第九章

免疫學應用第一節免疫學防治（一）人工自動免疫給機體輸入疫苗或類毒素等抗原物質，刺激機體產生特異性免疫力。免疫力出現較慢但持久，多用于預防。1、死疫苗：用物理、化學方法殺死病原微生物制備而成的疫苗。如傷寒、霍亂、百日咳等。2、活疫苗：通過毒力變異或人工選擇法獲得的減毒或無毒株。類似于輕癥或隱性感染。如卡介苗、麻疹、風疹、脊灰疫苗。3、類毒素：外毒素經0.3%~0.4%甲醛處理后失去毒性但保持抗原性的生物制品。如白喉、破傷風類毒素。4、新型疫苗：亞單位疫苗、合成疫苗和基因工程疫苗。（二）人工自動免疫的注意事項1、接種對象2、接種劑量、次數和間隔時間3、接種途徑4、接種后反應5、禁忌癥二、免疫學治療（一）人工被動免疫是給機體輸入抗體，使機體獲得特異性免疫力。維持時間短，一般2~3周，多用于緊急預防。如抗毒素、人丙種球蛋白、人特異性免疫球蛋白。（二）免疫增強劑是增強、促進和調節機體免疫功能的生物或非生物制劑。主要用于腫瘤、免疫缺陷病和傳染病的輔助治療。（三）過繼免疫：分特異性和非特異性兩種。（四）免疫抑制劑第二節免疫學診斷

一、體液免疫檢測（抗原或抗體的檢測）抗原-抗體反應包括沉淀反應、凝集反應、溶解反應、補體結合反應和中和反應等?？乖?抗體反應可用已知的特異性抗體檢測未知的抗原；也可用已知的抗原檢測未知的抗體。免疫熒光技術、免疫酶技術、同位素標記技術、發光免疫分析等免疫標記技術提高了抗原抗體反應的敏感性?？乖?抗體反應的特點抗原-抗體的結合是特異性結合抗原抗體結合是分子表面的非共價鍵結合抗原抗體反應可分為兩個階段特異性結合階段可見的反應階段抗原和抗體結合是否呈現可見的反應現象，于兩者的分子比例密切相關抗原抗體比例對反應現象的影響抗原-抗體反應受多種因素影響1電解質：抗原-抗體反應通常應用0.85%的氯化鈉作為稀釋液，以供給適應濃度的電解質。2溫度：一般常使用反應在37度水浴或孵育箱中進行。3.酸堿度：抗原-抗體反應適應的酸堿度

為PH6~8。抗原-抗體反應受多種因素影響抗原抗體的檢測方法凝集反應沉淀反應補體溶血反應和補體結合反應中和反應用標記抗體或抗原進行的抗原抗體反應凝集碧反應還(Ag勸gl民ut景in辜at前io恨n)細菌之、紅悶細胞愧等顆蘋粒性處抗原角與相診應抗振體結稱合后桐形成扭凝集緞現諸象，忘稱為永凝聚磁反應鋤。1、葉直接仰凝集趴：將滴細菌素或紅貌細胞疫與相邪應的布抗體再直接兄反應眾，出更現細侄菌凝近集或沸紅細暫胞凝錯集現芬象。棵又分絞為玻飄片法映和試羽管法客。2、英間接烤凝集壘：將朝可溶細性抗漢原包連被在秧紅細盜胞或憲乳膠緞顆粒膝表面陜，與引相應四抗體疫反應燒出現夜顆粒鼓凝集高現象唇。血餡球曾凝疾集沉淀暑反應標（Pr別ec妻ip聚it建at盯io暫n)血清猴蛋白幼質、北細胞假裂解辛液或蛋組織款浸液移等可場溶性姻抗原耍與相秋應抗若體結架合后耗出現福沉淀睛物，芽這一衰類反丟應稱料為沉叔淀反針應。樓沉淀桿反應皂可在牢液體雕中進需行，廢如絮嫂狀沉蠶淀。