———多重免疫熒光染色技術（mIF）在肺癌診斷、鑒別診斷及治療上的應用

（本問答由人類醫生專家提問，ChatGPT回答，答案經人類專家醫生審核后發布）

泰立瑞病理（泰瑞鏡下）

請簡單介紹一下多重免疫熒光技術（（multipleximmunofluorescence-mIF）

mIF是一種利用熒光標記的特異性抗體和熒光顯微鏡或熒光掃描儀同時檢測多個分子的方法，過去常用于細胞和組織樣品中的免疫細胞學和藥物研發領域，近年來逐漸在臨床病理學顯示了巨大的應用潛力。相對于傳統的單一標記技術，多重免疫熒光技術可以在同一組織中同時定位多種免疫細胞和細胞標志物，對復雜細胞群體和組織微環境的分析更為準確和全面。此外，多重免疫熒光技術還可以通過量化圖像處理軟件實現數字化分析，提高檢測效率和準確性，為疾病的診斷和治療提供了更為可靠的支持。

肺癌診斷的生物標志物都有哪些？

肺癌診斷和分期的臨床分子標志物多種多樣，以下為一些主要的標志物：

1.細針穿刺標本中的免疫組化分子標志物：

TTF-1、NapsinA、p63及CK5等。

2.外周血液中的腫瘤標志物：

CEA、CA125、CA15-3、Cyfra21-1、NSE、ProGRP等。

3.基因檢測：

EGFR、ALK、ROS1、BRAF、KRAS等。

4.組織學特征：

包括肺癌細胞的外觀、細胞學類型(如腺癌、鱗癌、大細胞癌和小細胞肺癌等)和組織學級別等。

需要注意的是，針對不同的病情和病人，診斷標志物的選擇和應用方法也有所區別，需要綜合考慮臨床病情和醫學專業知識。

TTF-1、NapsinA、p63及CK5的mIF在非小細胞肺癌的應用情況如何？

mIF技術結合TFF-1(甲狀腺轉錄因子-1)、NapsinA(鼻上皮細胞黏附分子)、p63和CK5(細胞角蛋白5)這些標志物可以較準確地對非小細胞肺癌(NSCLC)進行分類和鑒別診斷。具體應用情況如下：

1.TFF-1：多數肺腺癌細胞表達TTF-1，而鱗癌及神經內分泌腫瘤一般不表達。因此，TTF-1可用于肺腺癌和非肺腺癌的鑒別。

2.NapsinA:NapsinA是肺泡上皮細胞特異性的絲氨酸蛋白酶，可用于肺腺癌和非肺腺癌的鑒別。但NapsinA在活檢組織中表達不穩定，可能在低分化NSCLC中表達減少。

3.P63：p63是一種核質分布的轉錄因子，主要表達在上皮組織中，尤其在基底層細胞中。在肺鱗癌中p63常常為陽性，可用于鑒別肺腺癌和肺鱗癌。

4.CK5:CK5是細胞骨架上的一種角蛋白，主要表達在基底層細胞和鱗狀細胞中，在肺鱗癌細胞中表達高水平，可以用于鑒別肺鱗癌和肺腺癌。

綜上所述，mIF技術結合TTF-1、NapsinA、p63和CK5這些標志物可以協助病理學家對NSCLC進行分類和鑒別診斷，有助于制定治療方案。

細針穿刺(FNA)是肺癌診斷和分期的常規方法，但細針穿刺標本量往往較少，同一張切片同時檢測多個標志物TTF-1、NapsinA、p63及CK5的mIF在穿刺標本有較大優勢，你怎么看？

我認為在穿刺標本中同時檢測多個標志物的mIF技術具有較大的優勢，原因如下：

1.解決標本稀缺問題：細針穿刺標本量往往較少，30%活檢標本量做常規病理都不足，常常沒有染色HE后，另外進行多張IHC、FISH染色的奢侈。一張切片同時同步檢測多個標志物，及進行HE和IHC/IF共染色將解決標本少問題，提高了診斷的準確性和可靠性。對比NGS和PCR動則需要15張切片的組織樣本量，mIF可謂樣本經濟型檢測方法。

2.節約時間和成本：傳統的免疫組化技術需要進行多次染色，每次染色耗費時間、成本較高。而mIF技術只需在同一張切片上同時檢測多個分子標志物，節約了時間和成本。

3.更好的微創性：細針穿刺作為常規的肺癌診斷和分期方法，其微創性得到廣泛認可。mIF技術同樣可以在細針穿刺標本中進行檢測，進一步減少了對患者的創傷，提高了患者的治療前后質量。

4.開辟新的研究途徑：mIF技術具有實時、全面、動態、定量等特點，可以展示腫瘤的復雜生物學特征，為肺癌的治療、預后和轉化研究提供了新的研究途徑。

因此，mIF技術在細針穿刺標本的肺癌診斷和分期中具有較大的優勢，對臨床和研究領域均具有重要意義。

圖片解釋：使用南京泰立瑞TR-IHC-Stainer免疫組化染色儀免疫熒光染色圖像

DAPI染色（藍色）、CK(綠色)、TTF-1(黃色)、p63(紫色)ki67（紅色）

mIF技術在肺癌的靶向治療和免疫治療方面有哪些應用？

mIF技術在肺癌的靶向治療和免疫治療方面有以下應用：

1.確定肺癌患者的治療方案：通過檢測肺癌相關標志物，如EGFR、ALK等，為患者制定相應的治療方案，如靶向治療。

2.監測治療效果和預后：通過檢測肺癌標志物的變化，可以對治療效果進行監測，指導治療調整和預后判斷。

3.篩選適合免疫治療的患者：通過檢測肺癌標志物如PD-L1、CD8+T細胞等，可以篩選出適合免疫治療的肺癌患者，并為臨床決策提供指導。

4.監測免疫治療效果：通過檢測肺癌相關標志物的變化，判斷免疫治療的效果，并指導個體化治療策略的調整。

總之，mIF技術在肺癌的靶向治療和免疫治療方面具有廣泛的應用前景，為肺癌治療和預后評估提供了重要支持。

南京泰立瑞信息科技有限公司在mIF技術方面有哪些建樹？

南京泰立瑞信息科技有限公司作為一家生物醫學技術公司，致力于mIF技術的研究和應用。該公司的主要成就包括：

1.制定了mIF技術的操作規范和質控標準，使該技術在臨床診斷中得到廣泛應用。

2.建立了高通量、高精度的mIF技術檢測平臺，提供從mIF染色試劑、全自動染色機、全自動病理切片掃描儀（明場+熒光）及全套數字病理圖像分析系統，實現了多種疾病的快速、準確、可靠和經濟的診斷和監測，具有高度靈