滅活疫苗專題知識(shí)疫苗活疫苗-------減毒活疫苗減毒不夠：在使用時(shí)有致病的可能性過(guò)分減毒：造成免疫原性不足或喪失，失去活疫苗的效力滅活疫苗2滅活疫苗專題知識(shí)傳統(tǒng)的滅活疫苗將病原體(病毒、細(xì)菌及其他微生物)經(jīng)培養(yǎng)增殖、滅活、純化處理使其完全喪失感染性具有較好的安全性保留了病原體的幾乎全部組分具有較強(qiáng)的免疫原性3滅活疫苗專題知識(shí)傳統(tǒng)滅活疫苗的缺點(diǎn)制備滅活疫苗需要大量抗原難以培養(yǎng)或尚不能培養(yǎng)的病原體（乙型、丙型和戊型肝炎病毒及麻風(fēng)桿菌等）難以制備或無(wú)法以制備危險(xiǎn)性大的病原體（艾滋病病毒）存在較大風(fēng)險(xiǎn)基因工程手段---新型疫苗4滅活疫苗專題知識(shí)第一節(jié)

滅活疫苗概述及現(xiàn)況5滅活疫苗專題知識(shí)一、滅活疫苗概述

滅活疫苗：用免疫原性強(qiáng)的病原微生物或其代謝產(chǎn)物，接種于動(dòng)物、雞胚、組織或細(xì)胞培養(yǎng)物中生長(zhǎng)繁殖后，經(jīng)滅活處理使其失去致病力，但仍保留免疫原性而制成的生物制劑。6滅活疫苗專題知識(shí)滅活疫苗主要成分：由細(xì)菌體或病毒顆粒組成疫苗中含有的菌體或病毒顆粒是“死”的，故又稱作死疫苗。接種途徑：通常是注射途徑進(jìn)入人體后不能生長(zhǎng)繁殖，故比較安全、穩(wěn)定需多次接種，才能產(chǎn)生比較牢固的免疫力。7滅活疫苗專題知識(shí)滅活疫苗細(xì)菌性滅活疫苗1886年，加熱方法滅活豬霍亂菌1896年，制備全霍亂弧菌滅活免疫原1935年，福爾馬林乙型腦炎鼠腦疫苗1937年，用雞胚生產(chǎn)流腦滅活疫苗病毒性滅活疫苗1949年，發(fā)明人體胚胎組織體外培養(yǎng)方法，使病原體的體外培養(yǎng)成為可能8滅活疫苗專題知識(shí)二、滅活疫苗的研究現(xiàn)狀

近年的研究方向:（1）針對(duì)其不足部分，進(jìn)行不斷改進(jìn)和完善；（2）探索新的研制途徑。9滅活疫苗專題知識(shí)二、滅活疫苗的研究現(xiàn)狀

具體來(lái)說(shuō)：（1）增強(qiáng)其誘導(dǎo)的免疫反應(yīng)、改進(jìn)疫苗免疫效果、延長(zhǎng)持續(xù)時(shí)間；（2）選擇新的滅活劑，并探索現(xiàn)有滅活劑對(duì)病原體的作用原理，不斷研制新疫苗。10滅活疫苗專題知識(shí)二、滅活疫苗的研究現(xiàn)狀

