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文檔簡介
甘氨酸的鑒別中國藥典》中的鑒別方法:(1)取本品與甘氨酸對照品各適量,分別加水溶解并稀釋制成每1ml中約含10mg的溶液,作為供試品溶液與對照品溶液。照其他氨基酸項下的色譜條件試驗,供試品溶液所顯主斑點的位置和顏色應與對照品溶液的主斑點相同。(2)本品的紅外光吸收圖譜應與對照的圖譜(《藥品紅外光譜集》929圖)一致。一、實驗目的:1、 了解薄層層析的原理,掌握薄層層析的操作方法。2、 了解紅外光譜法的原理并學會操作相關的儀器。薄層色譜法:一、實驗原理:薄層色譜是一種微量、快速和簡便的色譜方法。由于各種化合物的極性不同,吸附能力不相同,在展開劑上移動,進行不同程度的解析,根據原點至主斑點中心及展化合物的吸附能力與它們的極性成正比,具有較大極性的化合物吸附較強,因此Rf值較小。在給定的條件下(吸附劑、展開劑、板層厚度等),化合物移動的距離和展開劑移動的距離之比是一定的,即Rf值是化合物的物理常數,其大小只與化合物本身的結構有關,因此可以根據Rf值鑒別化合物。開劑前沿的距離,計算比移值(Rf)。二、實驗器材與試劑(1)實驗器材>硅膠板,層析缸,毛細管,鉛筆,展開劑,顯色劑>待測試劑溶液,甘氨酸標準溶液>丙氨酸標準溶液(2)實驗試劑TOC\o"1-5"\h\z展開劑:正丙醇—氨水(7:3) 100ml指示劑:茚三酮一丙酮(1~50)20ml甘氨酸:10mg/ml 10mlL-丙氨酸:10mg/ml 10ml甘氨酸試樣:10mg/ml10ml三、實驗步驟1、試劑準備將待測試劑溶液、甘氨酸標準溶液、丙氨酸標準溶液、展開劑以及茚三酮顯色劑配制2、劃線用鉛筆在硅膠板上距末端一厘米出輕輕畫一橫線。3、點樣用毛細管分別吸取待測樣品溶液、甘氨酸標準溶液、丙氨酸標準溶液,在橫線上輕輕點樣,分別點三次。(點完一次之后等到殘余溶劑滲入之后再點樣,點樣不宜太多,否則會降低Rf值,斑點直徑控制在2毫米,不宜超過5毫米。同時點樣點之間距離在一厘米左右,防止邊緣效應。硅膠板在空氣中放置時間要盡量短,否則會因吸潮而降低活性)4、展層將點了樣的硅膠板放在盛有展開劑(約0?5cm)的展開槽中。(展開劑不能超過一厘米出畫的線。由于毛細管作用,展開劑在硅膠板上緩慢前進,樣品由于與展開劑的親和力不同而分離)距離硅膠板上端二厘米處取出硅膠板。5、顯色待硅膠板自然晾干后,將茚三酮噴灑在硅膠板。觀察待測樣品溶液與哪個標準溶液跑出的線路一樣,判斷出待測樣品的種類。紅外光譜法一、 紅外光譜在化學領域中的應用紅外光譜在化學領域中的應用大體上可分為兩個方面:1、 是用于分子結構的基礎研究,應用紅外光譜可以測定分子的鍵長、鍵角,以此推斷出分子的立體構型;根據所得的力常數可以知道化學鍵的強弱;由簡正頻率來計算熱力學函數。2、 是用于化學組成的分析,紅外光譜最廣泛的應用在于對物質的化學組成進行分析,用紅外光譜法可以根據光譜中吸收峰的位置和形狀來推斷未知物結構,依照特征吸收峰的強度來測定混合物中各組分的含量,它已成為現代結構化學、分析化學最常用和不可缺少的工具。