酶聯免疫吸附試驗（ELISA）酶聯免疫吸附試驗（ELISA）目錄一、二、三、四、酶聯免疫吸附試驗（ELISA）概述酶聯免疫吸附試驗（ELISA）應用場景酶聯免疫吸附試驗（ELISA）操作流程全自動酶免工作站目錄一、酶聯免疫吸附試驗（ELISA）概述酶聯免疫吸附試驗（一、酶聯免疫吸附試驗（ELISA）概述基本概念：

抗原：抗原是指進入人或動物機體后，可刺激機體免疫系統發生免疫應答，從而引起動物產生抗體或形成致敏淋巴細胞，并能和抗體或致敏淋巴細胞發生特異性反應的物質。

抗體：是由抗原刺激動物的免疫系統后，由免疫系統產生分泌的能和相應抗原發生特異性結合的免疫球蛋白。

酶結合物：酶與抗體或抗原、半抗原在交聯劑作用下聯結的產物,它不僅具有抗體抗原特異的免疫反應，還能催化酶促反應，顯示出生物放大作用。一、酶聯免疫吸附試驗（ELISA）概述基本概念：一、酶聯免疫吸附試驗（ELISA）概述酶聯免疫吸附試驗，簡稱ELISA，是實驗室最常用的檢測方法。酶是能夠催化化學反應的特殊蛋白質，其催化效力超過目前所有人造催化劑。ELISA是將酶催化的放大作用與特異性抗原抗體反應結合起來的一種微量分析技術。酶標記抗原或抗體以后，既不影響抗原抗體反應的特異性，也不改變酶本身的活性。因此ELISA具有準確性高、檢測時間短、價格低廉、判斷結果有客觀標準、結果便于記錄和保存等優點，適合于大批標本的檢測，廣泛應用于食品安全檢測、醫療檢測以及免疫實驗分析等領域。一、酶聯免疫吸附試驗（ELISA）概述酶聯免疫吸附試

一、酶聯免疫吸附試驗（ELISA）概述基本原理：抗原抗體的特異性結合以及抗原或抗體的酶標記。

一、酶聯免疫吸附試驗（ELISA）

一、酶聯免疫吸附試驗（ELISA）概述酶結合物與相應抗原或抗體結合后，可根據加入底物的顏色反應來判定是否有免疫反應的存在，而且顏色反應的深淺是與標本中相應抗原或抗體的量成正比例的，可根據已知濃度的抗原或抗體的顏色反應的深淺繪制標準曲線并依此計算出未知樣品中抗體或抗原的濃度。

測定對象：可以是抗原也可以是抗體。

一、酶聯免疫吸附試驗（ELISA）概述二、酶聯免疫吸附試驗（ELISA）應用場景

1、食品、飼料：

農藥殘留（有機磷農藥、氨基甲酸酯類農藥）、獸藥殘留（青霉素、氯霉素、慶大霉素等）、添加劑（三聚氰胺、瘦肉精、孔雀石綠等）、真菌毒素檢測（黃曲霉毒素、赤霉烯酮、嘔吐毒素等）、微生物檢測（如金黃色葡萄球菌菌體細胞中的蛋白A等），等等；2、醫療衛生：檢驗科、腫瘤科、婦科、兒科、疾控中心、傳染病醫院、體檢中心、腫瘤醫院等（乙肝兩對半、甲（丙、丁、戊）型肝炎抗體、梅毒、艾滋病甲胎蛋白、性激素六項等）。3、畜牧行業：豬口蹄疫、豬藍耳病、禽流感H5N1抗體、雞傳染性貧血；

