技術(shù)指導(dǎo)原則之

化學(xué)藥物質(zhì)量控制分析方法驗(yàn)證劉瑞錦2011年10月第1頁(yè)，共24頁(yè)。幾個(gè)問(wèn)題為什么要進(jìn)行方法學(xué)驗(yàn)證？方法驗(yàn)證主要包括那幾個(gè)方面？需要進(jìn)行驗(yàn)證的檢測(cè)項(xiàng)目主要有哪些？一般有哪些驗(yàn)證內(nèi)容？第2頁(yè)，共24頁(yè)。主要內(nèi)容方法驗(yàn)證的概念1方法驗(yàn)證的主要方面2方法的具體內(nèi)容3審評(píng)關(guān)注點(diǎn)4第3頁(yè)，共24頁(yè)。一、方法驗(yàn)證的概念對(duì)所采用的分析方法的科學(xué)性、準(zhǔn)確性和可行性進(jìn)行驗(yàn)證，以充分表明分析方法符合測(cè)試項(xiàng)目的目的和要求。

根據(jù)檢測(cè)項(xiàng)目的要求，預(yù)先設(shè)置一定的驗(yàn)證內(nèi)容，并通過(guò)設(shè)計(jì)合理的試驗(yàn)來(lái)驗(yàn)證所采用的分析方法能否符合檢測(cè)項(xiàng)目的要求。開(kāi)發(fā)部指導(dǎo)原則培訓(xùn)系列第4頁(yè)，共24頁(yè)。

1每個(gè)檢測(cè)項(xiàng)目采用的分析方法，均需要進(jìn)行方法驗(yàn)證2方法驗(yàn)證的內(nèi)容應(yīng)根據(jù)檢測(cè)項(xiàng)目的要求，結(jié)合所采用分析方法的特點(diǎn)確定3同一分析方法用于不同的檢測(cè)項(xiàng)目會(huì)有不同的驗(yàn)證要求。一、方法驗(yàn)證的概念一般原則第5頁(yè)，共24頁(yè)。

開(kāi)發(fā)部指導(dǎo)原則培訓(xùn)系列鑒別雜質(zhì)定量專(zhuān)屬性準(zhǔn)確度定量限專(zhuān)屬性第6頁(yè)，共24頁(yè)。

開(kāi)發(fā)部指導(dǎo)原則培訓(xùn)系列一、方法驗(yàn)證的概念專(zhuān)屬性：指在其他成分（如雜質(zhì)、降解物、輔料等）能存在下，采用的分析方法能夠正確鑒定、檢出被分析物質(zhì)的特性。線性：在設(shè)計(jì)的測(cè)定范圍內(nèi)，檢測(cè)結(jié)果與供試品中被分析物的濃度（量）直接呈線性關(guān)系的程度準(zhǔn)確度：用該方法測(cè)定的結(jié)果與真實(shí)值或認(rèn)可的參考值之間接近的程度。有時(shí)也稱(chēng)真實(shí)度。精密度：在規(guī)定的測(cè)試條件下，同一均質(zhì)供試品，經(jīng)多次取樣進(jìn)行一系列檢測(cè)所得結(jié)果之間的接近程度。檢測(cè)限：試樣中的被分析物能夠被檢測(cè)到的最低量，但不一定要準(zhǔn)確定量。名詞定義定量限：試樣中的被分析物能夠被定量測(cè)定的最低量第7頁(yè)，共24頁(yè)。1、需要驗(yàn)證的檢測(cè)項(xiàng)目開(kāi)發(fā)部指導(dǎo)原則培訓(xùn)系列二、方法驗(yàn)證的主要方面鑒別，專(zhuān)屬性最重要雜質(zhì)檢查：包括限度試驗(yàn)和定量試驗(yàn)定量測(cè)定：包括專(zhuān)含量測(cè)定、溶出度、釋放度等其他特定檢測(cè)項(xiàng)目第8頁(yè)，共24頁(yè)。