病毒性滅活疫苗脊髓灰質(zhì)炎滅活疫苗甲型肝炎流行性乙型腦炎流感細(xì)菌性滅活疫苗

11滅活疫苗專題知識(shí)（1）脊髓灰質(zhì)炎滅活疫苗

(inactivatedpoliomyelitisvaccine，IPV)研究始于1909年，但進(jìn)展緩慢。1952年，Salk用猴腎上皮細(xì)胞培養(yǎng)了三個(gè)血清型的病毒1953年，制備出IPV(又稱Salk疫苗)免疫人體，獲得較高效價(jià)的血清中和抗體中和進(jìn)入血液中的脊髓灰質(zhì)炎病毒，從而防止麻痹癥的出現(xiàn)。1955年開(kāi)始在美國(guó)、加拿大和歐洲國(guó)家逐漸推廣使用，取得了良好的保護(hù)效果。12滅活疫苗專題知識(shí)（1）脊髓灰質(zhì)炎滅活疫苗的制備猴腎細(xì)胞、人二倍體細(xì)胞或Vero細(xì)胞病毒病毒懸液滅活37°C，pH7.0，福爾馬林（1:4000）脊髓灰質(zhì)炎滅活疫苗12--15天皮下注射三次接種13滅活疫苗專題知識(shí)（2）甲型肝炎甲型肝炎病毒(hepatitisAvirus，HAV)引起的急性傳染病，主要通過(guò)糞-口途徑傳播。病毒的體外培養(yǎng)原代恒河猴肝細(xì)胞傳代恒河猴胚腎細(xì)胞株(FRhK6)HAV滅活疫苗Havrix（美國(guó)SmithKline公司）Vaqta（美國(guó)Merck公司）AVAXIM（法國(guó)巴斯德血清和疫苗研究所）

1979年，Provost和Hilleman14滅活疫苗專題知識(shí)（3）流行性乙型腦炎夏秋季，經(jīng)蚊子叮咬傳播，是人畜共患的中樞神經(jīng)系統(tǒng)傳染病。1954年，滅活疫苗在日本問(wèn)世（中山株/鼠腦）1968年，中國(guó)從開(kāi)始生產(chǎn)（P3株/原代倉(cāng)鼠腎細(xì)胞）1988年，WHO頒布了生產(chǎn)規(guī)程。

15滅活疫苗專題知識(shí)（4）流感由流感病毒引起的，具有高度傳染性的急性呼吸道傳染病流行病學(xué)特點(diǎn):突然暴發(fā)，迅速蔓延影響面大，發(fā)病率高伴有一定的死亡率。16滅活疫苗專題知識(shí)（4）流感流感病毒的毒粒表面的抗原變異問(wèn)題血凝素(hemagglutinin，HA)神經(jīng)氨酸酶(neuramindase，NA)17滅活疫苗專題知識(shí)抗原性的變異形式

-------甲型流感病毒抗原漂移亞型內(nèi)HA和/或NA不斷發(fā)生點(diǎn)突變突變不斷積累，使抗原位點(diǎn)發(fā)生構(gòu)型改變導(dǎo)致人群特異性免疫失敗導(dǎo)致流感病毒流行抗原變異指一種新HA和/或NA亞型在人群中突然出現(xiàn)，起因未明。量變質(zhì)變18滅活疫苗專題知識(shí)流感病毒抗原特點(diǎn)：抗原的多變性抗原的漂移存在多種亞型（1）人類對(duì)流感病毒普遍的易感性（2）不易從以往獲得的抗體，得到有效的保護(hù)導(dǎo)致因此，雖然1937年就用雞胚培養(yǎng)流感病毒獲得成功，但至今尚無(wú)十分滿意的制品。19滅活疫苗專題知識(shí)流感病毒疫苗長(zhǎng)春生物制品研究所新型精制三價(jià)流行性感冒滅活疫苗臨床免疫效果評(píng)價(jià)（2000年）臨床反應(yīng)輕微（0.98%）血清抗體陽(yáng)轉(zhuǎn)率99%-100%1年以上好免疫力持續(xù)時(shí)間疫苗穩(wěn)定性總反應(yīng)率：與國(guó)外同類疫苗無(wú)明顯差別，具有良好的安全性。20滅活疫苗專題知識(shí)2.細(xì)菌性滅活疫苗

致病機(jī)理、免疫機(jī)理研究長(zhǎng)期無(wú)突破性進(jìn)展因此難以進(jìn)行疫苗研制，使有些疾病長(zhǎng)期得不到有效控制。細(xì)菌本身結(jié)構(gòu)組成復(fù)雜基礎(chǔ)研究的滯后21滅活疫苗專題知識(shí)2.細(xì)菌性滅活疫苗

