抗微生物藥物敏感試驗的

質(zhì)量控制上海市臨床檢驗質(zhì)量控制中心婁崢抗微生物藥物敏感試驗的

質(zhì)量控制1抗微生物藥物敏感試驗分類

抗細菌的抗需氧菌的抗苛氧菌的抗厭氧菌的抗真菌的抗其它微生物的

抗微生物藥物敏感試驗分類抗細菌的2抗微生物藥物敏感試驗分類紙片法稀釋法儀器法E-test法分子生物學方法

抗微生物藥物敏感試驗分類紙片法3藥物敏感試驗影響因素操作步驟的規(guī)范性技術(shù)人員素質(zhì)

質(zhì)控菌株污染與變異0.5號麥氏標準管不勻或變質(zhì)細菌懸液的濃度

試驗用培養(yǎng)基、藥敏紙片，藥敏板條的質(zhì)量問題

錯誤的孵育時間、溫度或孵育氣體

結(jié)果判讀錯誤數(shù)據(jù)錄入時的抄寫錯誤藥物敏感試驗影響因素操作步驟的規(guī)范性4一、藥敏試驗操作規(guī)程

（1）方法名稱，原理，適用范圍實驗材料的規(guī)格（編號）、品牌、供應商操作步驟，注意事項，結(jié)果判斷標準，報告方式質(zhì)控方法，結(jié)果判斷標準，失控處理一、藥敏試驗操作規(guī)程（1）方法名稱，原理，適用范圍5藥敏試驗操作規(guī)程（2）用儀器開展藥敏試驗的要編寫使用儀器的操作規(guī)程用與儀器配套的藥敏試驗板條的要按照儀器商的規(guī)定編寫質(zhì)控方法和失控處理。編寫者，編寫日期科室負責人對該檢驗項目的認可簽字藥敏試驗操作規(guī)程（2）用儀器開展藥敏試驗的要編寫使用儀器的操6二、人員要求接受過病原微生物學方面的教育。具有臨床微生物檢驗相關(guān)理論和基本操作技能。掌握NCCLS制定的標準方法，按文件規(guī)定對結(jié)果作判斷、解釋。熟悉臨床微生物檢驗質(zhì)控理論和方法。二、人員要求接受過病原微生物學方面的教育。7三、儀器設(shè)備的質(zhì)控培養(yǎng)箱

二氧化碳培養(yǎng)箱冰箱每天觀察并作記錄儀器的質(zhì)控應按照制造商的要求定期進行三、儀器設(shè)備的質(zhì)控培養(yǎng)箱8四、檢驗材料的質(zhì)控培養(yǎng)基藥敏紙片藥敏板條0.5麥氏濁度標準管標準菌株四、檢驗材料的質(zhì)控培養(yǎng)基9培養(yǎng)基種類MH瓊脂：用于需氧菌藥敏試驗（紙片法和瓊脂稀釋法）調(diào)節(jié)好陽離子的MH肉湯：用于需氧菌藥敏試驗（肉湯稀釋法）HTM培養(yǎng)基：用于流感嗜血桿菌的藥敏試驗GC瓊脂：用于淋病奈瑟菌的藥敏試驗含5％脫纖維羊血的MH培養(yǎng)基：用于肺炎鏈球菌及其它鏈球菌的藥敏試驗（紙片法）添加馬血的陽離子調(diào)整過的MH肉湯：用于鏈球菌的藥敏試驗（稀釋法）培養(yǎng)基種類MH瓊脂：用于需氧菌藥敏試驗（紙片法和瓊脂稀釋法）10（一）培養(yǎng)基的質(zhì)量控制一般性狀無菌試驗培養(yǎng)基性能測試MH平板中胸腺嘧啶或胸腺嘧啶核苷含量的測定復方新諾明紙片-糞腸球菌（ATCC29212或33186）對二價陽離子含量的測定氨基糖苷類或四環(huán)素紙片-銅綠假單胞菌-鈣鎂離子頭孢碳烯類-細菌-鋅離子使用期限（一）培養(yǎng)基的質(zhì)量控制一般性狀11（二）藥敏紙片的質(zhì)控新批號藥敏紙片使用前用質(zhì)控菌株測試平時使用前1～2小時，從冰箱取出放室溫平衡低溫貯存-20℃保存：大量的，近期不用的性能不穩(wěn)定的：亞胺培南，頭孢克洛，克拉維酸復合劑4℃保存：少量的，正在使用的，性能穩(wěn)定的（二）藥敏紙片的質(zhì)控新批號藥敏紙片使用前用質(zhì)控菌株測試12（三）藥敏板條的質(zhì)控按照生產(chǎn)廠商的要求，定期對同一批號的藥敏板條進行質(zhì)控。更換批號時應作質(zhì)控。（三）藥敏板條的質(zhì)控按照生產(chǎn)廠商的要求，定期對同一批號的藥敏13（四）0.5麥氏濁度標準管的質(zhì)控