二、酶聯免疫吸附試驗（ELISA）應用場景1、食品、飼料三、酶聯免疫吸附試驗（ELISA）操作流程試驗流程：樣品、標準品以及試劑準備加樣孵育洗板顯色比色結果分析三、酶聯免疫吸附試驗（ELISA）操作流程試驗流程：樣品、標三、酶聯免疫吸附試驗（ELISA）操作流程例：飼料中黃曲霉毒素B1的檢測：樣品、標準品以及試劑準備加樣(標準品/樣品，酶結合物）孵育，洗板加入底物溶液A、B加入終止液吸光度測量結果分析粉碎稱量提?。ㄕ袷?、離心）樣品稀釋，待測黃曲霉毒素B1酶聯免疫試劑盒：冰箱取出，平衡至室溫（藥品冷藏箱（2~8℃））孵育三、酶聯免疫吸附試驗（ELISA）操作流程例：飼料中黃曲霉毒三、酶聯免疫吸附試驗（ELISA）操作流程天平粉碎機電動振蕩器離心機移液器例：飼料中黃曲霉毒素B1的檢測三、酶聯免疫吸附試驗（ELISA）操作流程天平粉碎機電動振蕩三、酶聯免疫吸附試驗（ELISA）操作流程飼料中黃曲霉毒素B1的檢測：樣品、標準品以及試劑準備加樣(標準品/樣品，酶標試劑）孵育，洗板加入底物溶液A、B加入終止液光密度（OD）測量結果分析三、酶聯免疫吸附試驗（ELISA）操作流程飼料中黃曲霉毒素B三、酶聯免疫吸附試驗（ELISA）操作流程飼料中黃曲霉毒素B1的檢測：樣品、標準品以及試劑準備加樣(標準品/樣品，酶標試劑）孵育，洗板加入底物溶液A、B加入終止液光密度（OD）測量結果分析Or37℃孵育三、酶聯免疫吸附試驗（ELISA）操作流程飼料中黃曲霉毒素B三、酶聯免疫吸附試驗（ELISA）操作流程飼料中黃曲霉毒素B1的檢測：樣品、標準品以及試劑準備加樣(標準品/樣品，酶標試劑）孵育，洗板加入底物溶液A、B加入終止液光密度（OD）測量結果分析孵育三、酶聯免疫吸附試驗（ELISA）操作流程飼料中黃曲霉毒素B三、酶聯免疫吸附試驗（ELISA）操作流程飼料中黃曲霉毒素B1的檢測：樣品、標準品以及試劑準備加樣(標準品/樣品，酶標試劑）孵育，洗板加入底物溶液A、B加入終止液光密度（OD）測量結果分析孵育三、酶聯免疫吸附試驗（ELISA）操作流程飼料中黃曲霉毒素B三、酶聯免疫吸附試驗（ELISA）操作流程飼料中黃曲霉毒素B1的檢測：樣品、標準品以及試劑準備加樣(標準品/樣品，酶標試劑）孵育，洗板加入底物溶液A、B加入終止液光密度（OD）測量結果分析孵育三、酶聯免疫吸附試驗（ELISA）操作流程飼料中黃曲霉毒素B三、酶聯免疫吸附試驗（ELISA）操作流程飼料中黃曲霉毒素B1的檢測：樣品、標準品以及試劑準備加樣(標準品/樣品，酶標試劑）孵育，洗板加入底物溶液A、B加入終止液光密度（OD）測量結果分析孵育三、酶聯免疫吸附試驗（ELISA）操作流程飼料中黃曲霉毒素B三、酶聯免疫吸附試驗（ELISA）操作流程ELISA的比色測定主要由酶標儀進行。此處強調以下幾點：（1）酶標儀不應安置在陽光或強光照射下，室溫宜在15－30℃，使用前先預熱儀器15－30分鐘，測讀結果更穩定。各種酶標儀性能不同，使用前應詳細閱讀說明書。（2）比色前應先用潔凈的吸水紙拭干板底附著的液體，然后將板正確放入比色架中，以免銹蝕酶標儀比色架。（3）比色測定時，一定要注意酶標儀的波長是否已調至合適或所用濾光片是否正確。三、酶聯免疫吸附試驗（ELISA）操作流程

