肝炎病毒核酸檢測及臨床診療最新進展演示文稿第一頁，共二十四頁。（優選）肝炎病毒核酸檢測及臨床診療最新進展第二頁，共二十四頁。目錄Part1肝病PCR檢測國內外需求及現狀Part2肝病PCR檢測最新解決方案Part3肝病PCR檢測的發展趨勢第三頁，共二十四頁。國際需求2008年美國肝病協會CHB防治指南：持久消除HBV是乙肝的治療終點，HBVDNA病毒載量盡可能小于或等于10IU/ml。第四頁，共二十四頁。國際需求歐洲肝病研究學會EASL2010年指南指出：將HBVDNA病毒載量盡可能控制在10-15IU/ml，能有效防止疾病的復發。歐洲肝病研究學會EASL2011指南指出：丙肝患者治療的目標需HCVRNA病毒載量低于50IU/ml。第五頁，共二十四頁。（一）核苷(酸)類似物治療慢性乙肝路線圖

治療第12周評估原發性治療失敗HBV-DNA水平較基線水平下降幅度<1log/ml開始治療HBV-DNA基線水平監測病毒學完全應答HBV-DNA<60IU/ml繼續治療監測HBV-DNA/6個月病毒學部分應答HBV-DNA:60~2000IU/ml增加藥物治療監測HBV-DNA/3個月病毒學不充分應答HBV-DNA>2000IU/ml增加/更換有效的藥物治療監測HBV-DNA/6個月治療第24周評估抗病毒療效的早期預測因子60IU/ml如何檢測？國際治療路線*由美國坦福大學醫學中心Keeffe教授（專家組）提供第六頁，共二十四頁。國內行業指導原則國家SFDA技術審評中心“863”課題《HBVDNA定量試劑技術審評指導原則》中指出：HBVDNA建議最低檢測限應≤30IU/mL。DNA提取純化方法不建議采用煮沸法進行DNA提取。第七頁，共二十四頁。國內行業標準內標全程參與！核酸上樣量≥20ul！第八頁，共二十四頁。國內現狀加熱煮沸高速離心過柱吸附

陳舊的技術繁瑣的過程第九頁，共二十四頁。國內現狀國內HBVDNA檢測方法多為煮沸法，試劑靈敏度均為500IU/ml或1000IU/ml。國內大部分HCVRNA檢測方法多為柱提法，試劑靈敏度≥1000IU/ml。令人揪心的性能第十頁，共二十四頁。專家呼吁五種乙型肝炎病毒核酸熒光定量檢測試劑盒的比較,中華傳染病雜志，2009年第3期——吳星,黃維金,周誠,莊輝等(中國藥品生物制品檢定所,北京大學醫學部)國家“十一五”科技重大專項“乙型和丙型病毒性肝炎診斷及臨床監測的研究”——魯鳳民教授北京大學肝炎試劑研究中心專家呼吁：高精度，超敏感的核酸診斷試劑的開發是目前肝炎診療中的關鍵步驟！第十一頁，共二十四頁。何去何從面對當前肝病毒核酸檢測技術的現狀，我們真沒有辦法了嗎？第十二頁，共二十四頁。解決方案Part1肝病PCR檢測國內外需求及現狀Part2肝病PCR檢測最新解決方案Part3肝病PCR檢測的發展趨勢第十三頁，共二十四頁。臨床核酸提取技術的發展：煮沸法酚氯仿法旋轉離心柱法玻璃粉吸附法二氧化硅吸附法磁珠法國內主流方法國際主流方法核酸檢測發展要求第十四頁，共二十四頁。核酸檢測發展要求高精度高品質高科技第十五頁，共二十四頁。磁珠法技術磁珠（電子顯微鏡）磁珠分離器磁珠法----核酸診斷領域新方向。第十六頁，共二十四頁。技術原理DNA磁珠與DNA的結合----通過超順磁性顆粒富集核酸，實現樣品高純度、高靈敏度的檢測。原理第十七頁，共二十四頁。技術性能磁珠法提取核酸效率高，純度高，特異性好。采用最新一代的磁珠提取核酸技術，無需加熱、無需高速離心、靈敏度極高，能夠很好的滿足臨床診療的需求。抗干擾能力強，能勝任高血脂、強溶血以及藥物治療標本的檢測，是臨床疾病檢測的有力手段。極易實現自動化。第十八頁，共二十四頁。

靈敏度可達10IU/ml，是國產主流試劑的50-100倍；準確定量線性范圍為20IU/ml～2.0×109IU/ml

可檢測HBVA、B、C、D、E、F、G、H共8個基因型。設置了監控內標IC,有效避免假陰性。設置內參比熒光ROX，定量更準確。以湖南圣湘乙肝磁珠法為例臨床驗證和對比第十九頁，共二十四頁。臨床驗證和對比以湖南圣湘乙肝磁珠法為例*9例定值在12~50IU/ml之間圣湘磁珠法技術在靈敏度方面存在明顯優勢，與進口試劑具有很好的一致性，能夠很好的勝任臨床藥物療效的觀察和治療終點的確定。Sansure-HBV：圣湘HBV磁珠法Roche-HBV：羅氏

AmpliPrep-CobasTaqManHBVTestX-HBV：國內一家上市公司的HBV產品（濃縮煮沸法）第二十頁，共二十四頁。發展趨勢Part1肝病PCR檢測國內外需求及現狀Part2肝病PCR檢測最新解決方案Part3肝病PCR檢測的發展趨勢第二十一頁，共二十四頁。發展趨勢（25×33+288÷3）×15=？簡單化的要求第二十二頁，共二十四頁。發展趨勢

一步法技術：最簡便的PCR技術一步操作即可實現核酸提取。第二十三頁