存在問(wèn)題：有些病原體屬于人畜共患，解決起來(lái)較為困難;消化道傳染病:疫苗誘生的局部免疫力較弱，免疫力持續(xù)時(shí)間較短，使用效果往往不好，易于重復(fù)感染;有的滅活疫苗副作用大，甚至引起嚴(yán)重后遺癥或造成死亡，可接受性極差。22滅活疫苗專題知識(shí)（1）傷寒桿菌滅活疫苗傷寒桿菌----引起傷寒發(fā)病的主要病原1886年，英國(guó)的Wright、德國(guó)的Pfeiffer和Kolle分別制備出全菌體滅活疫苗丙酮滅活疫苗：保護(hù)率較高，但副反應(yīng)也高，難以推廣。Vi莢膜多糖疫苗：安全，但保護(hù)率又較低。23滅活疫苗專題知識(shí)（1）傷寒桿菌滅活疫苗新型傷寒疫苗Ty21a活疫苗口服活疫苗，保護(hù)率達(dá)96%，目前已在全世界使用;Vi莢膜多糖疫苗將傷寒桿菌培養(yǎng)后，對(duì)其Vi莢膜多糖抗原進(jìn)行提純精制的一種組分疫苗制備工藝簡(jiǎn)單，安全性好，已在全球推廣使用，目前我國(guó)多家生物制品單位均能生產(chǎn)。24滅活疫苗專題知識(shí)（2）霍亂滅活疫苗霍亂弧菌引起的一種烈性傳染病1884年，F(xiàn)erran研制出霍亂疫苗（注射）保護(hù)期短，副反應(yīng)大?；魜y全菌體滅活疫苗(wholecellvaccine，WCV)霍亂WCV-霍亂毒素B亞單位(Bsubunitofcholeratoxin，CTB)對(duì)小鼠胃腸外免疫，能抵御霍亂毒素(choleratoxin，CT)2.25-3LD50的攻擊，免疫效果與CVD103-HgR減毒活疫苗相同。25滅活疫苗專題知識(shí)（2）霍亂滅活疫苗口服B亞單位-全菌體(Bsubunit-wholecell，BS-WC)霍亂疫苗（1980’s，瑞典）疫苗的保護(hù)期：3年頭半年保護(hù)率是85%，3年后是51%。26滅活疫苗專題知識(shí)（2）霍亂滅活疫苗重組霍亂毒素B亞單位-全菌體疫苗(recombi-nantBsubunit-wholecell，rBS-WC),又稱凍干口服霍亂疫苗中國(guó)軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院（1997年）2000年取得國(guó)家一類新藥證書免疫保護(hù)時(shí)間：3年。獨(dú)到之處：生產(chǎn)B亞單位抗原的工程菌是大腸桿菌，較國(guó)外用霍亂減毒株工藝操作安全、方便;疫苗劑型是膠囊，較國(guó)外的水劑便于服用且價(jià)格低廉。27滅活疫苗專題知識(shí)（3）百日咳滅活疫苗兒童常見(jiàn)的呼吸道傳染病，傳染性強(qiáng)，臨床上主要引起痙孿性陣咳。1932年，Kendrick用羊血包姜培養(yǎng)基，經(jīng)硫柳汞滅活制備疫苗成功；1981年，純化百日咳桿菌抗原組成的無(wú)細(xì)胞百日咳疫苗（日本）優(yōu)點(diǎn)：青少年和成人較易接受，并有可能實(shí)施加強(qiáng)免疫。28滅活疫苗專題知識(shí)（3）百日咳滅活疫苗2001年3月，日本一個(gè)科研小組使用茶葉中的兒茶素制造無(wú)毒百日咳疫苗獲得成功，免疫功能更強(qiáng)，副作用更小。福爾馬林滅活的疫苗：常常引起炎癥等病癥兒茶素滅活的疫苗：不會(huì)產(chǎn)生這些副作用29滅活疫苗專題知識(shí)滅活疫苗的研究現(xiàn)狀

1.病毒性滅活疫苗脊髓灰質(zhì)炎滅活疫苗甲型肝炎流行性乙型腦炎流感2.細(xì)菌性滅活疫苗

傷寒桿菌霍亂百日咳3.