二、 紅外光譜基本原理紅外光譜是由于分子振動能級(同時伴隨轉動能級)躍遷而產生的,物質吸收紅外輻射應滿足兩個條件:1、 輻射光具有的能量與發生振動躍遷時所需的能量相等。2、 輻射與物質之間有偶合作用。三、紅外光譜法的特點1、 特征性高。就像人的指紋一樣,每種化合物都有自己的特征紅外光譜,所以把紅外光譜分析形象的稱為物質分子的“指紋”分析。2、 應用范圍廣。從氣體、液體到固體,從無機化合物到有機化合物,從高分子到低分子都可以用紅外光譜進行分析。3、 用樣量少,分析速度快,不破壞樣品。用紅外分光光度儀檢測,采用壓片法,取殘渣約1?1.5mg,置瑪瑙研缽中,加入干燥的溴化鉀或氯化鉀細粉約200?300mg(與供試品的比約為200:1)作為分散劑,充分研磨混勻,置于直徑為13mm的藥片模具中,使鋪展均勻,抽真空約2min,加壓至(0.8x106)kPa(約8?10T/cm2),保持壓力2min,撤去壓力并放棄后取出制成的供試片,目視檢測,片子應呈透明狀,其中樣品分布應均勻,并無明顯的顆粒狀樣品。亦可采用其他直徑的壓膜制片,樣品與分散劑的用量需相應調整以制得濃度適合的片子。測定。本品的紅外光吸收圖譜應與對照的圖譜(光譜集929圖)一致。
供試品的制辭及測宦I?原料藥鑒鞋雕為有展定蛉?應按照團家葯典癒J6會第訂的<藥晶虹外光謂集》孫崔收載的各光譜圖折規定的方陸制備鋒島.貝怵變作袪術套見*萸品虹外光譜疑4的說(W”采闿固越制樣拉術時?箍常磁到的何蠢是莎亂理象■蝴障肄品的描型不軻?其紅外趾諸注拄也會產生差異卩爭供嵐屈的孌漑光譜與?藥肘虹外光譜卑》所收載前標準此諾不?致時,在排賒各抻可博影響哋惜的外在或人為均嵐樣?購鞍謹藥品兀倍圖中備注的裁仏或各品種項下規定的方信琲幵預處理,再供試品的制辭及測宦I?原料藥鑒鞋雕為有展定蛉?應按照團家葯典癒J6會第訂的<藥晶虹外光謂集》孫崔收載的各光譜圖折規定的方陸制備鋒島.貝怵變作袪術套見*萸品虹外光譜疑4的說(W”采闿固越制樣拉術時?箍常磁到的何蠢是莎亂理象■蝴障肄品的描型不軻?其紅外趾諸注拄也會產生差異卩爭供嵐屈的孌漑光譜與?藥肘虹外光譜卑》所收載前標準此諾不?致時,在排賒各抻可博影響哋惜的外在或人為均嵐樣?購鞍謹藥品兀倍圖中備注的裁仏或各品種項下規定的方信琲幵預處理,再ffiiHJtmr比對.咖未規定滾品種供藥用的晶卿取陌址理方法?則可便州時呢崩?井果用適當的溶鬧對供述品與時懇品在梅同的條件市同吋直和遁結晶’撚后比對.如巳規定特宦的藥用品型?期應采用相應晶礎的時AS品依怯比対.螞果邛固體制樣技術不能洶足鑒擁需黑時*燉業用fiJSl法繪制光睛后比對.2,制劑鑒刖品秤豔別項下應朋確規定制棘的前處現方迭「通倉采用溶削握収陡-提取時應選擇適性的溶時?衣盡可釜誡少耶科的干撫■井力求遊免導致可能的S5SH?,般夙的樣品毎經i£當干謹厲依社進齊紅外3t猶賽別.乩冬述分像輿藥樂劇不能釆用全光譜比對■坍儲笏【就?#^F2(ar的方畝、述樣主要風分的若干牛特tsm^T用于組成棚對理足啊#址分原料藥的醜另此屯晶型、異椅休眼握蜒査或含滋圏定供試晶制益和具技測定方怯閔按AifJiW項FflJ£規宦操柞.【連定事項】「各品種咦F規宦*?應與對雁的屋譜f光謐卑
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