每月用分光光度計測吸光度，OD值應在0.08～0.10之間（四）0.5麥氏濁度標準管的質(zhì)控每月用分光光度計測吸光度14（五）標準菌株的質(zhì)控種類與應用范圍菌株的保存（五）標準菌株的質(zhì)控種類與應用范圍15需氧菌藥敏試驗的標準菌株大腸埃希菌ATCC25922用于腸桿菌科細菌、霍亂弧菌藥敏試驗的質(zhì)控金黃色葡萄球菌ATCC25923用于葡萄球菌屬或腸球菌屬細菌藥敏試驗的質(zhì)控（紙片法）金黃色葡萄球菌ATCC29213用于葡萄球菌屬細菌藥敏試驗的質(zhì)控（稀釋法）糞腸球菌ATCC29212用于腸球菌屬細菌藥敏試驗的質(zhì)控（稀釋法）銅綠假單胞菌ATCC27853用于銅綠假單胞菌和不動桿菌屬細菌藥敏試驗的質(zhì)控大腸埃希菌ATCC35218用于β－內(nèi)酰胺酶抑制劑復合藥藥敏試驗的質(zhì)控

需氧菌藥敏試驗的標準菌株大腸埃希菌ATCC2592216苛養(yǎng)菌藥敏試驗質(zhì)控菌株流感嗜血桿菌ATCC49247/49766用于流感嗜血桿菌屬細菌藥敏試驗的質(zhì)控淋病奈瑟菌ATCC49226用于淋病奈瑟菌藥敏試驗的質(zhì)控肺炎鏈球菌ATCC49619用于肺炎鏈球菌及其它鏈球菌的藥敏試驗的質(zhì)控苛養(yǎng)菌藥敏試驗質(zhì)控菌株流感嗜血桿菌ATCC4924717質(zhì)控菌株可用三種方法保存

冷凍干燥冷凍冷藏質(zhì)控菌株可用三種方法保存冷凍干燥18質(zhì)控菌株的使用質(zhì)控菌株對藥物敏感性測試應按NCCLS規(guī)定的標準方法進行。使用與臨床分離株相同的抗微生物藥物。日常使用的質(zhì)控菌應放冰箱冷藏，每周移種。每月必須用冷凍菌株或凍干菌株作更換。不使用變異的菌株。質(zhì)控菌株的使用質(zhì)控菌株對藥物敏感性測試應按NCCLS規(guī)定的標19五、質(zhì)控方法與規(guī)定（一）建立藥敏質(zhì)控系統(tǒng)每種藥物/細菌組合的30個數(shù)據(jù)中，允許3個數(shù)據(jù)超出規(guī)定范圍。滿足上述要求可將質(zhì)控頻率改為每周一次。每周質(zhì)控時，如果有一個數(shù)據(jù)超標，要查找原因。5日數(shù)據(jù)在控表明找到原因。找不到原因時，應恢復每日質(zhì)控。在恢復每周質(zhì)控之前，應再有30日連續(xù)質(zhì)控數(shù)據(jù)。五、質(zhì)控方法與規(guī)定（一）建立藥敏質(zhì)控系統(tǒng)20質(zhì)控方法與規(guī)定（二）使用新批號的藥敏紙片、MH培養(yǎng)基、藥敏板條時應做質(zhì)控試驗。參加能力比對試驗時，應做質(zhì)控。檢測時應開展質(zhì)控：三級醫(yī)院每天做，二級醫(yī)院每周做。質(zhì)控方法與規(guī)定（二）使用新批號的藥敏紙片、MH培養(yǎng)基、藥敏板21抗微生物藥物敏感試驗的