無(wú)針注射免疫法30滅活疫苗專題知識(shí)3.無(wú)針（噴射）注射器起源：美軍細(xì)菌戰(zhàn)的發(fā)明在疫苗接種的應(yīng)用：

1954年，白喉和破傷風(fēng)類毒素疫苗的大規(guī)模接種原理：通過(guò)細(xì)小、有高壓的疫苗液體流，直接注射到皮下。31滅活疫苗專題知識(shí)3.無(wú)針（噴射）注射器32滅活疫苗專題知識(shí)無(wú)針注射法的免疫應(yīng)答效果法國(guó)和南非（共1500多人）流感滅活疫苗(Vaxigrip)Vi多糖傷寒疫苗(TyphimVi)破傷風(fēng)類毒素(Tetavax)百白破全細(xì)胞疫苗(DTCoq)甲肝滅活疫苗(Avaxim)與常規(guī)注射器在皮下、皮內(nèi)、肌內(nèi)等免疫途徑進(jìn)行了比較。33滅活疫苗專題知識(shí)無(wú)針注射法的免疫應(yīng)答效果評(píng)估標(biāo)準(zhǔn)血清抗體陽(yáng)轉(zhuǎn)率抗體幾何平均滴度值注射部位的局部反應(yīng)結(jié)果抗白喉和抗破傷風(fēng)的陽(yáng)轉(zhuǎn)率偏低其他的疫苗免疫效果均高于或與常規(guī)接種方法一致接種時(shí)的局部反應(yīng)都很小，而且都是瞬時(shí)的。34滅活疫苗專題知識(shí)3.無(wú)針（噴射）注射器優(yōu)點(diǎn)：使用便捷，每次接種只需更換疫苗管；無(wú)需人員的專業(yè)培訓(xùn)；更好地激發(fā)機(jī)體產(chǎn)生良好的免疫應(yīng)答與常規(guī)肌內(nèi)注射相比，注射部位淺，但所造成的創(chuàng)面更大，而且疫苗被輸送到表皮深層，在這個(gè)部位有更多的免疫細(xì)胞(如巨噬細(xì)胞、樹(shù)突狀細(xì)胞等)，抗原能夠更好地和這些細(xì)胞結(jié)合35滅活疫苗專題知識(shí)三、聯(lián)合免疫研究現(xiàn)狀理想的疫苗：含有多種有良好免疫原性和穩(wěn)定性的抗原、生產(chǎn)成本低廉、接種途徑簡(jiǎn)單以及一次接種能產(chǎn)生多種免疫和無(wú)毒副作用的疫苗。1991年，兒童免疫計(jì)劃(Children‘sVaccineInitiative，CVI）改進(jìn)現(xiàn)有疫苗，并創(chuàng)制新的疫苗聯(lián)合免疫得到了進(jìn)一步的推進(jìn)。36滅活疫苗專題知識(shí)37滅活疫苗專題知識(shí)聯(lián)合疫苗的分類多聯(lián)疫苗預(yù)防不同病原體引起的傳染病百白破聯(lián)合疫苗——預(yù)防百日咳、白喉和破傷風(fēng)三種不同的傳染病多價(jià)疫苗僅預(yù)防一種病原體不同血清型引起的傳染病肺炎多糖疫苗——由代表23種不同血清型的細(xì)菌多糖組成，但只能預(yù)防肺炎球菌的感染。38滅活疫苗專題知識(shí)影響聯(lián)合免疫效果的因素聯(lián)合疫苗中各組分間的化學(xué)和物理作用可影響疫苗的免疫應(yīng)答。如佐劑、緩沖劑、貯存劑和賦形劑等通常需要重新配伍。39滅活疫苗專題知識(shí)影響聯(lián)合免疫效果的因素多價(jià)疫苗問(wèn)題較易解決，因疫苗中含有相同的成分，其中一個(gè)組分的穩(wěn)定配方通常適用于其他組分，但也需要對(duì)每一個(gè)組分做專門的測(cè)試以保證成品的理化配伍性和穩(wěn)定性?；畈《鹃g可相互干擾，如一個(gè)病毒可因激活免疫應(yīng)而產(chǎn)生干擾素從而抑制另一個(gè)病毒。40滅活疫苗專題知識(shí)影響聯(lián)合免疫效果的因素多聯(lián)疫苗一個(gè)組分的添加劑不一定能保證另一組分的穩(wěn)定性如：DTwcP/IPV聯(lián)合疫苗中，用于DTwcP的防腐劑硫柳汞可破壞IPV活性，故不能混裝在一個(gè)瓶中，需采用雙室注射器。DTwcP：百白破疫苗IPV：脊髓灰質(zhì)炎滅活疫苗41滅活疫苗專題知識(shí)第二節(jié)

