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PharmaceuticalAnalysis

PharmaceuticalAnalysis分光光度法

分光光度法

（二）熒光分析法1.熒光及熒光分析法熒光分析法利用熒光的物理特性進行定性與定量測定的方法。分光光度法

S2S1S0T1吸收發射熒光發射磷光系間跨越內轉換振動弛豫能量l

2l

1l

3

外轉換l

2T2內轉換振動弛豫分光光度法

2.分子產生熒光必須具備的條件具有一定的熒光量子產率（熒光效率）；01熒光效率具有合適的結構；02躍遷類型*→有利于熒光的產生；分光光度法

具有合適的結構；02共軛效應提高共軛度有利于增加熒光效率并產生紅移剛性平面結構分子剛性平面越大，熒光效率越大取代基效應芳環上有供電基，能增加電子共軛程度，使熒光增強。分光光度法

3.影響熒光強度的外部因素溶劑的影響溶劑極性↑，熒光效率↑溫度的影響溫度↑，熒光效率↓，熒光強度↓。溶液pH當熒光物質為弱酸或弱堿時，溶液pH的改變對熒光強度有很大影響。熒光熄滅劑的影響散射光的干擾瑞利散射和拉曼散射分光光度法

4.熒光光度計組成光源、單色器、樣品池、檢測器。熒光分析儀基本部件示意圖分光光度法

5.在含量測定中的應用定量依據低濃度時，溶液熒光強度與熒光物質濃度成正比F=KC定量方法標準曲線法比例法分光光度法

6.特點靈敏度高，可達10-10g/ml～10-12g/ml；A選擇性好；B適用于

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