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文檔簡(jiǎn)介
抗體(antibody,Ab)——能與相應(yīng)抗原特異性結(jié)合,
并具有多種免疫學(xué)和生物學(xué)活性的蛋白質(zhì),也稱(chēng)為免疫球蛋白(Immunoglobulin,Ig)。包括膜型Ig和分泌型Ig。
J鏈
IgaIgb
IgaIgb膜型Ig(BCR)分泌型Ig是跨膜分子表達(dá)于B細(xì)胞表面單體結(jié)構(gòu)單體或多聚體結(jié)構(gòu)是可溶性分子存在于免疫血清和分泌液中是體液免疫應(yīng)答的效應(yīng)分子抗體分子的基本結(jié)構(gòu)
及其多樣性BasicStructureandDiversityofAntibodyMolecules抗體分子的基本結(jié)構(gòu):四肽鏈結(jié)構(gòu)由兩條相同的輕鏈(LightChain)和兩條相同的重鏈(Heavychain)通過(guò)鏈間二硫鍵連結(jié)形成。NH2(N端)COOH(C端)7-1LHCarbohydrate輕鏈和重鏈輕鏈(L鏈)
κ鏈λ鏈重鏈(H鏈):根據(jù)其抗原性的差異,人類(lèi)Ig的H鏈分為
重鏈決定Ig類(lèi)及亞類(lèi)鏈鏈鏈鏈鏈IgGIgAIgMIgDIgE正常人κ:λ≈2:1輕鏈決定型別
κ型λ型可變區(qū)和恒定區(qū)
(VariableregionandConstantregion)V區(qū):VL、VH
可變區(qū)(V區(qū)):氨基酸種類(lèi)、排列順序差異較大,構(gòu)成抗體的多樣性。恒定區(qū)(C區(qū))氨基酸種類(lèi)、排列順序恒定C區(qū):CL、CH
“三明治樣”立體結(jié)構(gòu)抗體分子的立體結(jié)構(gòu)決定簇互補(bǔ)區(qū)
(complementarity-determinantregion,CDR)
抗體與抗原決定簇結(jié)合的位置,又稱(chēng)為決定簇互補(bǔ)區(qū)(CDR),也是抗體分子的獨(dú)特型決定簇(Idiotypesofantibodymolecules,Id)的主要存在部位。抗原決定簇(antigenicdeterminant),又稱(chēng)表位(epitope)
抗原分子表面能與其抗體結(jié)合的部位稱(chēng)為抗原決定簇,是免疫應(yīng)答特異性的物質(zhì)基礎(chǔ)。鉸鏈區(qū)(hingeregion)位于CH1和CH2之間,富含脯氨酸,易發(fā)生伸展和一定程度的移動(dòng),便于抗體更好地與抗原結(jié)合;而且易被木瓜蛋白酶、胃蛋白酶等水解。鉸鏈區(qū)免疫球蛋白的輔助結(jié)構(gòu)
J鏈(joiningchain)
參與IgA(H2L2)2與IgM(H2L2)5連接
分泌片(secretorypiece,SP)
粘膜上皮細(xì)胞分泌保護(hù)sIgA不被蛋白酶降解介導(dǎo)IgA的轉(zhuǎn)運(yùn)
J鏈
J鏈分泌鏈單體、二聚體、五聚體<40nm抗原抗體抗原
IgGCH3區(qū):可與單核-M細(xì)胞、B細(xì)胞、NK細(xì)胞、中性粒細(xì)胞上的IgG-Fc受體結(jié)合——調(diào)理吞噬、ADCC。IgGCH2區(qū):補(bǔ)體結(jié)合點(diǎn)和通過(guò)胎盤(pán)的部位。免疫球蛋白的水解片段木瓜蛋白酶水解裂解部位:鉸鏈區(qū)二硫鍵N端側(cè)裂解片段:2Fab+FcFcFabFab
(fragmentantigenbinding)可與抗原結(jié)合的片斷抗原結(jié)合價(jià)=1特異性由VH
和VL決定不能形成凝集或沉淀反應(yīng)Fc段(
fragment
crystallizable)可結(jié)晶片段多種生物學(xué)功能裂解部位:鉸鏈區(qū)二硫鍵C端側(cè)裂解片段F(ab′)2+pFc′胃蛋白酶水解pFc′F(ab′)2F(ab′)2
:①具雙價(jià)抗體活性②能形成凝集或沉淀反應(yīng)③生物制品應(yīng)用pFc′:無(wú)生物學(xué)活性的小碎片。免疫球蛋白的功能區(qū)(結(jié)構(gòu)域)
Ig分子通過(guò)鏈內(nèi)二硫鍵折疊或若干個(gè)能行使特定功能的球形單位,每個(gè)球形單位為一個(gè)功能區(qū)。L鏈:VL區(qū)、CL區(qū)H鏈:VH區(qū)、CH1區(qū)
CH2區(qū)
CH3區(qū)
CH4區(qū)(IgM、IgE)V區(qū)C區(qū)VL+VH功能區(qū):抗原結(jié)合部位(2個(gè))CH3功能區(qū):是Ig與其Fc受體結(jié)合的部位(固定細(xì)胞)CL和CH
區(qū):具有同種異型抗體的遺傳標(biāo)記。(2個(gè))CH2區(qū):IgG的補(bǔ)體結(jié)合點(diǎn)和通過(guò)胎盤(pán)的部位功能區(qū)的作用免疫球蛋白的功能一、特異性結(jié)合抗原:中和外毒素、病毒,阻止細(xì)菌粘附于宿主細(xì)胞。二、激活補(bǔ)體,發(fā)揮溶細(xì)胞活性三、親細(xì)胞性(固定細(xì)胞)
