沙門氏菌檢測試劑盒說明書概述REAGEN沙門氏菌酶聯免疫檢測試劑盒是用來檢測食品和飼料中沙門氏菌的含量。沙門氏菌是腸桿菌家族的一種革蘭氏陰性菌，作為一種食品傳播疾病的傳染源，在家禽、肉、雞蛋中可發現沙門氏菌。通常沙門氏菌可導致沙門氏菌病，檢測食品中沙門氏菌既費力又費時。REAGENM沙門氏菌酶聯免疫檢測試劑盒為國家管理部門、食品生產商、質檢部門提供了方便有效的方法，檢測水平為105細胞/ml。試劑盒原理該試劑盒基于酶聯免疫檢測原理，沙門氏菌的單克隆抗體包被在微孔內。分析過程中，如果樣品中有沙門氏菌存在，當加入樣品時，即可與單抗結合，在孔中加入適當的培養液可以快速增菌。酶標記的二抗與板孔中包被的一抗結合，加入底物后顏色的深淺與樣品中沙門氏菌的含量相關。試劑盒組成抗體包被的酶標板(Salmonellaantibody-coatedPlate)(可拆式)12X8孔1X陰性對照(1XSalmonellaNegativeControl) 1X1ml1X陽性對照(1XSalmonellaPositiveControl) 1X1ml50XHRP-二抗(HRP-ConjugatedAntibody#2) 3X50ml二抗稀釋液(Antibody#2Diluent) 1X20ml20X濃縮洗液(Washsolution) 1X28mL終止液(StopBuffer) 1X20mLTMB底物(TMBSubstrate) 1X12mL本試劑盒應當在2-8°C的溫度下儲存，有效期為一年。如果超過3個月不使用試劑盒，請將陰性對照、陽性對照、二抗保存于-20°C。4.檢測限：105細胞/ml交叉反應：本試劑盒可檢測沙門氏菌A、B、C、D、E血清型。其他需要而本試劑盒未提的設備或材料u酶標儀（450nm）u恒溫培養箱u漩渦振蕩器u移液器（10、20和100mL,1mL各一支）u多道移液槍：50-300ul（可選擇）mGN培養基：包含10ug/ml新生霉素的GN培養基，可從市場上購買或按以下配方自制：革蘭氏陰性培養基（GN培養基或HajnaGN培養基，pH7.0±0.2）TOC\o"1-5"\h\z胰蛋白(Tryptose) 20.0g葡萄糖(Dextrose) 1.0gD-甘露醇(D-Mannitol) 2.0g檸檬酸鈉(Sodiumcitrate) 5.0g脫氧膽酸鈉(Sodiumdesoxycholate) 0.5g磷酸氫二鉀(Dipotassiumphosphate) 4.0g磷酸二氫鉀(Monopotassiumphosphate) 1.5gNaCl(Sodiumchloride) 5.0g去離子水(Distilledwater) 1.0L將上述成分溶解在水中，121°C高溫滅菌15min，避免過度加熱。u高壓滅菌鍋u500ml培養瓶u增菌培養基u檢測培養基u去離子水注意事項實驗前請閱讀以下文字，以保證獲得最佳實驗效果。u樣品中含有沙門氏菌，請小心使用。u進行樣品準備過程中，操作人員必須有好的微生物操作技能。u不要使用過期的試劑盒。u不同批次的試劑盒不要混用，確保二抗正確稀釋。u盡量保持室溫20-25r，避免在通風口操作防止溫度過低，過熱和/或者蒸發。同樣的，不要在陽光直射下實驗，防止過熱及蒸發。在孵育期間，如果工作臺溫度過低，應該鋪墊若干紙巾或者其他物料。水質量很重要，確保使用蒸餾或者去離子水。U加入樣品或者試劑到空的微孔板時，吸嘴靠于微孔接近底部，并保持接觸。U孵育時間的計算越規范越好