滅活疫苗制備的技術(shù)要求42滅活疫苗專題知識(shí)一、滅活疫苗的設(shè)計(jì)要求

1.制備過(guò)程病原體的培養(yǎng)滅活劑和滅活方法的使用疫苗的后處理43滅活疫苗專題知識(shí)（1）病原體的選擇①必需具有很強(qiáng)的免疫原性②具有恒定的培養(yǎng)特性和生化特性，不易變異③易于在人工培養(yǎng)基上或特定的組織或細(xì)胞中培養(yǎng)并可進(jìn)行規(guī)?；a(chǎn)44滅活疫苗專題知識(shí)病原體的選擇④在培養(yǎng)過(guò)程中不產(chǎn)生或產(chǎn)生較小的毒性;⑤制備類毒素的菌種：在培養(yǎng)過(guò)程中能產(chǎn)生大量的典型毒素;⑥要針對(duì)不同的病原血清型選擇符合當(dāng)?shù)亓餍械木?、毒株，以保證所制造的疫苗具有良好的免疫效果45滅活疫苗專題知識(shí)滅活方法的選擇滅活方法的選擇關(guān)系到疫苗質(zhì)量的好壞滅活劑（關(guān)鍵）滅活條件滅活時(shí)間既要考慮其對(duì)疫苗抗原性的破壞作用，同時(shí)又要避免其對(duì)毒素的脫毒后又發(fā)生毒性逆轉(zhuǎn)現(xiàn)象。46滅活疫苗專題知識(shí)細(xì)菌性滅活疫苗和類毒素的制備工藝47滅活疫苗專題知識(shí)福爾馬林對(duì)外毒素脫毒的影響因素研究證明:很低濃度的福爾馬林即能使外毒素完全脫毒并能保持其良好的免疫原性，表明福爾馬林是一個(gè)較為理想的脫毒劑。福爾馬林的脫毒作用較為復(fù)雜，在使用時(shí)要特別注意影響福爾馬林脫毒的四個(gè)因素48滅活疫苗專題知識(shí)福爾馬林對(duì)外毒素脫毒的影響因素溫度pH福爾馬林濃度毒素種類這四者相互聯(lián)系、相互影響，改變其中任何一個(gè)因素都會(huì)產(chǎn)生不同的結(jié)果，故在制備疫苗時(shí)要綜合考慮，選擇最佳的脫毒條件。49滅活疫苗專題知識(shí)福爾馬林對(duì)外毒素脫毒的影響因素①溫度在其他因素固定的條件下溫度越高，脫毒越快脫毒溫度↓類毒化時(shí)間就會(huì)延長(zhǎng)如需加快作用時(shí)間：必須提高福爾馬林濃度和pH。50滅活疫苗專題知識(shí)福爾馬林對(duì)外毒素脫毒的影響因素①溫度-----視具體的疫苗種類而定一般脫毒溫度：37℃-39℃脫毒溫度≥40℃破壞外毒素的抗原性產(chǎn)生外毒素的菌種：在較低溫度下脫毒效果更好51滅活疫苗專題知識(shí)福爾馬林對(duì)外毒素脫毒的影響因素②微酸條件下（pH6.3）脫毒時(shí)間很慢，需要較高的福爾馬林濃度如福爾馬林濃度較高，脫毒完成后會(huì)剩余較多的游離福爾馬林，使類毒素的脫毒過(guò)甚，損害了類毒素效力的穩(wěn)定性。52滅活疫苗專題知識(shí)福爾馬林對(duì)外毒素脫毒的影響因素②堿性條件下脫毒快，可用較低的福爾馬林濃度。pH=7.2~8.6，福爾馬林濃度的使用和pH成反比。在強(qiáng)堿性溶液中脫毒，類毒素的抗原性損失會(huì)加大。因此，外毒素脫毒時(shí)pH很重要，通常以微堿性為最好。53滅活疫苗專題知識(shí)福爾馬林對(duì)外毒素脫毒的影響因素③福爾馬林濃度福爾馬林濃度∝脫毒速率濃度越高，脫毒時(shí)間越快，其抗原性的損失也越大。54滅活疫苗專題知識(shí)福爾馬林對(duì)外毒素脫毒的影響因素④毒素的種類不同種類外毒素分子量和分子結(jié)構(gòu)不一，不同菌株要使用不同培養(yǎng)基不同的外毒素中均含有不同種類及不同濃度的含氮物質(zhì)，如蛋白質(zhì)、肽類和氨基酸等，這些化合物都能與福爾馬林起作用。所以，不同外毒素在脫毒時(shí)所使用的溫度、pH和福爾馬林濃度是不一樣的55滅活疫苗專題知識(shí)二、病毒性滅活疫苗的設(shè)計(jì)及制備要求