質(zhì)量控制上海市臨床檢驗質(zhì)量控制中心婁崢抗微生物藥物敏感試驗的

質(zhì)量控制22抗微生物藥物敏感試驗分類

抗細菌的抗需氧菌的抗苛氧菌的抗厭氧菌的抗真菌的抗其它微生物的

抗微生物藥物敏感試驗分類抗細菌的23抗微生物藥物敏感試驗分類紙片法稀釋法儀器法E-test法分子生物學方法

抗微生物藥物敏感試驗分類紙片法24藥物敏感試驗影響因素操作步驟的規(guī)范性技術(shù)人員素質(zhì)

質(zhì)控菌株污染與變異0.5號麥氏標準管不勻或變質(zhì)細菌懸液的濃度

試驗用培養(yǎng)基、藥敏紙片，藥敏板條的質(zhì)量問題

錯誤的孵育時間、溫度或孵育氣體

結(jié)果判讀錯誤數(shù)據(jù)錄入時的抄寫錯誤藥物敏感試驗影響因素操作步驟的規(guī)范性25一、藥敏試驗操作規(guī)程

（1）方法名稱，原理，適用范圍實驗材料的規(guī)格（編號）、品牌、供應商操作步驟，注意事項，結(jié)果判斷標準，報告方式質(zhì)控方法，結(jié)果判斷標準，失控處理一、藥敏試驗操作規(guī)程（1）方法名稱，原理，適用范圍26藥敏試驗操作規(guī)程（2）用儀器開展藥敏試驗的要編寫使用儀器的操作規(guī)程用與儀器配套的藥敏試驗板條的要按照儀器商的規(guī)定編寫質(zhì)控方法和失控處理。編寫者，編寫日期科室負責人對該檢驗項目的認可簽字藥敏試驗操作規(guī)程（2）用儀器開展藥敏試驗的要編寫使用儀器的操27二、人員要求接受過病原微生物學方面的教育。具有臨床微生物檢驗相關(guān)理論和基本操作技能。掌握NCCLS制定的標準方法，按文件規(guī)定對結(jié)果作判斷、解釋。熟悉臨床微生物檢驗質(zhì)控理論和方法。二、人員要求接受過病原微生物學方面的教育。28三、儀器設(shè)備的質(zhì)控培養(yǎng)箱

