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荷斯坦泌乳牛亞臨床酮病的診斷
酮病是一種常見的營(yíng)養(yǎng)代謝疾病,可分為臨床和子臨床。而亞臨床酮病臨床癥狀不明顯,但血酮值升高(10~20mg/dl),泌乳量有所下降,體重有所減輕,會(huì)造成奶牛泌乳性能的下降。一般認(rèn)為酮病的發(fā)生與泌乳早期能量的負(fù)平衡有關(guān),而能量的負(fù)平衡又與產(chǎn)前的飼養(yǎng)管理不當(dāng)有關(guān)。國(guó)內(nèi)外已有各種酮粉試劑檢測(cè)尿酮、乳酮,以診斷亞臨床酮病,但其應(yīng)用效果不一。本試驗(yàn)通過對(duì)奶牛尿酮、乳酮和血酮的測(cè)定,探討亞臨床酮病早期診斷的理論依據(jù),尋求早期診斷、預(yù)防亞臨床酮病的適宜的時(shí)機(jī)和方法,為預(yù)防和控制亞臨床酮病的發(fā)生提供早期科學(xué)的診斷依據(jù)。1材料和方法1.1分組及各程度的劃分牡丹江管局8511農(nóng)場(chǎng)某兩個(gè)連隊(duì),隨機(jī)選取奶牛106頭,根據(jù)尿酮定性測(cè)定陽性程度分成5組。分別為陰性組(-)和陽性4組(+、++、+++、++++)。將產(chǎn)犢的45頭奶牛(4~10歲,胎次在2~7胎),分5組,每組9頭,1組為產(chǎn)后1~2天,2組為產(chǎn)后5天,3組為產(chǎn)后10天,4組為產(chǎn)后15天,5組為產(chǎn)后20天。1.2樣品采集每日清晨3~4時(shí),采集新鮮尿液,盡快送檢。同時(shí)對(duì)應(yīng)的采取新鮮乳汁、尾動(dòng)脈血,分離血漿、血清,盡快送檢。1.3測(cè)試項(xiàng)目和設(shè)備1.3.1血糖試驗(yàn)glummol/L,試劑盒批號(hào)20010201,購(gòu)自北京中生生物工程高科技公司。1.3.2血酮、尿酮和乳酮的測(cè)定mg/dL,水楊醛比色法[2~8]。1.3.3關(guān)于尿酮和乳酮的測(cè)定酮粉法。陽性判定標(biāo)準(zhǔn)為:“-”無顏色變化;“+”呈粉紅色;“++”紅紫色;“+++”紫色;“++++”黑紫色。1.3.4儀器722光柵分光光度計(jì),半自動(dòng)生化分析儀。統(tǒng)計(jì)分析采用F檢驗(yàn)。2結(jié)果與分析2.1乳液中檢出率由表1可見,利用酮粉法定性判定奶牛酮體陽性率,尿液中檢出率(為29.25%)高于乳汁中的檢出率(為10%)。只有尿酮定性測(cè)定在“+++”以上者,在乳中才出現(xiàn)酮體陽性變化,乳酮陽性變化出現(xiàn)在尿酮“+++”以上者,約占77.78%。2.2血糖和血酮、乳酮的含量由表2可知,尿檢“++++”者,血酮、乳酮和尿酮極顯著(P<0.01)高于其他各組,血酮含量達(dá)到亞臨床酮病的水平。血糖極顯著地低于其他各組(P<0.01),并且血糖含量低于正常值。尿檢“+++”者,尿酮極顯著高于“+”、“++”和“-”者,血糖與其他各組的差異不顯著(P>0.05)。血糖、血酮、乳酮在“-”、“+”、“++”、“+++”組之間差異不顯著。尿酮在“-”、“+”、“++”組之間差異不顯著。由表2可見,隨尿檢陽性程度的升高,血、乳、尿酮體含量呈上升趨勢(shì),而血糖則呈現(xiàn)下降趨勢(shì)。2.3尿中的酮體檢測(cè)情況由表3可見,在產(chǎn)后的1~2天就能檢出尿中酮體,只是陽性率低(2.22%)呈現(xiàn)+,有文獻(xiàn)指出可能與脂肪肝的存在有關(guān)。產(chǎn)后5天左右未檢出尿中的酮體,而產(chǎn)后10天、15天和20天,酮體陽性率明顯增加分別為4.44%、8.88%、8.88%,隨產(chǎn)后時(shí)間的增加,陽性的程度也逐漸增加,到產(chǎn)后15天、20天呈現(xiàn)出“++”、“+++”共占8.88%。這些表明產(chǎn)后10天尿中酮體開始增多,陽性程度也越來越重。所以,對(duì)奶牛酮病的早期診斷應(yīng)在產(chǎn)后10天左右開始,這和一些文獻(xiàn)報(bào)道相一致(奶牛酮病多發(fā)生于產(chǎn)后20天以內(nèi),最遲不超過6周)。3酮粉法測(cè)定尿酮的檢測(cè)奶牛亞臨床酮病的臨床診斷較為困難,尋找快速、準(zhǔn)確、實(shí)用的早期診斷方法一直是研究奶牛酮病的熱點(diǎn)。有文獻(xiàn)指出酮體粉可用于尿酮、乳酮的檢測(cè),并可作為酮病早期診斷的方法。但是,應(yīng)用效果不盡相同。在診斷奶牛亞臨床酮病的過程中,除考慮酮體變化外,還要考慮到血糖的變化。本研究平行檢測(cè)血酮、尿酮、乳酮的含量及尿酮、乳酮的酮體粉陽性檢測(cè),結(jié)果表明酮粉法檢測(cè)尿酮具有早期、靈敏等優(yōu)點(diǎn),但存在陽性率增高的缺點(diǎn),與有些文獻(xiàn)報(bào)道一致;酮粉法檢測(cè)乳酮具有準(zhǔn)確、方便等優(yōu)點(diǎn),但有靈敏性較低的缺點(diǎn)。這些特點(diǎn)可能與尿酮含量較高、變化較大;而乳酮含量較少、變化較少有關(guān)。本試驗(yàn)表明結(jié)合酮粉法檢測(cè)尿酮、乳酮的優(yōu)點(diǎn),有利于提高定性檢測(cè)的靈敏性、準(zhǔn)確性,并有利于早期診斷。4酮粉法檢測(cè)酮體綜上所述,該牛場(chǎng)亞臨床酮病其發(fā)病率為10%。尿中酮體在10天左右排出增加,在15~20天,尿酮陽性程度可達(dá)“+++”以上,酮體含量尿酮>血酮>乳酮。酮粉法
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