微生物計數2019版高中生物學選擇性必修二介紹了酵母細胞血細胞計數板顯微鏡直接計數法：2019版高中生物學選擇性必修三介紹了微生物的平板計數：那么，除此之外，還有其它的計數方法嗎？微生物個體細胞的生長難以測定,而且生長與繁殖是交替進行的,因此，微生物的生長繁殖一般不是依據個體細胞的大小,而是以群體細胞數目的增加作為指標的。測定微生物細胞數量的方法很多,主要有顯微鏡直接計數法、平板菌落計數法、光電比濁法、最大可能數(MPN)法、膜過濾法等。測定酵母細胞數或霉菌孢子數常采用在顯微鏡下直接進行計數的方法,該計數方法被廣泛應用于酒精、啤酒和白酒等的工業化生產中。平板菌落計數法被廣泛應用于食品、飲品、水質和活菌制劑等的含菌指數或污染程度的檢測。該計數方法又稱平板活菌計數法,其最大優點是可以獲得活菌數的信息。但是,該計數法操作過程較繁,需要培養一定時間才有結果,且測定結果易受多種因素的影響。光電比濁計數法是采用光電比色計或分光光度計,測定菌懸液的光密度或透光度,其優點是簡便迅速,可以連續測定,適合于自動控制。但該法除了受菌體濃度影響外,還受細胞形態、大小、培養液成分及所采用光波長等因索的影響。(一)顯微鏡直接計數法該法是將酵母菌或霉菌孢子懸液,放在血球計數器載玻片與蓋玻片之間的計數室中，在顯微鏡下直接進行計數，是一種常用的微生物計數方法。Thoma血球計數板是一塊特制的厚載玻片,玻片的中間部分刻有四條溝槽,形成三個平臺。中間的平臺較寬且比兩邊的平臺略低,其中央刻有一小方格網的計數區,計數區的面積為l平方毫米。另一種計數器中間平臺的中間又被一短的橫溝槽分為兩半,成為兩個小平臺,每個小平臺上面各刻有一個計數區,共有兩個計數區。當蓋上特定蓋玻片時,蓋玻片與計數室的空間厚度正好是0.l毫米,這樣計數室的體積為0.l立方毫米,即0.000l毫升。計數室有兩種刻度形式,一種是全區分16大格,每大格再分25小格,一共400小格。另一種是全區分25大格,每大格再分16小格,也是400小格。計數時,可將酵母菌液(或孢子懸液)充滿計數室,在顯微鏡下按規定數4個或5個大格的總細胞數,再求得每小格內平均的細胞數,即可計算出每ml培養液中的細胞總數。每ml菌液酵母菌細胞數=每小格平均酵母細胞數×400×10000×稀釋倍數。(二)平板菌落計數法該法的基本原理是：將待測含菌樣品經適當稀釋,使其中的微生物充分分散成單個細胞,然后取一定量的稀釋樣品液,接種到平板上。經過一定時間培養后,由每個單細胞生長繁殖而形成肉眼可見的單菌落,即一個單菌落應代表原樣品中的一個活菌。最后統計菌落數,根據其稀釋倍數和取樣量,換算出單位樣品中所含的活菌數。實際上，由于待測樣品不易完全分散成單個細胞,故所形成的菌落并非都是單菌落,有一部分是由2個以上的細胞長成的,因此平板菌落計數的結果會比實際偏低。現在已采用菌落形成單位(cfu)來表示樣品的活菌含量。(三)光電比濁計數法光電比濁計數法的原理是：光線透過菌懸液時,其透光率與細胞濃度成反比,而光密度與細胞濃度成正比。透光率或光密度可以由光電池精確測出(光波通常選擇在400～700nm之間),因此,可用一系列已知菌