IgGFc受體(FcγR):存在于單核-吞噬細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、NK細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞、B細(xì)胞上。與調(diào)理吞噬、ADCC(抗體依賴(lài)細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒作用)有關(guān)。IgEFc受體(FcR):存在于肥大細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞膜上。與I型超敏反應(yīng)有關(guān)。四、通過(guò)胎盤(pán)和粘膜:IgG
是唯一能穿過(guò)胎盤(pán)的免疫球蛋白,
sIgA能穿過(guò)粘膜。五、免疫調(diào)節(jié)功能IgG
血清中含量最高、半衰期最長(zhǎng)的抗體唯一能通過(guò)胎盤(pán)的Ig,對(duì)新生兒抗感染起重要作用再次應(yīng)答的主要抗體體內(nèi)最重要的保護(hù)性抗體具有多種功能:①結(jié)合、凝集抗原②中和細(xì)菌毒素、中和病毒③激活補(bǔ)體④調(diào)理吞噬⑤能與SPA結(jié)合免疫球蛋白類(lèi)別及亞類(lèi)的特性與功能PropertiesofAntibody
ClassesandSubclassesIgG
分子的四種亞型IgG1IgG4IgG3IgG2
四種亞類(lèi)的IgG分子在血清中的濃度不同分子量最大的Ig(五聚體)在個(gè)體發(fā)育過(guò)程中最早出現(xiàn)的抗體(胚胎發(fā)育晚期即可出現(xiàn))初次應(yīng)答的主要抗體近期感染的指標(biāo)激活補(bǔ)體、裂解細(xì)菌、調(diào)理吞噬等作用均比IgG更有效
不能通過(guò)血管進(jìn)入組織。血清IgM是五聚體結(jié)構(gòu),膜型IgM(serfase
IgM,sIgM)是單體結(jié)構(gòu)。
sIgM
是BCR。IgMIgM
J鏈IgM抗體結(jié)構(gòu)分泌型IgM膜型IgMsIgM
IgaIgb
IgaIgb分泌型IgA:①由兩個(gè)IgA單體與J鏈和分泌片結(jié)合而成二聚體結(jié)構(gòu);②是人體外分泌液中的主要抗體;③由黏膜相關(guān)淋巴組織(MALT)產(chǎn)生,對(duì)防御病原微生物入侵起重要作用,又稱(chēng)為局部防御性抗體。在局部抗感染中發(fā)揮重要作用。
IgA
J鏈分泌鏈有兩型:血清IgA(單體)和分泌型IgA(二聚體)。
IgD分子的結(jié)構(gòu)IgD1、血清IgD含量低。2、膜型IgD存在于成熟B細(xì)胞表面,為BCR,是B細(xì)胞成熟的標(biāo)志。
IgE分子的結(jié)構(gòu)IgE血清含量最低IgE沒(méi)有鉸鏈區(qū),有4個(gè)CH結(jié)構(gòu)域(CH1~4)CH2、CH3能夠與肥大細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞表面的IgE-Fc受體結(jié)合,介導(dǎo)Ⅰ型超敏反應(yīng)。與抗寄生蟲(chóng)感染有關(guān)。不能固定補(bǔ)體1(HBsAg-乙肝病毒表面抗原)為已經(jīng)感染病毒的標(biāo)志,并不反映病毒有無(wú)復(fù)制、傳染性強(qiáng)弱;2(HBsAb-乙肝病毒表面抗體)為中和性抗體標(biāo)志,是否康復(fù)或是否有抵抗力的主要標(biāo)志。疫苗接種者,若僅此項(xiàng)陽(yáng)性,應(yīng)視為乙肝疫苗接種后正常現(xiàn)象。3(HBeAg-乙肝病毒e抗原)為病毒復(fù)制標(biāo)志。持續(xù)陽(yáng)性3個(gè)月以上則有慢性化傾向。4(HBeAb-乙肝病毒e抗體)為病毒復(fù)制停止標(biāo)志。病毒復(fù)制減少,傳染性較弱,但并非完全沒(méi)有傳染性;5(HBcAb-乙肝病毒核心抗體)為曾經(jīng)感染過(guò)或正在感染者都會(huì)出現(xiàn)的標(biāo)志。1、3、5為陽(yáng)性,其他為陰性代表乙肝“大三陽(yáng)”1、4、5為陽(yáng)性,其他為陰代表乙肝“小三陽(yáng)”第六節(jié)單克隆抗體和基因工程抗體一、多克隆抗體(polyclonalantibody)1.定義指由不同B細(xì)胞克隆產(chǎn)生的針對(duì)抗原物質(zhì)中多種抗原決定簇的多種抗體混合物。如:免疫血清(含多種特異性抗體)。2.實(shí)際意義(1)預(yù)防、治療感染性疾病
(2)臨床診斷基因工程抗體(geneticengineering
antibody)
1.定義在DNA水平對(duì)Ig基因進(jìn)行切割、拼接或修飾,導(dǎo)入受體細(xì)胞表達(dá)的抗體。2.舉例人-鼠嵌合抗體(chimer
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