開(kāi)發(fā)部指導(dǎo)原則培訓(xùn)系列2、分析方法

為完成上述各檢測(cè)項(xiàng)目而設(shè)定和建立的測(cè)試方法，一般包括分析方法原理、儀器及儀器參數(shù)、試劑、系統(tǒng)適用性試驗(yàn)、供試品溶液制備、對(duì)照品溶液制備、測(cè)定、計(jì)算及測(cè)試結(jié)果的報(bào)告等。測(cè)試方法可采用化學(xué)分析方法和儀器分析方法。這些方法各有特點(diǎn)，同一測(cè)試方法可用于不同的檢測(cè)項(xiàng)目，但驗(yàn)證內(nèi)容可不相同。3、驗(yàn)證內(nèi)容

驗(yàn)證內(nèi)容包括方法的專(zhuān)屬性、線性、范圍、準(zhǔn)確度、精密度、檢測(cè)限、定量限、耐用性和系統(tǒng)適用性二、方法驗(yàn)證的主要方面第9頁(yè)，共24頁(yè)。

開(kāi)發(fā)部指導(dǎo)原則培訓(xùn)系列三、方法驗(yàn)證的具體內(nèi)容鑒別：證明能與可能共存的物質(zhì)或結(jié)構(gòu)相似化合物區(qū)分，需確證含被分析物的供試品呈正反應(yīng)（如，阿卡波糖顯色反應(yīng)，鈉鹽焰色反應(yīng)）雜質(zhì)檢查：向供試品中加入一定量的雜質(zhì)強(qiáng)光照射，高溫，高濕，酸、堿水解及氧化破壞含量測(cè)定：在供試品中加入雜質(zhì)或輔料，考察測(cè)定結(jié)果是否受干擾，并與未加的供試品比較結(jié)果；采用破壞性試驗(yàn)（強(qiáng)光照射，高溫，高濕，酸、堿水解及氧化），得到含有雜質(zhì)或降解產(chǎn)物的試樣專(zhuān)屬性第10頁(yè)，共24頁(yè)。

開(kāi)發(fā)部指導(dǎo)原則培訓(xùn)系列三、方法驗(yàn)證的具體內(nèi)容線性涉及定量測(cè)定的項(xiàng)目，如雜質(zhì)定量試驗(yàn)和含量測(cè)定均需驗(yàn)證。應(yīng)在設(shè)計(jì)的測(cè)定范圍內(nèi)測(cè)定線性關(guān)系。至少制備5個(gè)濃度。（頭孢呋辛酯顆粒發(fā)補(bǔ)）第11頁(yè)，共24頁(yè)。

開(kāi)發(fā)部指導(dǎo)原則培訓(xùn)系列范圍范圍系指能夠達(dá)到一定的準(zhǔn)確度、精密度和線性，測(cè)試方法適用的試樣中被分析物高低限濃度或量的區(qū)間。三、方法驗(yàn)證的具體內(nèi)容第12頁(yè)，共24頁(yè)。用標(biāo)準(zhǔn)偏差或相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差表示時(shí)，取樣測(cè)定次數(shù)應(yīng)至少6次。精密度可以從三個(gè)層次考察：重復(fù)性、中間精密度、重現(xiàn)性。重復(fù)性測(cè)定可在規(guī)定范圍內(nèi)，至少用9次測(cè)定結(jié)果進(jìn)行評(píng)價(jià)

開(kāi)發(fā)部指導(dǎo)原則培訓(xùn)系列三、方法驗(yàn)證的具體內(nèi)容在規(guī)定范圍內(nèi)，制備3個(gè)不同濃度的試樣，各測(cè)定3次，報(bào)告已知加入量的回收率或測(cè)定結(jié)果平均值與真實(shí)值之差及其可信限。準(zhǔn)確度精密度第13頁(yè)，共24頁(yè)。檢測(cè)限定量限以能準(zhǔn)確、可靠檢測(cè)被測(cè)物的最小量或最低濃度來(lái)建立。信噪比為3：1時(shí)相應(yīng)的濃度確定檢測(cè)限直觀法信噪比法含有已知濃度被測(cè)物的試樣進(jìn)行分析，在準(zhǔn)確度和精密度都符合要求時(shí)確定信噪比為10：1時(shí)相應(yīng)濃度確定

