實驗四、血小板計數南通大學附屬醫院叢輝第一頁，共二十一頁。血小板（platelet，PLT）是由骨髓造血組織中的巨核細胞產生，具有維持血管內皮完整性以及黏附、聚集、釋放、促凝和血塊收縮等功能。血小板計數是止血、凝血檢查最常用的篩檢試驗之一。血小板計數（PLT）是測定單位容積的血液中血小板的數量。血小板特點

第二頁，共二十一頁。血小板形態檢查

在血涂片上血小板往往散在或成簇分布，多為圓形、橢圓形或略欠規則形；胞質呈淡藍或淡紅色，有細小、分布均勻而相聚或分散于胞質中的紫紅色顆粒。正常血小板形態：正常血小板呈兩面微凸的圓盤狀，直徑約1.5～3μm，新生血小板體積大，成熟者體積小。第三頁，共二十一頁。異常血小板形態：

1．大小異常血小板可出現明顯的大小不均變化。（1）大血小板：直徑為4～7μm，巨型血小板直徑大于7μm，常為7～20μm，也可大于20μm，胞質中嗜天青顆粒細小或融合為大顆粒。

主要見于ITP、粒細胞白血病、血小板無力癥、巨大血小板綜合征、MDS和脾切除后等。血小板形態檢查

第四頁，共二十一頁。

（2）小血小板：直徑小于1.5μm，主要見于缺鐵性貧血、再生障礙性貧血、ITP等。

2．形態異常血小板可以出現桿狀、逗點狀、蝌蚪狀、蛇形和絲狀突起等異常形態，健康人偶見（少于2%）。

影響血小板形狀改變的因素很多，各種形態異常又無特異性。因此，不規則和畸形的血小板比值超過10%時才有臨床意義。血小板形態檢查

第五頁，共二十一頁。3．聚集性和分布異常血小板聚集、分布狀態可間接反映其功能。聚集功能正常的血小板在非抗凝血的外周血涂片中常可見3～5個聚集成簇或成團，聚集與散在血小板之比為20∶1。在EDTA抗凝血的血涂片中，可見血小板不聚集而呈散在分布狀態或出現誘發的血小板聚集現象。第六頁，共二十一頁。

（1）血小板衛星現象：血小板黏附、圍繞于中性粒細胞周圍（或偶爾黏附于單核細胞）的現象，有時可見血小板吞噬現象。此時，血小板和中性粒細胞形態和功能均正常。血小板衛星現象偶見于EDTA抗凝血。

因EDTA和免疫球蛋白相互作用、非特異性結合血小板之故，被抗體包被的血小板與中性粒細胞結合。血小板衛星現象是血液分析儀血小板計數假性減少的原因之一（血小板被誤計為白細胞）。第七頁，共二十一頁。

（2）血小板片狀聚集：原發性血小板增多癥和血小板增多的慢性粒細胞白血病，血小板可呈大片聚集（圖2-57）。

（3）血小板減少：再生障礙性貧血和ITP因血小板數量少，血小板聚集成團的情況明顯減少。（4）血小板功能異常：血小板無力癥時血小板無聚集功能，且散在分布，不出現聚集成團的現象。第八頁，共二十一頁。血小板計數第九頁，共二十一頁。血小板計數方法第十頁，共二十一頁。血小板計數方法學評價第十一頁，共二十一頁。血小板計數原理

血液經血小板稀釋液稀釋后，紅細胞被溶解，注入計數池后，在顯微鏡下計數血小板。經換算求出每升血液中的血小板數。第十二頁，共二十一頁。試劑器材試劑

草酸銨稀釋液草酸銨10克EDTA0.12克蒸餾水加至1000ml，過濾后備用。

第十三頁，共二十一頁。試劑器材器材改良牛鮑計數板采血針微量吸管顯微鏡第十四頁，共二十一頁。操作步驟

吸取血小板稀釋液0.38ml于康氏試管中。

用一次性微量吸管吸血20ul于上述稀釋液中。充分混勻后取一小滴于血球計數池內，靜止10-15分鐘.

用低倍鏡或高倍鏡計數中央大方格中五個中方格內之血小板數。第十五頁，共二十一頁。計算

按下列公式計算血小板數參考值

（100-300）×109/L第十六頁，共二十一頁。質量控制

有少數患者可能紅細胞溶解不完全。稀釋液可放室溫使用，但應密閉以防灰尖及水份蒸發，最好放冰箱保存為妥。采血時，如同時做WBC等，應先采血做血小板。懸液制備，充分混勻，搖動標本2min或200次以上。計數時應等待充液靜止10-15min后方可計數，時間過短因血小板尚未下沉，使計數結果偏低，但時間不宜放置過長，否則出現顆粒沉淀物，使計數無法進行。血小板在鏡下為富于折光之小點，約為紅細胞的1/2～1/3大小。計數光線不可太強，1h內計數完成。如紅細胞不完全溶解，影響血小板計數時，可加大稀釋倍數，或另換稀釋液。

第十七頁，共二十一頁。

血小板減少是引起出血的常見原因20～50×109/L時，可有輕度出血或手術后出血；<20×109/L，可有較嚴重的出血；<5×109/L時，可導致嚴重出血；>400×109/L為血小板增多臨床意義第十八頁，共二十一頁。毛細血管采血標準操作程序

操作步驟采血部位成人以左手無名指內側為宜，半歲以下嬰幼兒通常自拇指內側或足跟兩側采血。輕輕按摩采血部位。 用洗必泰碘棉簽消毒局部皮膚、待干。？緊捏刺血部位，使其自然充血。用無菌刺針穿刺取血，動作應迅速，深度2～3mm，稍加擠壓以血液流出為宜。用干棉球擦去第一滴血。？按需要依次采血。采血完畢，用干棉球壓住傷口，止血片刻。第十九頁，共二十一頁。質量保證

除特殊情況外，不要在耳垂采血。若在耳垂采血應避開凍瘡、炎癥、水腫等部位。皮膚消毒，嚴格無菌操作。快、準，深度適宜。微量吸管吸血準確，