二氧化碳培養(yǎng)箱冰箱每天觀察并作記錄儀器的質(zhì)控應按照制造商的要求定期進行三、儀器設(shè)備的質(zhì)控培養(yǎng)箱29四、檢驗材料的質(zhì)控培養(yǎng)基藥敏紙片藥敏板條0.5麥氏濁度標準管標準菌株四、檢驗材料的質(zhì)控培養(yǎng)基30培養(yǎng)基種類MH瓊脂：用于需氧菌藥敏試驗（紙片法和瓊脂稀釋法）調(diào)節(jié)好陽離子的MH肉湯：用于需氧菌藥敏試驗（肉湯稀釋法）HTM培養(yǎng)基：用于流感嗜血桿菌的藥敏試驗GC瓊脂：用于淋病奈瑟菌的藥敏試驗含5％脫纖維羊血的MH培養(yǎng)基：用于肺炎鏈球菌及其它鏈球菌的藥敏試驗（紙片法）添加馬血的陽離子調(diào)整過的MH肉湯：用于鏈球菌的藥敏試驗（稀釋法）培養(yǎng)基種類MH瓊脂：用于需氧菌藥敏試驗（紙片法和瓊脂稀釋法）31（一）培養(yǎng)基的質(zhì)量控制一般性狀無菌試驗培養(yǎng)基性能測試MH平板中胸腺嘧啶或胸腺嘧啶核苷含量的測定復方新諾明紙片-糞腸球菌（ATCC29212或33186）對二價陽離子含量的測定氨基糖苷類或四環(huán)素紙片-銅綠假單胞菌-鈣鎂離子頭孢碳烯類-細菌-鋅離子使用期限（一）培養(yǎng)基的質(zhì)量控制一般性狀32（二）藥敏紙片的質(zhì)控新批號藥敏紙片使用前用質(zhì)控菌株測試平時使用前1～2小時，從冰箱取出放室溫平衡低溫貯存-20℃保存：大量的，近期不用的性能不穩(wěn)定的：亞胺培南，頭孢克洛，克拉維酸復合劑4℃保存：少量的，正在使用的，性能穩(wěn)定的（二）藥敏紙片的質(zhì)控新批號藥敏紙片使用前用質(zhì)控菌株測試33（三）藥敏板條的質(zhì)控按照生產(chǎn)廠商的要求，定期對同一批號的藥敏板條進行質(zhì)控。更換批號時應作質(zhì)控。（三）藥敏板條的質(zhì)控按照生產(chǎn)廠商的要求，定期對同一批號的藥敏34（四）0.5麥氏濁度標準管的質(zhì)控

每月用分光光度計測吸光度，OD值應在0.08～0.10之間（四）0.5麥氏濁度標準管的質(zhì)控每月用分光光度計測吸光度35（五）標準菌株的質(zhì)控種類與應用范圍菌株的保存（五）標準菌株的質(zhì)控種類與應用范圍36需氧菌藥敏試驗的標準菌株大腸埃希菌ATCC25922用于腸桿菌科細菌、霍亂弧菌藥敏試驗的質(zhì)控金黃色葡萄球菌ATCC25923用于葡萄球菌屬或腸球菌屬細菌藥敏試驗的質(zhì)控（紙片法）金黃色葡萄球菌ATCC29213用于葡萄球菌屬細菌藥敏試驗的質(zhì)控（稀釋法）糞腸球菌ATCC29212用于腸球菌屬細菌藥敏試驗的質(zhì)控（稀釋法）銅綠假單胞菌ATCC27853用于銅綠假單胞菌和不動桿菌屬細菌藥敏試驗的質(zhì)控大腸埃希菌ATCC35218用于β－內(nèi)酰胺酶抑制劑復合藥藥敏試驗的質(zhì)控

需氧菌藥敏試驗的標準菌株大腸埃希菌ATCC2592237苛養(yǎng)菌藥敏試驗質(zhì)控菌株流感嗜血桿菌ATCC49247/49766用于流感嗜血桿菌屬細菌藥敏試驗的質(zhì)控淋病奈瑟菌ATCC49226用于淋病奈瑟菌藥敏試驗的質(zhì)控肺炎鏈球菌ATCC49619用于肺炎鏈球菌及其它鏈球菌的藥敏試驗的質(zhì)控苛養(yǎng)菌藥敏試驗質(zhì)控菌株流感嗜血桿菌ATCC4924738質(zhì)控菌株可用三種方法保存

冷凍干燥冷凍冷藏質(zhì)控菌株可用三種方法保存冷凍干燥39質(zhì)控菌株的使用質(zhì)控菌株對藥物敏感性測試應按NCCLS規(guī)定的標準方法進行。使用與臨床分離株相同的抗微生物藥物。日常使用的質(zhì)控菌應放冰箱冷藏，每周移種。每月必須用冷凍菌株或凍干菌株作更換。不使用變異的菌株。質(zhì)控菌株的使用質(zhì)控菌株對藥物敏感性測試應按NCCLS規(guī)定的標40五、質(zhì)控方法與規(guī)定（一）建立藥敏質(zhì)控系統(tǒng)每種藥物/細菌組合的30個數(shù)據(jù)中，允