三、方法驗(yàn)證的具體內(nèi)容第14頁(yè)，共24頁(yè)。對(duì)一些儀器分析方法，在進(jìn)行方法驗(yàn)證時(shí)，有必要將分析設(shè)備、電子儀器與實(shí)驗(yàn)操作、測(cè)試樣品等一起當(dāng)作完整的系統(tǒng)進(jìn)行評(píng)估。所有色譜方法均應(yīng)進(jìn)行該指標(biāo)驗(yàn)證，并將系統(tǒng)適用性作為分析方法的組成部分。

開(kāi)發(fā)部指導(dǎo)原則培訓(xùn)系列三、方法驗(yàn)證的具體內(nèi)容指測(cè)定條件發(fā)生小的變動(dòng)時(shí)，測(cè)定結(jié)果不受影響的承受程度。經(jīng)試驗(yàn)，應(yīng)說(shuō)明小的變動(dòng)（如流速、PH）能否符合系統(tǒng)適用性試驗(yàn)要求，以確保方法有效。耐用性系統(tǒng)適用性第15頁(yè)，共24頁(yè)。

開(kāi)發(fā)部指導(dǎo)原則培訓(xùn)系列三、方法驗(yàn)證的具體內(nèi)容方法再驗(yàn)證原料藥合成工藝改變、制劑處方改變、分析方法發(fā)生部分改變等，均有必要對(duì)分析方法再次進(jìn)行全面或部分驗(yàn)證，以保證分析方法可靠。再驗(yàn)證原則：根據(jù)改變的程度進(jìn)行相應(yīng)的再驗(yàn)證。已有國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)的藥品質(zhì)量研究中，基于申報(bào)的原料藥合成工藝、制劑處方中的輔料等一般無(wú)法保證與已上市藥品的一致性，需對(duì)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中部分項(xiàng)目進(jìn)行方法的再驗(yàn)證。第16頁(yè)，共24頁(yè)。幾個(gè)問(wèn)題為什么要進(jìn)行方法學(xué)驗(yàn)證？方法驗(yàn)證主要包括那幾個(gè)方面？需要進(jìn)行驗(yàn)證的檢測(cè)項(xiàng)目主要有哪些？一般有哪些驗(yàn)證內(nèi)容？第17頁(yè)，共24頁(yè)。

開(kāi)發(fā)部指導(dǎo)原則培訓(xùn)系列三、方法驗(yàn)證的具體內(nèi)容鑒別雜質(zhì)測(cè)定定量測(cè)定雜質(zhì)限度雜質(zhì)定量專(zhuān)屬性線性范圍準(zhǔn)確度精密度檢測(cè)限定量限耐用性√√√√√√√√√√√√√√√√√√以下檢測(cè)項(xiàng)目需要做哪些驗(yàn)證內(nèi)容？第18頁(yè)，共24頁(yè)。

開(kāi)發(fā)部指導(dǎo)原則培訓(xùn)系列四、審評(píng)關(guān)注點(diǎn)關(guān)于鑒別由于一種分析方法基于被分析物的某一特定基團(tuán)或某一特定結(jié)構(gòu),因此通常采用2種或以上分析方法,而且采用不同原理的分析方法作為鑒別項(xiàng),以加強(qiáng)鑒別項(xiàng)目的整體專(zhuān)屬性。鑒別方法設(shè)置不全面忽視仿制藥鑒別項(xiàng)分析方法的專(zhuān)屬性驗(yàn)證如不考察由于輔料不同可能對(duì)主藥鑒別帶來(lái)的負(fù)面影響,不提供空白輔料的干擾試驗(yàn)資料,無(wú)法判斷鑒別方法的專(zhuān)屬性。第19頁(yè)，共24頁(yè)。