沉大多喜沉淀孤反應勞是用愧半固副體瓊鎮脂凝少膠為襖介質姑，進什行瓊朱脂擴脈散故券也稱買免疫鉛擴散開。單向耐免疫牢擴散懇(Si睡ng即leIm拘mu毛no緞di逗ff魔us浩io混n)是將舍一定僻量已初知抗銀體混身于瓊育脂凝塌膠中姐制瓊赴脂板央，在企適當奶位置司打孔屯后將恨抗原晉加入勇孔中州擴散脹?？故涝趲X擴散做過程盼中與單凝膠侄中的案抗體姑相遇槍，形體成以弊抗原頓孔為繞中心很的沉派淀環告，環故的直靜徑與絨抗原設含量丘成正的比相缺關。燙本法共常用秧于測鉤定血讀清Ig萬G、罪Ig們M、廊Ig巖A和C3等的椅含量與。含抗截體的續凝膠沉淀盟環雙向路免疫閃擴散晉（Do叉ub沿leIm唯mu膠no良di潤ff桐us姻io并n)是將撤抗原晶與抗蠟體分諸別加撓入瓊吐脂凝糕膠的吵小孔銹中，賺二者扶自由莊向周舟圍擴剝散并竿相遇錦，在瘦比例帆合適略處形議成沉撕淀線思。如否果反征應體盞系中拌含兩繩種以筑上的況抗原和抗體施系統億，則神小孔商間可灑出現及兩條周以上崇的沉朱淀線會。本拐法常裹用于拐抗原番或抗兆體的巨定性兔、歇組成單和兩嘗種抗辮原相藏關性酬分析滔的檢儉測。免疫碎電泳巴（Im屠mu席no鳳el序ec蹲tr助op劃ho醒re朱si竿s)是先蠶將待虹側血春清標比本作年瓊脂樂凝膠屆電泳進，血雨清中傭各蛋茄白組指分被拆分成連不同枯的區毒帶，苦然后豬與電嶼泳方嬌向平汁行挖殃一小步槽，帳加入樹相應拴的抗莖血清欲，把戲分成倆區帶秤的蛋胖白抗柱原成獎分作釘雙向憶免疫抽擴散償，在先各區沸帶相狼應的煙位置蕉形成成沉淀背弧。迫該法杜常用剝于血踏清蛋槍白種抬類分丟析，壯以觀哨察Ig的異桑常增安多或牲缺失厭?；鸺齐娪荆≧o追ck姓et尿E先le作ct麥ro緣瑞ph薄or勵es秀is趙)火箭懶電泳表也稱辮免疫經擴散惡，是共把單旱向免泳疫擴異散同括電泳墾結合炭在一拴起的飾方法傷。抗品原在獻含有否定量承抗體災的瓊口脂中戲泳動翻，兩柔者比妙例適鳥宜時校，在節較短翼時間荒內生告成錐黑形的銀沉淀巖峰。訪在一形定濃岔度范嶺圍內過，沉魔淀峰胃的高生度與切抗原想含量公成正是比。扇此法盟的特添點是替需時寨較短蔬，故扛可用接于快改速沉棒淀標抵本中織抗原臣的含哪量?；鸺z電泳別示意罩圖補體喇結合萄反應（Co脖mp呼le西me館nt盜F銀ix自at觀io敞n,綱C親FT行)敏感正性和瞎特異纖性均握較高京，但灣該試肉驗影瞎響因躲素較帖多，米現在使已有護被其新它新奇方法盤取代疏的趨獅勢。免疫喉標記正技術用熒棕光素思、同論位素涌或酶穩等示值蹤物刃質肢標記桂抗體艱（或懂抗原顆）進豎行抗初原-貝抗體腥反應泡。標津記物潮質與騎抗體籃（或江抗原緞）的飽化學夫連接住未改芳變抗搜體（蠟或抗尾原）黨的免搭疫學活特性賠，同搭時標躁記物綱的性縣質依腥然存拐在，憂因而狗極大抖的提準高了灶反應晝的靈即敏度悼，可恢以對懶微量田物質漲進行軍定量共、定顯性或晌定位脆檢測踐。免座疫標扇記技狐術主足要有研三種判基本羨類型紅：免昏疫熒讀光技總術、毛免疫檔酶技舟術和瓶同位遞素標冒記技核術。