標準解讀
《GB/T 35906-2018 豬瘟抗體間接ELISA檢測方法》是一項國家標準,旨在提供一種科學、準確的方法來檢測豬體內是否存在針對豬瘟病毒的特異性抗體。該標準適用于對疑似感染或已接種疫苗豬只進行血清學監測,以評估其免疫狀態。以下為該標準主要內容概述:
首先,在準備階段,明確了所需試劑和材料的具體要求,包括抗原包被液、封閉液、稀釋液以及酶標記二抗等,并且對于每種成分的質量控制標準都有詳細說明。此外,還規定了樣品采集與處理的方法,強調應從待測動物中正確抽取血液樣本并分離出血清用于后續實驗。
接下來是具體操作步驟,分為以下幾個關鍵環節:
- 包被:使用豬瘟病毒抗原溶液在微孔板上進行包被。
- 封閉:加入封閉液以減少非特異性結合。
- 加樣:將待測血清樣本按照一定比例稀釋后加入到相應的孔中。
- 孵育:在特定溫度下讓樣本中的抗體與固定于板上的抗原充分反應。
- 洗滌:去除未結合的物質。
- 加酶標二抗:添加能夠識別并與目標抗體結合的酶標記二抗。
- 再次孵育與洗滌:確保酶標二抗與樣本中的抗體形成復合物。
- 顯色:通過加入底物使顏色發生變化。
- 終止反應:使用終止液停止顯色過程。
- 讀數:利用酶標儀測定各孔吸光度值。
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....
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- 現行
- 正在執行有效
- 2018-02-06 頒布
- 2018-09-01 實施




文檔簡介
ICS11220
B41.
中華人民共和國國家標準
GB/T35906—2018
豬瘟抗體間接ELISA檢測方法
IndirectELISAtodetectantibodyagainstclassicalswinefevervirus
2018-02-06發布2018-09-01實施
中華人民共和國國家質量監督檢驗檢疫總局發布
中國國家標準化管理委員會
GB/T35906—2018
前言
本標準按照給出的規則起草
GB/T1.1—2009。
本標準由中華人民共和國農業部提出
。
本標準由全國動物衛生標準化技術委員會歸口
(SAC/TC181)。
本標準起草單位中國獸醫藥品監察所
:。
本標準主要起草人王琴徐璐范學政趙啟祖鄒興啟朱元源寧宜寶
:、、、、、、。
Ⅰ
GB/T35906—2018
引言
牛病毒性腹瀉粘膜病病毒在牛的感染比較嚴重偶爾也有豬自然感染的報道在田間牛病毒性
/,。,
腹瀉粘膜病病毒通常對出生后的豬無致病性僅對胎豬有致病性雖然牛病毒性腹瀉粘膜病病毒可
/,。/
在豬群中傳播但這種傳播是很有限的在沒有新的傳染源引入的前提下豬群中已經存在的牛病毒性
,。,
腹瀉粘膜病病毒會被逐漸清除病毒的傳染鏈會終止牛源牛病毒性腹瀉粘膜病病毒是豬感染牛病
/,。/
毒性腹瀉粘膜病病毒的主要來源主要與牛豬混養程度或使用了污染牛病毒性腹瀉粘膜病病毒的牛
/,/
源材料有關在我國生豬飼養的主力主要為大中型養殖場很少存在豬牛混養情況因此不會導致牛病
。,,
毒性腹瀉粘膜病病毒在豬群中的流行傳播另外豬用疫苗生產中的所使用的牛源原材料均需進行牛
/。,
病毒性腹瀉粘膜病病毒等外源病毒檢測因此疫苗生產工藝的提高也徹底切斷了牛病毒性腹瀉粘膜
/,,/
病病毒在豬群中傳播途徑最后豬瘟疫苗在我國的免疫率接近而豬瘟病毒與牛病毒性腹瀉
。,100%。/
粘膜病病毒為同屬病毒免疫上存在一定的交叉保護豬群中存在牛病毒性腹瀉粘膜病抗體陽性的可
,。/
能性微乎其微因此本標準主要針對豬群中豬瘟疫苗免疫后的抗體檢測不用于對個體進行豬瘟抗體
。,,
和牛病毒性腹瀉粘膜病抗體的鑒別檢測
/。
Ⅱ
GB/T35906—2018
豬瘟抗體間接ELISA檢測方法
1范圍
本標準規定了豬瘟抗體的間接檢測方法
ELISA。
本標準適用于豬瘟抗體檢測
。
2規范性引用文件
下列文件對于本文件的應用是必不可少的凡標注日期的引用文件僅注日期的版本適用于本文
。,
件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改單適用于本文件
。,()。
獸醫實驗室生物安全技術管理規范中華人民共和國農業部公告第號
(302)
3縮略語
下列縮略語適用于本文件
。
豬瘟病毒
CSFV:(ClassicalSwineFeverVirus)
酶聯免疫吸附試驗
ELISA:(Enzyme-LinkedImmunosorbentAssay)
辣根過氧化物酶
HRP:(HorseradishPeroxidase)
光密度
OD:(OpticalDensity)
4試劑
41豬瘟病毒蛋白見附錄
.E2:A。
42標準陽性血清豬瘟疫苗免疫仔豬制備熒光抗體病毒中和試驗檢測中和抗體效價
.:,≥1∶20480。
43標準陰性血清無母源抗體未免疫豬瘟疫苗的仔豬血清熒光抗體病毒中和試驗病毒抗體檢測為
.:、,
陰性
。
44酶結合物商品化的標記的抗豬抗體工作濃度參照產品說明書
.:HRPIgG,。
45包被液見附錄中的
.:BB.1。
46磷酸鹽緩沖液見
.:B.2。
47封閉液見
.:B.3。
48洗滌液見
.1×:B.4。
49稀釋液見
.:B.5。
410底物液見
.A:
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