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上次實驗報告的修訂45

圖1聚酰胺色譜柱層析后的收集液的聚酰胺薄膜層析分析圖說明：圖1中的1表示收集液1；2表示收集液2；3表示收集液3；4表示蘆丁標準品；5表示槲皮素標準品。12345上次實驗報告的修訂

結論：因為Rfa=Rfd，說明收集液1是蘆丁。因為Rfb1=Rfd；Rfb2=Rfe，說明收集液2是蘆丁和槲皮素的混合物。因為Rfc=Rfe；說明收集液3是槲皮素。所以，用聚酰胺柱層析的方法分離蘆丁和槲皮素，用50%的乙醇，90%的乙醇梯度洗脫時，先從柱子流出的是蘆丁，其次是槲皮素。實驗五槐花米中蘆丁的鑒定二．實驗原理

1.根據鼠李糖和葡萄糖在硅膠板上的分配系數不同達到分離的目的。2.根據蘆丁和槲皮素的理化性質來檢識蘆丁和槲皮素。三．實驗操作（一）糖液的硅膠薄層層析

1.硅膠板的活化；2.配制展開劑，正丁醇：醋酸：水＝4：1：53.將展開劑倒入層析缸中，展開缸中展開劑的高度4mm左右。4.畫基線，基線距底邊1.0～1.5cm；（一）糖液的硅膠薄層層析5.點樣（點樣順序為：糖液、鼠李糖、葡萄糖），點樣一般為圓點，點樣直徑一般不大于2mm，點樣時必須注意勿傷薄層表面。6.將硅膠板放入展開缸的展開劑中，浸入展開劑的深度為距圓點5mm為宜，一般展距為8cm，取出薄層板，晾干。（二）蘆丁、槲皮素及糖的化學檢識1.濃硫酸和濃鹽酸反應取蘆丁或槲皮素數毫克于比色瓷板上，分別加濃硫酸或濃鹽酸1滴，注意呈色變化，研磨后溶解成橙色溶液，加較多量的水稀釋后轉為淺黃色，析出黃色沉淀。2.酸性試驗：

取小試管8支，每4支一組，第一組每管中加入蘆丁1mg，第二組每管中加入槲皮素1mg，每組試管中分別加入稀氨水、5%碳酸氫鈉、5%碳酸鈉水溶液、1%氫氧化鈉水溶液各2ml，振搖后觀察各管溶解情況。溶解的溶液應呈黃色。再加濃鹽酸滴酸化，黃色褪去或變淺，并有沉淀析出或產生混濁。3.莫氏（molish）反應

取試樣1mg置小試管中，加乙醇1ml溶解，加α-萘酚1-2滴，搖勻，傾斜試管，沿管壁徐徐注入濃H2SO4約1ml，靜置。觀察兩層溶液的界面變化，出現紫色環者為陽性，表示樣品分子中含有糖的結構（糖和苷類均呈陽性反應）。比較蕓香苷和槲皮素的不同。6.醋酸鎂反應

取樣品乙醇液與醋酸鎂試劑作紙上反映，觀察熒光。二氫黃酮，二氫黃酮醇類可顯天藍色熒光，若有5-OH，色澤更明顯。而黃酮，黃酮醇和異黃酮類等顯黃色—橙色—褐色熒光。7.三氯化鐵反應

取樣品1mg溶于1ml乙

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