開(kāi)發(fā)部指導(dǎo)原則培訓(xùn)系列關(guān)于雜質(zhì)檢查四、審評(píng)關(guān)注點(diǎn)存在的問(wèn)題:①未能對(duì)原料藥合成工藝中涉及到的起始原料、中間體、聚合物、副產(chǎn)物等全面地進(jìn)行與主藥的分離度試驗(yàn),往往僅是做了一部分可獲得的雜質(zhì)與主藥之間的分離度實(shí)驗(yàn)。②忽視提供起始原料、中間體、聚合物、副產(chǎn)物等可獲得雜質(zhì)的最低檢測(cè)限,無(wú)法判斷在現(xiàn)有的檢測(cè)條件和方法下能否檢出主藥中的雜質(zhì)。③破壞性試驗(yàn)不規(guī)范：體現(xiàn)在試驗(yàn)條件的確定,降解產(chǎn)物的檢測(cè)、分離度的確定等方面。④用原料藥的破壞性試驗(yàn)結(jié)果作為制劑的破壞性試驗(yàn)資料,忽視了輔料在劇烈條件下降解可能帶來(lái)的干擾和影響。⑤未提供空白輔料的實(shí)驗(yàn)圖譜和結(jié)果,無(wú)法判斷輔料是否干擾。當(dāng)輔料對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果存在干擾時(shí),未能采取有效方法排除其干擾。⑥色譜圖中主峰出現(xiàn)明顯的其他雜質(zhì)峰,未優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件。第20頁(yè)，共24頁(yè)。

開(kāi)發(fā)部指導(dǎo)原則培訓(xùn)系列關(guān)于定量測(cè)定四、審評(píng)關(guān)注點(diǎn)1驗(yàn)證的內(nèi)容不全面,忽視部分驗(yàn)證內(nèi)容,如耐用性、樣品溶液穩(wěn)定性等分析方法驗(yàn)證資料。2準(zhǔn)確度的實(shí)驗(yàn)內(nèi)容不規(guī)范,未按要求在規(guī)定的范圍內(nèi),設(shè)計(jì)3個(gè)不同濃度,每個(gè)濃度各分別制備3份供試品溶液進(jìn)行測(cè)定。未能按四位有效數(shù).字提供準(zhǔn)確度測(cè)定結(jié)果。3樣品的測(cè)定濃度不在驗(yàn)證的范圍之內(nèi)。4樣品溶出量或釋放量的測(cè)定,通常采用含量測(cè)定方法,但有時(shí)也不完全一致。當(dāng)不一致時(shí),未重新提供溶出量或釋放量測(cè)定方法的驗(yàn)證資料。第21頁(yè)，共24頁(yè)。

開(kāi)發(fā)部指導(dǎo)原則培訓(xùn)系列項(xiàng)目名稱(chēng)階段發(fā)補(bǔ)日期內(nèi)容頭孢克肟干混懸劑臨床2009.6.21、質(zhì)量研究和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)：（1）有關(guān)物質(zhì)：建議對(duì)方法和樣品做如下研究：所附有關(guān)物質(zhì)方法學(xué)研究圖譜顯示輔料在該色譜條件下有色譜峰出現(xiàn)，干擾有關(guān)物質(zhì)測(cè)定結(jié)果。建議優(yōu)化色譜條件，消除輔料對(duì)有關(guān)物質(zhì)檢測(cè)的干擾，將記錄色譜圖時(shí)間延長(zhǎng)至主峰保留時(shí)間的3倍。此外，采用列表形式，用LC/MS或其他合適的方法，盡量采用原發(fā)企業(yè)進(jìn)口品或者進(jìn)口相同給藥途徑不同劑型品種，進(jìn)行雜質(zhì)種類(lèi)和含量的比較分析，提供相應(yīng)的研究資料和圖譜，并將其訂入標(biāo)準(zhǔn)；（2）聚合物：進(jìn)行聚合物研究，并結(jié)合臨床使用的水溫進(jìn)行研究；注射用頭孢美唑鈉生產(chǎn)2010.12.29

