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實驗二、細胞及細胞結(jié)構(gòu)一、實驗?zāi)康?、熟悉光學顯微鏡下植物細胞的基本結(jié)構(gòu)組成及其特征;2、 了解后含物的種類與識別方法;3、理解和掌握細胞有絲分裂各時期的特征二、實驗要求:通過本實驗的操作和觀察訓練,基本掌握植物臨時玻片標本制作的步驟和方法,懂得光學顯微鏡下植物細胞的基本結(jié)構(gòu)組成和特征,理解和掌握植物細胞有絲分裂的過程和特征。根據(jù)觀察結(jié)果,完成實驗報告。三、實驗儀器、材料和試劑1、器具與用品:生物顯微鏡、鑷子、解剖針、刀片、紗布、吸水紙、擦鏡紙、載玻片、蓋玻片、滴瓶、蒸餾水。2、植物材料:蠶豆或花生種子、蓖麻種子、棉花種子、小麥穎果縱切制片、玉米、小麥穎果、水稻“種子”、洋蔥鱗莖、黑藻葉、紅辣椒、馬鈴薯塊莖。3、臨時玻片標本片:洋蔥鱗葉表皮細胞裝片、馬拉松塊莖淀粉涂片、辣椒果皮臨時玻片。4、永久玻片:柿胚乳細胞胞間連絲制片、花生子葉制片、松木貫心縱切制片、水稻愈傷組織切片、夾竹桃葉橫切制片、石細胞制片、洋蔥根尖縱切片、蓖麻胚乳細胞切片、小麥穎果切片四、實驗內(nèi)容與方法1臨時玻片標本切片的制作(按先后順序進行如下操作)取洋蔥鱗葉片一片,用雙面刀片在其上作3-5mm長寬的“井”字格輕輕劃切;取已擦洗干凈的載玻片與蓋玻片各一枚,將載玻片置于座位前方的桌面上,滴加一滴蒸餾水于玻片中央;撕取一小片鱗葉,平鋪于載玻片上的水滴上方;用鑷子夾取一枚蓋玻片,先將蓋玻片的一邊與載玻片上的水滴邊緣接觸,然后自一側(cè)輕輕放下(如突然放下,易產(chǎn)生氣泡,影響觀察),如已產(chǎn)生氣泡,則在蓋玻片一側(cè)加少許蒸餾水,并用解剖針輕挑蓋玻片一側(cè),再垂垂放下,可去除產(chǎn)生的氣泡。2、光學顯微鏡下植物細胞結(jié)構(gòu)觀察1).洋蔥鱗葉表皮細胞結(jié)構(gòu)觀察將制好的臨時玻片置于顯微鏡載物臺上,先低倍物鏡觀察,表皮細胞近呈六邊形網(wǎng)格,選擇圖象清晰、結(jié)構(gòu)完整的區(qū)域,移到視野中央,換用高倍物鏡、配合調(diào)節(jié)細調(diào)焦手輪,可觀察到如下細胞結(jié)構(gòu)層次(圖2—1)。細胞壁細胞壁近透明,用I-KI染色(滴一滴碘液在蓋玻片的邊緣,用吸水紙從蓋玻片的另一邊吸水,稍等片刻后,染料即進入細胞),可見厚薄不均的細胞壁,且細胞壁中央較亮(胞間層)而兩邊較暗(初生壁),仔細調(diào)節(jié)細調(diào)焦手輪,可看到初生壁上有許多凹陷的區(qū)域——初生紋孔場。

白色■體初生壁白色■體初生紋孔腕間層細胞質(zhì)液泡圖2—1 光鏡下的洋蔥表皮細胞基本結(jié)構(gòu)細胞質(zhì)縮小光圈,通過調(diào)焦手輪調(diào)節(jié)焦距,發(fā)現(xiàn)緊貼細胞壁有一層較為暗淡的薄層、呈淡黃色,即為細胞質(zhì)。液泡縮小光圈,可見液泡在細胞中占據(jù)的體積最大,較貼近細胞壁的細胞質(zhì)顏色淡。細胞核在細胞一側(cè),可見一折光性強的卵圓形或圓形球體(有時位于細胞中央),通過細調(diào)焦手輪的轉(zhuǎn)動,可見細胞核邊緣有不連續(xù)區(qū)域,即為核孔,連續(xù)的區(qū)域即為核膜,在細胞核中還可看到一兩個或多個圓球形顆粒,即為核仁。白色體在細胞核周圍的細胞質(zhì)中,可看到許多發(fā)亮的顆粒,此為白色體。2)葉綠體及胞質(zhì)運動葉綠體細胞壁取黑藻(Hydrillaverticillata(L.f.)Royle)葉片,制成臨時玻片,在低倍鏡下可見網(wǎng)狀葉肉細胞的周圍具有許多綠色顆粒--葉綠體,聚焦后轉(zhuǎn)用高倍鏡觀察,可現(xiàn)細胞內(nèi)的葉綠體在不斷的移動,這就是胞質(zhì)運動現(xiàn)象(圖2—2A)。葉綠體細胞壁圖2—2 葉綠體形態(tài)及胞質(zhì)運動模式3)有色體

