尿液蛋白質檢查一、尿液微量白蛋白的測定健康人的尿液白蛋白一般小于20mg/L,大于30mg/L時即提示異常。定義：微量白蛋白是指尿中白蛋白含量超過健康人水平，但常規(guī)尿蛋白試驗為陰性的低濃度白蛋白。檢測方法：染料結合法、放射免疫分析、酶聯(lián)免疫吸附、免疫比濁分析、膠體金紙片報告方式：定時留尿法（μg/ml;mg/24h)

晨尿法(mg/L)

隨機留尿法(mg/mmolCr;mg/gCr)國際上以尿白蛋白排泄率>20mg/L

或尿總蛋白>30mg/24h作為尿微量白蛋白的臨界值。二、Bence-Jonesprotein：

實質是免疫球蛋白輕鏈或其聚合物，單聚體分子量為2.3萬。凝溶蛋白：pH4.5~5.5，56℃條件加熱出現(xiàn)白色混濁及凝固，100℃煮沸以后混濁消失或明顯減退，再冷卻時又可重新凝固。蛋白電泳時可在α2至γ球蛋白區(qū)帶間的某個部位出現(xiàn)M區(qū)帶。檢測方法：對甲苯磺酸沉淀篩選實驗：靈敏度3mg/L熱沉淀法驗證乙酸纖維素膜電泳或者聚丙烯酰胺凝膠電泳：M帶免疫固定電泳：區(qū)帶電泳分離蛋白后，立即將浸有特異抗L鏈血清的薄膜條直接放到預計出現(xiàn)異常蛋白帶的位置上，使之產生抗原抗體的復合物反應。免疫擴散實驗：用特異的L鏈血清進行免疫擴散實驗。臨床意義：多發(fā)性骨髓瘤、原發(fā)性巨球蛋白血癥三、β2-microglobulin性質：一種低分子量的蛋白質（1.18萬），是細胞膜上完整組織相溶性抗原HLA的一部分。檢測方法：放射免疫分析（RIA）、酶免疫分析（EIA）參考值:血β2-M<3.0mg/L尿β2-

M<0.2mg/L臨床意義：腎小管疾病、血清β2-M異常增高檢測方法：試紙法：利用血紅蛋白中亞鐵血紅素具有類過氧化物酶作用，在鄰聯(lián)甲苯胺等供氫體存在下，使過氧化物還原為水，而鄰聯(lián)甲苯胺被氧化成有色物質。

免疫測定方法：利用抗人血紅蛋白單克隆抗體臨床意義：

血管內溶血泌尿道出血2.myoglobin肌紅蛋白是橫紋肌、心肌細胞內的一種含亞鐵血紅素的蛋白質，分子量小，易通過腎小球。

測定方法：紙片法：原理與血紅蛋白測定類似。肌紅蛋白能溶于0.8飽和度的硫酸銨溶液中免疫法：利用單克隆抗體ELISA、3.hemosiderin當發(fā)生血管內溶血時，大部分血紅蛋白隨尿排出，其中一部分血紅蛋白被腎小管上皮細胞再吸收后在腎小管上皮細胞內分解形成血鐵黃素，再隨細胞脫落至尿中排出。檢測方法：Prussian反應，當尿中含有鐵血黃素時，其中高鐵離子與亞鐵氰化鉀作用，在酸性環(huán)境下，產生藍色的亞鐵氰化鉀沉淀。

注意事項：1.避免鐵污染；2.清晨第一次尿陽性率較高

臨床意義：血管內溶血、行進性血紅蛋白尿。五、Tamm—Horsfall

proteinTH蛋白由Henle袢升支與遠曲小管的上皮細胞的高爾基復合體產生，是一種腎特異性蛋白質。是構成管型的一種重要蛋白。

檢測方法：酶聯(lián)免疫吸附法、放射免疫法

臨床意義：協(xié)助診斷上尿路疾患有助于泌尿系統(tǒng)結石形成機制的研究。六、尿液酶測定尿液酶的來源：血液的酶：淀粉酶、溶菌酶腎實質的酶：腎小管刷狀緣（γ-GT、AAP、LAP、ALP、α-GLU）、溶菌體（NAG、ACP、β-葡萄糖醛酸苷酶）、胞漿（LDH）及線粒體（AST）尿路及生殖系統(tǒng)的酶：前列腺（ACP、NAG）、精液（LDH、hyaluronicacid）、腫瘤細胞尿液酶測定時尿液標本的處理方法：尿液通常為弱酸性，且蛋白質濃度較低，不利于尿酶活力的保存，因此必須及時測定和處理。大部分尿酶活性比血漿酶活性低，在測定時適當加大標本用量或延長酶作用時間。尿液中含有較高濃度的低分子物質，如尿素、尿酸、肌酐、硫酸鹽、磷酸鹽等，他們可能是某些酶的抑制劑，因此必須對尿液標本進行預處理：超濾法、透析法、凝膠過濾法2.α-葡萄糖苷酶（α-glucosdiase,

α-GLU）α-GLU主要存在于腎小管上皮細胞刷狀緣，在血清中的含量極低，且分子量大（9萬），不易通過腎小球，因而尿中的α-GLU主要來自腎小管上皮細胞。測定：用麥芽糖做底物，經α-GLU的水解作用生成葡萄糖，再用葡萄糖氧化酶法測定葡萄糖的生成率。臨床意義：腎小管損傷的敏感指標3.谷氨酰轉移酶（γ-glutamyltransferase，γ-GT）γ-GT廣泛存在于人體各組織中，以腎、肝、胰等組織含量最高。尿中γ-GT濃度較高，原尿無需預先濃縮。用γ-