免疫套熒光焦顯微護技術(Im舅mu曾no笛fl我uo寺re廉sc眼en閘ceTe攻ch磁ni凳qu乒e)是用否熒光桶素（邊常用循的有戴異硫標氰酸庭熒光仔素，FI派TC添)與抗筍體連圖接成廈熒光劣抗體躍，再唐與待它測標鏟本的材抗原輕反應姐，，正置熒幕光顯鍋微鏡白下觀征察，冤抗原窮抗體述復合秋物散坐發出粘熒光母，借廁此對贈標本常中的震抗原綠作鑒沖定和肌定位泳。包括月直接羊熒光易法、芹間接宏熒光即法和懇補體籍法。直接持熒光斧法：周將熒灘光素些直接購標記擺抗體本作標雖本染冬色。捎該法溉的優繁點是借特異壺性強壺，但挪其缺卻點是贈每檢誰測一溫種抗逢原必牛須制券備相煩應的餃熒光襪抗體勞。間接科熒光握法：基用一綠抗與寬標本初中的具抗原留結合縱，再敘用熒刻光素巡壽標記尼的二抹抗染械色。枝該法效的優醉點是研敏感醉性比嶺直接播法高型，制違備一公種熒捆光素初標記惰的二謀抗可顏用于濃多種灘抗原斃的檢刷測，礎但非產特異選性熒位光亦透會增朝加。補體兇結合富免疫凡熒光扁法：首此法辜是在然間接偶法的界第一舌步抗奸原—臂抗體墾反應撐時加分入補寬體，掩使之林與抗忽原—役—抗的體復衫合物專結合熟；再猶用熒悼光素征標記勵的抗C3抗體饑進行劣示蹤肝。間接雀免疫萬熒光中法示運意圖免疫皮熒光蔥顯微暢技術流式柏細胞筒術（Fl偉owCy岔to羨me艷tr鄰y,騰FC聯M)FC耀M是將丹免疫奸熒光銀技術瓦應用倍于流競式細湯胞儀返，對買單個屑細胞貼的表爬面標民志（泊抗原堪或受雞體）司進行喉快速室、精斷確的仆分析武和自煮動檢猜測，蟻并將掠不同雹類型讓的細袋胞分魚選收朵集。FC膚M還可惰對同葵一細絡胞的宿多種飛參數嗎（如DN駁A、暈RN棕A、蛋白掃質和鎮細胞闖體積礦等）架進行晴多信刷息分儀析，壯為當屑代生顏命科油學研肯究領馬域中紀廣泛云使用償的一潮項新活技術乎。流式基細胞坊術流式糟細胞傭儀工酒作原沾理酶免堪疫測筒定喘(En廉zy廚me堆I脾mm伍un榆oa騎ss符ay爐,推EI淋A)是用效酶（年常用淡的有貪辣根階過氧喇化物艷酶，HR蜜P和堿佛性磷渣酸酶戲，AP描)標記忘的抗縣體進驢行的廢抗原揚抗體矛反應牌。EI世A將抗途原抗值體反竭應的添特異暈性與雹酶催閉化作半用的編高效槍性相謙結合礙，通患過酶另作用鮮于底乏物后答顯色望來判商定結游果。掌常用鴨的方跨法有顛酶聯般免疫敵吸附含試驗掃和酶揪免疫拘組化趁法，冤前者螞測定訂可溶看性抗戲原或播抗體謎，伶后者古測定四組織濫中或綠細胞臨表面導的抗被原。酶聯販免疫吼吸附淚試驗(En翼zy跨me有L免in發ke居dIm潑mu樂no期so總rb功en凈tAs沉sa鉤y,扛E死LI飛SA容)是將賺已知雖的抗勤原或吐抗體現吸附譜在固述相載遭體（搭聚苯覺乙烯鏟微量光反應喬板）備表面著，使火抗原拾抗體京反應駐在固脫相表便面進柿行。枕用洗排滌法張將液側相中魔游離襲成分言洗除耐。主法要有狼雙抗圓體夾偶心法凱、間億接法BA堡S-鑄EL倚IS汁A等。EL量IS吃A檢測稈抗體放射魄免疫歉測定凳法(Ra拘di乏oi語mm鏟un賺oa顆ss粘ay睜,曲RI澇A)是用創放射丙性核索素標捉記抗炕原進棋行的四免疫拖學檢爆測技迫術。巾它將收放射盯性核趁素顯姑示的維高靈骨敏性沉和抗濟原抗弊體反館應的襲特異親性結繩合，首使檢適測的嚴敏感飯性達pg水平資。常松用于紫標記謙的放球射性洽核素胞有I12切5和I13荒1。常用俘于胰奮島素軟、生俘長激沈素、筑藥物肅等微翁量物疼質的訪測定勻。

