紅曲霉菌株發酵制備-氨基丁酸保健飲料的研究

氨基丙烯酸（gaba）廣泛存在于自然界。這是一種由非蛋白質組成的天然氨基酸。在哺乳動物腦內的含量很高,尤其是高等動物的腦內,它是中樞神經系統的一種抑制性化學遞質,具有抑制血管緊張素轉化酶(angiotensin-convertingenzyme,ACE)的活性1材料和方法1.1實驗田、培養基高產GABA紅曲霉菌株吉林農業大學生物工程實驗室;碧螺春綠茶、菊花茶長春市中東大市場;荷葉、山楂百草大藥房;玉米須吉林農大玉米實驗田;純凈水市購。發酵培養基:改良PDA液體培養基;展開劑:正丁醇-冰醋酸-水=4:1:3(V/V);洗脫劑:0.001g/mLCuSOγ-氨基丁酸上海KAYON試劑公司;葡萄糖、NaNO1.2天平-a-a全溫搖瓶柜、水浴設備開發722E型可見分光光度計上海光譜儀器有限公司;立式壓力蒸氣滅菌器上海華線醫用核子儀器有限公司;電子分析天平德國賽多利斯股份公司;HYG-A全溫搖瓶柜江蘇太倉試驗設備廠;電熱恒溫鼓風干燥箱、DK-S28水浴上海新苗醫療器械制造有限公司;臺式離心機上海安亭科學儀器廠;智能生化培養箱寧波海曙賽福實驗儀器廠;無菌操作臺蘇凈集團安泰公司。1.3方法1.3.1抗高血壓功能：準備飲料的過程1.3.2gaba產量測定將高產GABA紅曲霉菌株接入改良PDA固體平板培養基中,恒溫箱30℃活化培養72h。制備改良PDA液體培養基1000mL,每250mL錐形瓶中裝入50mL,分裝20瓶滅菌,取上述活化的直徑8mm紅曲霉菌餅接入培養基,pH值自然,40℃條件下120r/min搖床發酵培養48h取發酵液分析檢測GABA產量1.3.3測試GABA的含量測量采用改良紙層析法1.3.4飲料準備1.3.4.菊花玉米須的制備按綠茶與水的比例為1:50稱取20g綠茶,用1L沸水煮沸5min后加入白砂糖80g,攪拌溶解后過濾,得茶汁備用。精確稱取菊花6g,沸水煮沸5min后過濾,將濾液繼續加熱濃縮至300mL,備用。由于玉米須為野外采摘,所以應先用清水清洗,去除泥土、沙石及其他雜質,再用2%食鹽水浸泡10~20min,用以清除上面的病菌、蟲卵及殘留的農藥,然后再用清水漂洗,烘箱烘干。按比例稱取一定量干荷葉、山楂、玉米須,水煎30min后過濾備用。1.3.4.2配置為使本發酵飲料中GABA的含量較高,調配采用L1.3.5菌種活化與培養將調配好的飲料基液加純凈水至100mL,密封后在0.1MPa壓力下,121℃高壓滅菌20min,而后待冷卻至室溫時在無菌操作臺分別接入活化72h的直徑為8mm的菌餅,然后在40℃條件下,120r/min搖床發酵培養48h。1.3.6測試將發酵培養48h的發酵液同樣用改良后的紙層析法進行測定,選取GABA含量最高的組作為該發酵飲料的原料配比最佳方案。1.3.7味道很好為使配制的發酵飲料的色、香、味達到理想程度,口味的調配采用L1.3.8消毒將調配好的9組發酵飲料密封后,于0.1MPa、121℃高壓滅菌4min,或者高溫瞬時殺菌5s,冷卻后即為成品。1.3.9評估標準對飲料進行感官評價評分,評分標準如表3所示。2結果與分析2.1不同濃度gaba含量的發酵飲料由表4可知,通過發酵飲料4種原料配比正交試驗,測定各試驗組GABA含量,發酵飲料中影響GABA產量的順序為C>B>A,即荷葉-山楂-玉米須提取液>菊花>茶汁。根據單因素和極差分析統計結果確定最佳配比方案為A2.2飲料配方的確定由表5可知,通過對發酵飲料選定的白砂糖、香精、抗氧化劑、茶汁進行四因素三水平正交試驗,確定影響該飲料口味的主要因素主次為A>D>B>C,即白砂糖>茶汁>香精>抗氧化劑。根據單因素和SPSS統計軟件極差分析,確定最佳口味調配方案為A3gaba發酵飲料的制備工藝及配方優化本實驗采用高產GABA紅曲霉菌株進行發酵獲得大量GABA發酵物,制備的發酵飲料主要降壓物質為GABA,含量0.26g/L,制備的發酵飲料具有降壓保健作用。據相關研究資料表明,連續服用GABA可有效抑制血壓上升,長期飲用富含GABA的飲料,對平穩血壓具有更明顯的保健作用富含GABA發酵飲料的研制中,原料工藝優化通過正交試驗確定最佳原料配比為綠茶汁50%、菊花提取液8%、荷葉-山楂-玉米須提取液14%。感官口味調配優化通過正交試驗確定最佳配比為白砂糖7