精子DNA碎片檢測

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檢測原理沒有DNA碎片的精子在經過酸變性和去掉核蛋白后DNA擴散形成特征性的光暈，而帶有DNA碎片化的精子不會產生這種特征性的光暈，根據光暈的有無和大小判斷精子DNA碎片化的程度2ppt課件1.男性不育檢測的新指標

（1）最新的世界衛生組織統計數據顯示，在已婚夫婦中，非意愿性不孕不育的發生率為7%-46%，并呈逐年增加的趨勢，目前精液常規檢查項目不能全面評估男性生育力，隨著我國工業化程度的增高，環境污染的逐漸加重，人精神壓力的不斷增加，因此，精子DNA的檢測能夠對不育病因做出合理，準確的診斷，有助于選擇合適的助孕手段。3ppt課件

（2）DNA碎片程度反映精子遺傳物質的完整性，精子DNA發生碎片化對生育將會產生負面影響，造成不育和反復流產.

精子DNA碎片化程度被認為是一個新的，評價精液質量和預測生育能力的指標4ppt課件

（3）男性不育檢測的現狀，精子數量，密度活率和抗精子抗體，這些檢驗項目的結果判斷和分析主觀性較強。經國內外專家研究發現，男性不育患者的DNA碎片會明顯增多，精子DNA的完整性是判斷精子質量的有效依據。因此檢測精子DAN的完整性對不育患者精子質量的評估具有極大的價值.

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2精子DNA碎片化對生育的影響

（1）不育男性精子DNA碎片化程度

正常男性精液中存在含有DNA碎片化的精子比例為（13.1+7.3）%，而不育男性精液中存在含有DNA的碎片化的精子比例為（40.9+14.3）%有顯著性差異，把DNA碎片化程度20%作為分界值，區別不育和生育力正常的特異度是89.4%，敏感度是96.9%。6ppt課件（2）精子DNA碎片化與精液常規檢查指標關系精子DNA碎片化指數是一個穩定性高的指標，不隨季節發生變化。精子DNA碎片化程度與精子前向運動負相關，與精子正常形態比例負相關。精索靜脈曲張患者的活動力密度和形態分析可在正常范圍但是精子DNA碎片化程度明顯高于正常7ppt課件（3）與體外受精IVF受精率的關系精子DNA碎片化程度與IVF胞漿內單精子注射的受精率呈顯著負相關，DNA碎片化的精子形成原核障礙導致受精率降低，當DNA碎片化的精子比例超過10%時，受精率明顯降低。8ppt課件（4）與IVF原核質的關系按照原核前體的數目和分布將原核形態分為4組，DNA碎片化程度高的精子形成形態欠佳發育潛能低的；原核比例明顯高于DNA碎片化程度低的精子（5）IVF胚胎質量及囊胚形成率的關系精子DNA化程度與囊胚形成率呈負相關，當陽性精子比例小于20%時，囊胚形成率比當該比例大于20%時提高了50%9ppt課件（6）胚胎種植率和妊娠率與DNA碎片化呈負相關(7)精子DNA碎片化與反復流產有關

10ppt課件3.精子DNA碎片化的發生機制

(1)精子發生過程中異常染色質包裝染色質是由一條DNA分子纏繞無數核小體核心而連成一條串珠樣的長鏈形成的核蛋白纖維，染色體是指細胞分裂時由DNA蛋白質纖維螺旋化后形成的棒狀小體染色體是基因的載體，染色體在分裂的過程中由間期細胞進入分裂期時染色質纖維經過四級折疊，長度壓縮8400倍形成光學顯微11ppt課件

鏡下可見的染色體。當細胞分裂結束再而進入間期時，染色體經過解旋又恢復成染色質形態。它主要是疾病和藥物和環境毒物引起12ppt課件

(2)低氧和氧自由基的形成氧自由基（ROS）過多和抗氧化酶的平衡失調導致的ROS過多，會造成精子DNA單鏈和雙鏈的斷裂主要原因是睪丸局部溫度增高（精索靜脈曲張）13ppt課件(3)凋亡異常細胞死亡的方式有三種凋亡是其中的一種它是指細胞的程序化死亡在一定的生理和病理條件下，遵循自身的程序，自動結束其生命的過程最后細胞脫落立體或分解被其他細胞吞噬通常是一種生理變化另外包括脹亡是細胞滲透壓發生變化吸收大量水分使細胞腫脹死亡，脹亡壞死多是指炎性的病理性變化引起14ppt課件病因包括年齡增大，吸煙，等。研究證實空氣污染和吸煙均會導致精子異常凋亡使DNA的碎片化程度增高15ppt課件4精子DNA碎片檢測適應癥（1）不育癥患者無精子癥除外（2）不良生活習慣吸煙飲酒蒸桑拿（3）習慣性流產，胚胎停育患者的配偶（4）有不良生育史患者的配偶（5）為了優生自愿檢查（6)接受過化療或放射16ppt課件5.參考值精子DNA碎片率正常<10%臨界值10%-15%表示男性生育力有降低的趨勢無論是自然妊娠還是人工助孕成功率還有降低的可能碎片異常>15碎片率異常大于15%表示男性生育力有降低的趨勢無論是自然妊娠還是人工助孕成功率還有降低的可能，且IVF/ICS助孕有流產風險增加的可能17ppt課件

6.精子DNA碎片化臨床指導目的

篩選精子DNA碎片化程度小的精液冷凍，然后通過ICSI治療多次助孕治療失敗患者獲得妊娠的成功18ppt課件

篩選方法1睪丸獲得精子的DNA碎片化程度明顯低于射出精子，因此可以使用睪丸取精和ICSI治療精子DNA碎片化2精子上游法（密度梯度離心）處理后能夠顯著降低DNA碎片化精子的比例19ppt課件

7治療口服抗氧化劑可以降低精子DNA碎片化程度，提高治療的成功率，口服抗氧劑（口服VC、VE、左卡尼汀、抗氧化的中藥等）能夠顯著降低不育患者的精子DNA碎片化程度，顯著調高ICSI的臨床妊娠率和胚胎種植率20ppt課件

8小結

眾多研究結果證實，精子DNA碎片化檢測意義重要，能夠反映精子遺傳物質的完整性，深入的評估男性的生育能力，預測治療結局和指導治療21ppt課件

謝謝22