢芽誘導生根體細胞胚（胚狀體）：在組織培養(yǎng)過程中，某些細胞在形態(tài)上轉變?yōu)榕c合子發(fā)育成的胚非常相似的結構，發(fā)育過程亦與合子胚類似原因：培養(yǎng)基中的激素種類及濃度配比實驗操作：2、通過鏡檢來確定是否處于適宜的發(fā)育期。方法：醋酸洋紅法(將染色體染成紅色)

焙花青-鉻礬法(花粉細胞核染成藍黑色)。1、從花藥看：從花粉看：

從花蕾看：

花藥（載玻片上）→1%的醋酸洋紅1滴→用鑷柄將花藥搗碎，蓋上蓋玻片→鏡檢（花粉粒的細胞核被染成紅色）花藥（在卡諾氏固定液中處理20min）→取出，置于載玻片上→焙花青－鉻礬溶液染色→蓋上蓋玻片→鏡檢（花粉粒的細胞核被染成藍黑色）

單核期

月季的初花期

完全未開放的

（一）材料選取（二）材料的消毒5、無菌水沖洗3～5次

花藥的外面有花萼、花瓣保護，通常處于無菌狀態(tài)1、花蕾用體積分數(shù)為70%的酒精浸泡30秒2、無菌水清洗3、無菌吸水紙吸干花蕾表面的水分4、放入質量分數(shù)為0.1%的氯化汞溶液中2～4分鐘（質量分數(shù)為1%的次氯酸鈣溶液或飽和漂白粉溶液）（三）接種和培養(yǎng)

1消毒后花蕾，要在

下除去萼片和花瓣，并立即將花藥接種到培養(yǎng)基上。3通常每瓶接種花藥

，溫度控制在

左右，

。幼小植株形成后才

。2在剝離花藥時，要盡量

（否則接種后，容易從受傷部位產生二倍體的愈傷組織），同時還要徹底

，因為與花絲相連的花藥不利于愈傷組織或胚狀體的形成。一般經過20-30天培養(yǎng)后，會發(fā)現(xiàn)花藥開裂，長出愈傷組織或釋放出胚狀體。將愈傷組織及時轉移到分化培養(yǎng)基上，以便進一步分化出再生植株。

4進一步鑒定和篩選：常常會出現(xiàn)染色體倍性的變化無菌條件不損傷花藥去除花絲7-10個25℃不需要光照需要光照二、酶的研究與應用1．影響果汁產量的物質及處理方法(1)影響果汁產量的物質①種類：②造成的問題：(2)處理方法——常用的酶及其作用特點如下：纖維素、果膠。果肉的出汁率低，耗時長；果汁渾濁、黏度高，易發(fā)生沉淀。酶解法多聚半乳糖醛酸酶果膠分解酶果膠酯酶C1酶、Cx酶葡萄糖苷酶蛋白質蛋白質催化果膠分解成為可溶性的半乳糖醛酸2.探究不同種類的加酶洗衣粉的洗滌效果(1)實驗原理；酶的催化作用具有專一性，復合酶洗衣粉加入的酶制劑種類較多，與單一加酶洗衣粉相比，對各種污漬都有較好的洗滌效果。(2)實驗變量①自變量：②無關變量：③實驗步驟學.科.網zxxk.不同種類的加酶洗衣粉其他條件相同且適宜(如溫度、pH等)一）固定化酶的應用實例1）.固定化酶的反應柱示意圖：將酶固定在一種顆粒狀的載體上，再將這些酶顆粒裝到一個反應柱內，柱子底端裝上分布著許多小孔的篩板。酶顆粒無法通過篩板的小孔，而反應溶液卻可以自由出入。2）.利用固定化酶技術生產高果糖漿的實例：高果糖漿的生產需要使用葡萄糖異構酶，它能將葡萄糖轉化成果糖。生產過程中，將葡萄糖溶液從反應柱的上端注入，使葡萄糖溶液流過反應柱，與固定化葡萄糖異構酶接觸，轉化成果糖，從反應柱的下端流出。3、酵母細胞的固定化反應柱能連續(xù)使用半年，大大降低了生產成本，提高果糖的產量和質量。優(yōu)點：概念：利用物理或化學方法將酶或細胞固定在一定空間的技術。包埋法化學結合法物理吸附法二）固定化酶技術和固定化細胞技術固定化酶或者固定化細胞分別適用哪些方法？原因？適用于固定化酶適用于固定化細胞包埋法是指將微生物的細胞均勻包埋在不溶于水的多孔性載體中，常用的載體有明膠、瓊脂糖、海藻酸鈉、聚丙烯酰胺等。化學結合法是指將酶分子或細胞相互結合或將其結合到載體上物理吸附法是指將酶吸附到固體吸附劑的表面三）、固定化酶與固定化細胞(1)方法：包埋法、化學結合法和物理吸附法。(2)比較一種一系列