三、酶聯免疫吸附試驗（ELISA）操作流程單波長或雙波長比色選擇的問題：所謂的單波長比色即是通常的以對顯色具有最大吸收的波長如450nm或492nm進行比色測定；而雙波長比色則在敏感波長如450nm和非敏感波長如630nm下各測定一次，最后酶標儀給出的數值為敏感波長下的吸光度值與非敏感波長下的吸光度值的差值。因此，雙波長比色測定具有能排除由微孔板本身、板孔內標本的非特異性吸收、指紋、刮痕、灰塵等對特異顯色干擾的優點。

三、酶聯免疫吸附試驗（ELISA）操作流程單波長或雙

四、全自動酶免工作站

1、加樣模塊2、孵育模塊3、洗板模塊4、讀數模塊5、控制模塊（軟件）全自動--從加樣、孵育、洗滌到數據處理打印報告都由儀器自動完成；無污染--直接使用原樣本試管和原試劑瓶，消除生物污染和試劑污染；

高效率--一次性處理樣本量大；醫院計生站疾控中心

四、全自動酶免工作站

四、全自動酶免工作站使用全自動酶免可以：*提高加標本速度與效率*減少操作人員勞動強度*使標本傳染操作人員機會最小化*通過減少人為失誤和改善加樣精確度與準確性來改善檢測分析質量；*采用批量（batch）或隨機（randomaccess）進行多種組合與多種模式檢測

四、全自動酶免工作站謝謝！謝謝！

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抗原：抗原是指進入人或動物機體后，可刺激機體免疫系統發生免疫應答，從而引起動物產生抗體或形成致敏淋巴細胞，并能和抗體或致敏淋巴細胞發生特異性反應的物質。

抗體：是由抗原刺激動物的免疫系統后，由免疫系統產生分泌的能和相應抗原發生特異性結合的免疫球蛋白。

酶結合物：酶與抗體或抗原、半抗原在交聯劑作用下聯結的產物,它不僅具有抗體抗原特異的免疫反應，還能催化酶促反應，顯示出生物放大作用。一、酶聯免疫吸附試驗（ELISA）概述基本概念：一、酶聯免疫吸附試驗（ELISA）概述酶聯免疫吸附試驗，簡稱ELISA，是實驗室最常用的檢測方法。酶是能夠催化化學反應的特殊蛋白質，其催化效力超過目前所有人造催化劑。ELISA是將酶催化的放大作用與特異性抗原抗體反應結合起來的一種微量分析技術。酶標記抗原或抗體以后，既不影響抗原抗體反應的特異性，也不改變酶本身的活性。因此ELISA具有準確性高、檢測時間短、價格低廉、判斷結果有客觀標準、結果便于記錄和保存等優點，適合于大批標本的檢測，廣泛應用于食品安全檢測、醫療檢測以及免疫實驗分析等領域。一、酶聯免疫吸附試驗（ELISA）概述酶聯免疫吸附試

一、酶聯免疫吸附試驗（ELISA）概述基本原理：抗原抗體的特異性結合以及抗原或抗體的酶標記。

一、酶聯免疫吸附試驗（ELISA）

一、酶聯免疫吸附試驗（ELISA）概述酶結合物與相應抗原或抗體結合后，可根據加入底物的顏色反應來判定是否有免疫反應的存在，而且顏色反應的深淺是與標本中相應抗原或抗體的量成正比例的，可根據已知濃度的抗原或抗體的顏色反應的深淺繪制標準曲線并依此計算出未知樣品中抗體或抗原的濃度。

測定對象：可以是抗原也可以是抗體。

一、酶聯免疫吸附試驗（ELISA）概述二、酶聯免疫吸附試驗（ELISA）應用場景

1、食品、飼料：

農藥殘留（有機磷農藥、氨基甲酸酯類農藥）、獸藥殘留（青霉素、氯霉素、慶大霉素等）、添加劑（三聚氰胺、瘦肉精、孔雀石綠等）、真菌毒素檢測（黃曲霉毒素、赤霉烯酮、嘔吐毒素等）、微生物檢測（如金黃色葡萄球菌菌體細胞中的蛋白A等），等等；2、醫療衛生：檢驗科、腫瘤科、婦科、兒科、疾控中心、傳染病醫院、體檢中心、腫瘤醫院等（乙肝兩對半、甲（丙、丁、戊）型肝炎抗體、梅毒、艾滋病甲胎蛋白、性激素六項等）。3、畜牧行業：豬口蹄疫、豬藍耳病、禽流感H5N1抗體、雞傳染性貧血；

