RT-PCR法檢測ndrg2mRNA在胎腦表達的特ndrg2引物由教授設計,ndrg2上游引物為5’CCT CCTTTA CGTGAT T3，下游引物為5’CCG 3，產物片段為670bp；內參照GAPDH正向引物序列為5'AGG TT3'，反向引物為5' TCA 3',產物片段為310bp(引物由三博公司合成)提取胎腦組織總（1）（2)應用Gibco公司的TRIzolReagent試劑盒進行組織總提取[3]，每0.1g腦組織加入預冷的1mlTRIzol提取液，在冰浴下的玻璃勻漿器中充分研磨。勻漿后的液體移入1.5mlEppendorf管中，加0.2ml氯仿，室溫下靜置4℃離心12000rpm×15min，取上清加入0.5ml異丙醇，靜置20min將RNA反轉錄為以25μl總RNA2μg加入2μloligodT（0.5μg／μl），補DEPC處理水至11μ加入AMV5×Buffer5μl，10mmol／L,dNTP2.5μlRNA酶抑制劑 RT反轉錄酶加DEPC處理水至25μl，42℃孵育60min（4）70℃15min,終止反應,即得cDNA（5）每管cDNA濃度調整為 PCR擴以25μL在PCR管中加入1μlcDNA(0.5μg／μl),2μlNTP×Buffer(2.5μl1.5μlMgCL2(25mmol／L),上下游引物各1μl(10nmol／L),去離子水15.5μl。混勻,94℃預變性5min后,加入0.5μlTaq酶(5U／μLndrg2組繼續:94℃5min；94℃30s,55℃ 30s，72℃1min(30個循環)；72℃7min。GAPDH循環參數:94℃5min；94℃，30s,55℃30s,72℃1min(30個循環)；72℃7min。25μlPCR5.PCR擴增產物的電泳分析及統計學處在1.15%瓊脂糖凝膠中電泳分離,EB染色后照相,KodakDigitalScience1D軟件系統掃描.以ndrg2mRNA擴增帶的平均光密度對GAPDHmRNA擴增帶平均光密度的比值代表細胞中ndrg2mRNA的表達水平(即mRNA豐度)。結果分RNA電泳結果表明,提取的總RNA呈現清28S18SRNA條帶,兩者亮度之比約為2∶1,無拖尾及雜帶，表明RNA沒有降具有良好的完整性經紫外DU-53A260/A2801.8～2.0RNA260nm波長的光吸收值A260計算RNA的含量。利用對16～28胎腦不同腦功能區中ndrg2mRNA表達水平進行檢測。結果顯示，ndrg2mRNA表達水平在早期不同腦區均有表達，但強弱不同：16胎腦功能區中海馬，小腦表達較高，而隨胎齡增長，各腦功能區表達呈增強趨勢，腦葉的額葉表達最強（1）。半定量RT-PCR測定ndrg2mRNA在16～28胎腦額葉、小腦、海馬及延髓ndrg2在16～28額葉、小腦、海馬及延髓中均有表達，隨月齡增加葉為1.84，28額葉為2.11;ndrg2mRNA豐度在16小腦為1.15，20小腦為1.39，24小腦為1.76,28小腦為1.93；ndrg2mRNA豐度在16海馬為半定量RT-PCR測定ndrg2mRNA在28胎腦各腦區的表達水ndrg2在28腦葉中的額葉、顳葉、頂葉及枕葉、中腦、小腦、延髓、海馬和基底核中均有表達28胎腦額葉頂葉表達增強基底核表達略（圖5）。經內參照歸一化處理后，KodakDigitalScience1D軟件系統掃描分析計算值如下：ndrg2mRNA豐度在28基底核為1.62，中腦為1.76，顳葉為1.92，枕葉為1.79，頂葉為1.94，額葉為2.11，小腦為1.93，海馬為1.89延髓為1.82。marker marker

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RT-PCRysisofndrg2mRNAindifferentbrainareasof28thweekembryomicbrainbasalganglia,frontallobe,temporallobe,parietallobe,occipitallobe,midbrain,cerebellum,medullaoblongata,hippocampal（2～10lane） Tab1RT-PCR ysisofndrg2mRNAin16th~28thweekcerebellum`,hippocampal,`medullaoblongata,frontallobe 5 25 Tab2RT-PCRysisofndrg2mRNAindifferentbrainareasof28thweek28thweek:basalganglia，frontallobe，temporallobe,parietallobe,occipitallobe,midbrain,cerebellum,medullaoblongata,hippocampal. 論ndrg是近幾年才逐漸發現的一族新包括ndrg1、ndrg2、ndrg3和ndrg4，此成員的氨基酸同源性很高，組織分布差異很大。目前對ndrg肝臟和腸上皮，其蛋白定位于胞漿。Ndrg1有抑制細胞增殖，調節細胞期，抑人ndrg2是由教授發現的新，氨基酸序列分析顯示，人、小鼠具有ndrg1一樣的功能，不僅抑制腫瘤生長、轉移，而且與細胞的生長及胚胎發構極為相似。這些結果提示NDRG2蛋白具有一定的酶活性，可能參與細胞抗氧化人ndrg2的表達與ndrg1一樣均與分化狀態有關，即在其所表達的組織中，分化程度越高，表達豐度越高[4,5]。另外，它比ndrg1更具組織特異性，在腦組織中表既往研究資料顯示,ndrg2為正常腦組織和多種瘤組織的差異表達基因因此目前普遍認為該可能和腫瘤的發生有關系,把它列為抑癌候選[11,14]。國料顯示,抑癌對神經干細胞的增殖分化有調控作用[12]。Mitchelmore等新近研究發現，ndrg2參與了應激反應和氏病等腦部疾病的發生發展，在氏腦中，ndrg2mRNA和蛋白水平在病變受累的區域均明顯增高，說明ndrg2過表達同樣會引起腦部疾病[13]教授等。肝肺腎等臟器的表達量低于成人相應而且其表達量于與的成熟程度呈正相關[11]ndr