1、建議對(duì)特定雜質(zhì)N-甲巰基四唑含量進(jìn)行限定，進(jìn)一步嚴(yán)格標(biāo)準(zhǔn)，增加該已知雜質(zhì)限度；

2、建議參考上市品種情況，適當(dāng)提高聚合物限度要求；

頭孢地嗪生產(chǎn)2011.1.111、有關(guān)物質(zhì)：采用國(guó)外原研企業(yè)或ICH成員國(guó)上市產(chǎn)品為參比制劑，對(duì)雜質(zhì)種類(lèi)和含量進(jìn)行系統(tǒng)比較研究。

2、參考國(guó)外原研企業(yè)或ICH成員國(guó)上市產(chǎn)品聚合物的詳細(xì)比較基礎(chǔ)上，制定合適限度；

3、將異常毒性檢查項(xiàng)訂入質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)頭孢特侖新戊酯膠囊生產(chǎn)2009.113非書(shū)面發(fā)補(bǔ):

質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中控制為單個(gè)雜質(zhì)不超過(guò)4.0%，總雜質(zhì)不超過(guò)6.5%，該限度要求相對(duì)偏低，建議參照國(guó)外藥典要求，提高雜質(zhì)限度要求，并對(duì)已知雜質(zhì)在標(biāo)準(zhǔn)中進(jìn)行控制。請(qǐng)?zhí)峁┩晟坪蟮馁|(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。頭孢呋辛酯顆粒生產(chǎn)2009.12.31、未對(duì)最大雜質(zhì)作詳細(xì)研究，和對(duì)比研究。請(qǐng)以進(jìn)口干混懸劑為對(duì)照，對(duì)雜質(zhì)種類(lèi)和含量進(jìn)行系統(tǒng)比較研究，說(shuō)明本品和上市干混懸劑質(zhì)量一致；

我公司質(zhì)量研究發(fā)補(bǔ)情況CDE對(duì)雜質(zhì)分析的要求越來(lái)越高第22頁(yè)，共24頁(yè)。ThankYou!

第23頁(yè)，共24頁(yè)。內(nèi)容梗概技術(shù)指導(dǎo)原則之

化學(xué)藥物質(zhì)量控制分析方法驗(yàn)證。方法驗(yàn)證的內(nèi)容應(yīng)根據(jù)檢測(cè)項(xiàng)目的要求，結(jié)合所采用分析方法的特點(diǎn)確定。同一分析方法用于不同的檢測(cè)項(xiàng)目會(huì)有不同的驗(yàn)證要求。線性：在設(shè)計(jì)的測(cè)定范圍內(nèi)，檢測(cè)結(jié)果與供試品中被分析物的濃度（量）直接呈線性關(guān)系的程度。準(zhǔn)確度：用該方法測(cè)定的結(jié)果與真實(shí)值或認(rèn)可的參考值之間接近的程度。檢測(cè)限：試樣中的被分析物能夠被檢測(cè)到的最低量，但不一定要準(zhǔn)確定量。雜質(zhì)檢查：包括限度試驗(yàn)和定量試驗(yàn)。這些方法各有特點(diǎn)，同一測(cè)試方法可用于不同的檢測(cè)項(xiàng)目，但驗(yàn)證內(nèi)容可不相同。雜質(zhì)檢查：向供試品中加入一定量的雜質(zhì)。涉及定量測(cè)定的項(xiàng)目，如雜質(zhì)定量試驗(yàn)和含。