病毒病原體自身的結(jié)構(gòu)組成和生物學(xué)活性較為簡(jiǎn)單，在考慮制備滅活疫苗時(shí)，一般將全部病毒顆粒用來(lái)作為疫苗抗原，以尋求其最佳的保護(hù)效果。56滅活疫苗專題知識(shí)病毒性滅活疫苗的優(yōu)點(diǎn)①制備工藝較為成熟，免疫原的穩(wěn)定性高，培養(yǎng)的病毒含量達(dá)到要求滴度即可進(jìn)行大量生產(chǎn)，較易制備多價(jià)疫苗;②由于不存在活病毒顆粒，沒(méi)有感染問(wèn)題，安全性好;③保存方便，一般無(wú)需凍干保存。57滅活疫苗專題知識(shí)病毒性滅活疫苗的缺點(diǎn)①制備疫苗的毒株為強(qiáng)毒株，如在制備過(guò)程中滅活不徹底，極易釀成重大事故;②由于所誘導(dǎo)的免疫反應(yīng)持續(xù)時(shí)間較短，需多次進(jìn)行免疫接種，可能引起過(guò)敏反應(yīng);③由于需要的抗原量大、質(zhì)純，因此要求對(duì)疫苗進(jìn)行濃縮和純化；58滅活疫苗專題知識(shí)病毒性滅活疫苗的缺點(diǎn)④由于滅活疫苗接種不是通過(guò)自然感染途徑，一般不能誘生局部IgA免疫抗體，使外來(lái)病毒仍可侵入門戶，并在局部繁殖，保護(hù)效果不甚滿意;5由于滅活劑對(duì)病毒的抗原性有一定影響，滅活疫苗需要添加佐劑。59滅活疫苗專題知識(shí)病毒性滅活疫苗制備工藝流程60滅活疫苗專題知識(shí)第三節(jié)

疫苗滅活方法對(duì)機(jī)體免疫應(yīng)答的影響61滅活疫苗專題知識(shí)一、滅活方法及其作用原理1.物理作用滅活

加熱紫外線62滅活疫苗專題知識(shí)加熱滅活原理：使蛋白質(zhì)變性從而使病原體失去傳染性簡(jiǎn)單有效56-57℃水浴1h注意:使內(nèi)容物受熱均勻不同的病原體對(duì)熱的耐受性不同63滅活疫苗專題知識(shí)紫外線照射滅活原理使病原體的DNA形成TT二聚體，無(wú)法作為模板轉(zhuǎn)錄為mRNA，不能復(fù)制子代DNA與合成蛋白，從而使病原體失去感染性。優(yōu)點(diǎn)在DNA、RNA水平上對(duì)病原體進(jìn)行滅活，最大限度地保留了抗原的完整性和免疫原性。尚未運(yùn)用于實(shí)際的疫苗生產(chǎn)滅活程度不完全，且病原體有光復(fù)活的可能。64滅活疫苗專題知識(shí)2.化學(xué)作用滅活