Ag*AbAg

標記抗原特異性抗體待測抗原(Ag*-Ab)+(Ag-Ab)抗原抗體復合物分離Ag*-Ab和游離Ag*從標準曲線上讀知含量測定Ag*-Ab和/或游離Ag*放射性放射因免疫移測定兼法(RI打A)示意日圖RI濱A法原扛理及粒標準訂曲線75503010011010叫010偽00未標象記抗噴原濃核度（ng/m豈l)結合橫/未市結合采的放綠射活壯性（醬%）免疫旬印跡橋法(Im舅mu紙no視bl旗ot矩ti腥ng)是將亭凝膠霞電泳沫與固東相免桐疫測多定結慨合，附先把倡電泳頃分區藥的蛋孩白質粱轉移割到固庭相載給體，略再用右酶免梁疫、濕放射屑免疫鉤等技粱術測僻定。亦該法圈能分起離分到子大策小不手同的駁蛋白結質并金確定患其分貨子量域。常務用于正檢測鴉多種拳病毒轟如HI悄V的抗僅體或搏抗原懸。免膠疫女印幸跡衫法瓜示摸意惱圖第二煩節贊淋唉巴細哀胞五的測太定檢測愿各群與體淋逢巴細專胞的表數量撞與功黨能是墓觀察滿機體預免疫政狀態卸的重述要手餅段。收外周甩血是牢病人喚主要口的檢禾測標倚本，確但僅艘代表駱再循鬧環的妥淋巴盈細胞丈。實疲驗動嘉物還防可取質胸腺暮、脾唉、淋寧巴結元等作疏為標僑本進著行檢香查。(1薄)壁抗凝靜脈恭血(2毯)江加等腔量NS(4元)晶密論度梯繁度離綱心血漿分離液RBCPBMCPMN(3榮)贏混柏勻后隨，緩員慢加貞于分本離液頂上一、粱淋巴盯細胞跟類型大和數劫目的扇測定1、廁花結事試驗觸：E花結揀試驗鐵可用因于檢剃測T細胞給數目源。EA花結撐試驗欠可用名于檢綁測B細胞枝數目編。2、內免疫泳熒光故法：幣常采始用間嚇接免谷疫熒蛛光法什。3、串流式憐細胞陪術：與借助濟流式晝細胞乘儀（FC暴M)掃?；ńY格試驗砌示意鄉豐圖T細胞濱功能毀測定體外現法工：T細胞幼增殖剃試驗形態初學檢求查3H-Td奧R摻入烤法MT鍬T法體內牛法瀉：啞用生猜物抗摘原或怨化學備抗原宗作皮韻內試如驗。OT竟-P帽PD皮試SD補-S穴K皮試培養液3H-TdRPHA淋巴細胞全血分層液離心過濾測量放射性淋巴棉細胞赴增殖巾試驗財（3H-Td栽R摻入好法）蒸示意喘圖靶細胞51Cr洗滌去除游離的51Cr效應細胞測量上清液中釋放的51Cr混合培養4-6小時細胞姓毒試鮮驗（51Cr釋放僚法）誘示意鼻圖酶聯同免疫崗斑點湊法寨（En圾zy河me猶-L被in認ke撿dIm貓mu和no拍sp虧ot,扇EL改IS膛A)是在EL涉IS而A的基居礎上灰建立葡的檢壺測抗匯體生章成細蘇胞及冬細胞歡因子顧產生更細胞恭的方伐法。CK抗體包被的反應板

CK抗原包被的反應板加入淋巴細胞加入酶標記二抗加入底物