取紅辣椒(CapsicumannuumL.))果皮或果肉一塊,制成臨時玻片,在顯微鏡下觀察可見橙紅色棒狀或球狀的顆粒,即為有色體(圖2-3)。-有色住圖2—3辣椒果皮——示有色體4)-有色住圖2—3辣椒果皮——示有色體在低倍鏡下將細胞壁上具有清晰的胞間連絲的部位移至視野中央,然后轉(zhuǎn)至高倍鏡貓膽腔胸間連絲下觀察,調(diào)節(jié)光闌調(diào)整視野光強和細調(diào)焦手輪,可見相鄰兩個細胞厚厚的細胞壁上有許多由細胞質(zhì)形成的暗黑色的細絲,即為胞間連絲(圖2-4)。胞間連絲使多細胞的植物體連成一個整體。貓膽腔胸間連絲圖2-4柿胚乳切片5)紋孔單紋孔用尖頭鑷子撕一小塊經(jīng)浸泡的小麥穎果果皮制成臨時玻片,在顯微鏡下觀察(圖2-5),可以看到整個細胞被一條“亮帶”包圍,此亮帶即為胞間層和初生壁部分。同時可以看到,細胞壁有強烈增厚的次生壁,且不均勻,但增厚區(qū)域的邊緣卻比較整齊,沒有增厚的區(qū)域即為單紋孔,兩個細胞單紋孔成對排列,即為紋孔對。圖2-5小麥穎果果皮 圖2-6松木貫心縱切細胞聲具緣軟孑I.■I細胞聲具緣軟孑I.■I具緣紋孔取松木莖貫心縱切片在高倍鏡下觀察,通過細調(diào)焦手輪調(diào)節(jié)焦距,可見管胞上具有許多由3個同心圓構(gòu)成的結(jié)構(gòu),此為具緣紋孔(圖2-6),其中外圓為紋孔腔邊緣,內(nèi)圓為紋孔口的邊緣,中間為紋孔塞邊緣。6、后含物蛋白質(zhì)取蓖麻籽縱切片在高倍鏡下觀察,可見許多有色顆粒,即為糊粉粒(圖2-7)。在顆粒中包含有多邊形的晶體,即擬晶體、圓球形晶體,即球晶體(由蛋白質(zhì)與鱗酸鈣鎂脂類取花生(ArachishypogaeaL.結(jié)合而)。脂類取花生(ArachishypogaeaL.圖2-8花生子葉切片)子葉切片,在高倍鏡下觀察,可見許多橙紅色的圓球形(用蘇丹III酒精溶液染色的結(jié)果)顆粒,即為油滴(圖2-8)。圖2-9馬鈴薯塊莖一示淀粉粒形態(tài)淀粉取馬鈴薯(SolanumtuberosumL.)塊莖切片,在載玻片上涂抹一下,使水滴渾濁,制成臨時玻片,顯微鏡下可見許多橢圓形的顆粒一—淀粉粒,通過調(diào)節(jié)細調(diào)焦手輪,可見淀粉粒由許多明暗交替的同心橢圓花紋(輪紋)圍繞一個點(臍點)組成(圖2-9A)。在視野中不僅可以找到具有一個臍點的淀粉粒一一單粒(圖3-9B),而且還可以找到2個或2個以上臍點的淀粉粒一一復(fù)粒或半復(fù)粒(圖2-9C)圖2-9馬鈴薯塊莖一示淀粉粒形態(tài)晶體取夾竹桃(NeriumindicumMill.)葉片切片觀察,可見在葉肉組織的有些細胞中有許多針形的晶體集成的晶簇(圖2-10)。用洋蔥老的鱗葉經(jīng)甘油透明面一部分后制成臨時玻片觀察,可在細胞中見到棒狀或針狀的晶。7、細胞分裂1) 有絲分裂取洋蔥根尖縱切制片,在低倍鏡下觀察,由先端向后觀察可見其最前端由許多不規(guī)則的薄壁細胞組成的帽狀結(jié)構(gòu)一一根冠;在根冠內(nèi)方,細胞形態(tài)為近方形,橫壁一般比縱向壁略長,此區(qū)域為分生區(qū)。將分生區(qū)移至視野中央,轉(zhuǎn)換至高倍鏡下仔細觀察,按照各期細胞核特征,尋找處于有絲分裂不同時期的細胞。2) 無絲分裂(圖2-11)圖2-11細胞的無絲分裂五、注意事項1、 嚴格

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