滅活劑福爾馬林、丙酮、苯酚β-丙內(nèi)酯(β-propiolactone，BPL)乙烯亞胺(ethylenimine)雙乙烯亞胺(binaryethylenimine，BEl)磷酸三丁酯、乙醇、硫柳汞等。65滅活疫苗專題知識(shí)（1）福爾馬林滅活病毒的種類：乙型腦炎病毒、脊髓灰質(zhì)炎病毒、流感病毒、狂犬病毒、森林腦炎病毒、委內(nèi)瑞拉馬腦炎病毒、巨細(xì)胞病毒、甲型肝炎病毒和HlV等滅活細(xì)菌的種類：傷寒桿菌、短棒狀桿菌、綠版桿菌等。67滅活疫苗專題知識(shí)（1）福爾馬林疫苗內(nèi)殘余的福爾馬林含量較高時(shí)(1:2000)注射局部可引起疼痛使用亞硫酸氫鈉中和后可消除痛感。68滅活疫苗專題知識(shí)（2）β-丙內(nèi)酯(β-propiolactone，BPL)廣泛地應(yīng)用于多種人和動(dòng)物疫苗的生產(chǎn)可能作用機(jī)理：作用于病原體的DNA和RNA，而不直接作用于蛋白。它能在機(jī)體內(nèi)完全分解為無(wú)毒性的β-羥丙酸，這是一種人體內(nèi)脂肪代謝后的產(chǎn)物，對(duì)人體和動(dòng)物體無(wú)毒。69滅活疫苗專題知識(shí)（2）β-丙內(nèi)酯（BPL）一種不穩(wěn)定的液體加熱37℃2h能自行水解為一種無(wú)毒的物質(zhì)，也可加入亞硫酸鈉停止其反應(yīng)。1984年被選作狂犬滅活疫苗的滅活劑正式使用70滅活疫苗專題知識(shí)（2）β-丙內(nèi)酯（BPL）缺點(diǎn):①本身具有致癌性，對(duì)工作人員仍有致癌作用，需要加以特殊防護(hù);②BPL可以改變?nèi)搜灏椎鞍椎男再|(zhì)，引起人體全身性的變態(tài)反應(yīng)，因此所滅活的病毒培養(yǎng)液中不能含有人血清白蛋白71滅活疫苗專題知識(shí)（3）乙烯亞胺和雙乙烯亞胺乙烯亞胺滅活原理：類似于β-丙內(nèi)酯(BPL)無(wú)論在安全性還是保持疫苗的抗原性方面都較福爾馬林更為優(yōu)越。1955年滅活噬菌體口蹄疫疫苗，己在世界范圍內(nèi)生產(chǎn)使用72滅活疫苗專題知識(shí)（3）乙烯亞胺和雙乙烯亞胺雙乙烯亞胺（BEl）在堿性環(huán)境中由單體的乙烯亞胺結(jié)晶后形成更穩(wěn)定、更安全BEl和BPL的滅活效果比用福爾馬林幾乎高兩倍。73滅活疫苗專題知識(shí)二、病毒滅活對(duì)機(jī)體免疫應(yīng)答的影晌

不同滅活劑對(duì)不同病原體的作用機(jī)制不同，對(duì)疫苗的免疫原性影響各異，導(dǎo)致疫苗接種后不同的機(jī)體免疫應(yīng)答。一般來(lái)講，滅活疫苗所誘導(dǎo)的免疫水平較低，僅能誘導(dǎo)較低滴度的抗體水平，很難激發(fā)細(xì)胞免疫。74滅活疫苗專題知識(shí)二、病毒滅活對(duì)機(jī)體免疫應(yīng)答的影晌

主要原因：①滅活使病原體的蛋白質(zhì)受到破壞，有的變性失去了免疫原性;②滅活后的病原體蛋白經(jīng)過(guò)補(bǔ)體加工處理后，其肽段上的表位受到破壞，被抗原遞呈細(xì)胞(APC)遞呈給MHC-I類分子時(shí)，MHC-I類分子對(duì)這些表位的識(shí)別受到了限制，很難激發(fā)細(xì)胞免疫的產(chǎn)生。75滅活疫苗專題知識(shí)不同滅活方法對(duì)疫苗免疫原性的影響Indiana型水泡性口炎病毒

（VSV）滅活方法：福爾馬林：0.00625%，4°C作用18hβ