二、酶聯免疫吸附試驗（ELISA）應用場景1、食品、飼料三、酶聯免疫吸附試驗（ELISA）操作流程試驗流程：樣品、標準品以及試劑準備加樣孵育洗板顯色比色結果分析三、酶聯免疫吸附試驗（ELISA）操作流程試驗流程：樣品、標三、酶聯免疫吸附試驗（ELISA）操作流程例：飼料中黃曲霉毒素B1的檢測：樣品、標準品以及試劑準備加樣(標準品/樣品，酶結合物）孵育，洗板加入底物溶液A、B加入終止液吸光度測量結果分析粉碎稱量提?。ㄕ袷?、離心）樣品稀釋，待測黃曲霉毒素B1酶聯免疫試劑盒：冰箱取出，平衡至室溫（藥品冷藏箱（2~8℃））孵育三、酶聯免疫吸附試驗（ELISA）操作流程例：飼料中黃曲霉毒三、酶聯免疫吸附試驗（ELISA）操作流程天平粉碎機電動振蕩器離心機移液器例：飼料中黃曲霉毒素B1的檢測三、酶聯免疫吸附試驗（ELISA）操作流程天平粉碎機電動振蕩三、酶聯免疫吸附試驗（ELISA）操作流程飼料中黃曲霉毒素B1的檢測：樣品、標準品以及試劑準備加樣(標準品/樣品，酶標試劑）孵育，洗板加入底物溶液A、B加入終止液光密度（OD）測量結果分析三、酶聯免疫吸附試驗（ELISA）操作流程飼料中黃曲霉毒素B三、酶聯免疫吸附試驗（ELISA）操作流程飼料中黃曲霉毒素B1的檢測：樣品、標準品以及試劑準備加樣(標準品/樣品，酶標試劑）孵育，洗板加入底物溶液A、B加入終止液光密度（OD）測量結果分析Or37℃孵育三、酶聯免疫吸附試驗（ELISA）操作流程飼料中黃曲霉毒素B三、酶聯免疫吸附試驗（ELISA）操作流程飼料中黃曲霉毒素B1的檢測：樣品、標準品以及試劑準備加樣(標準品/樣品，酶標試劑）孵育，洗板加入底物溶液A、B加入終止液光密度（OD）測量結果分析孵育三、酶聯免疫吸附試驗（ELISA）操作流程飼料中黃曲霉毒素B三、酶聯免疫吸附試驗（ELISA）操作流程飼料中黃曲霉毒素B1的檢測：樣品、標準品以及試劑準備加樣(標準品/樣品，酶標試劑）孵育，洗板加入底物溶液A、B加入終止液光密度（OD）測量結果分析孵育三、酶聯免疫吸附試驗（ELISA）操作流程飼料中黃曲霉毒素B三、酶聯免疫吸附試驗（ELISA）操作流程飼料中黃曲霉毒素B1的檢測：樣品、標準品以及試劑準備加樣(標準品/樣品，酶標試劑）孵育，洗板加入底物溶液A、B加入終止液光密度（OD）測量結果分析孵育三、酶聯免疫吸附試驗（ELISA）操作流程飼料中黃曲霉毒素B三、酶聯免疫吸附試驗（ELISA）操作流程飼料中黃曲霉毒素B1的檢測：樣品、標準品以及試劑準備加樣(標準品/樣品，酶標試劑）孵育，洗板加入底物溶液A、B加入終止液光密度（OD）測量結果分析孵育三、酶聯免疫吸附試驗（ELISA）操作流程飼料中黃曲霉毒素B三、酶聯免疫吸附試驗（ELISA）操作流程ELISA的比色測定主要由酶標儀進行。此處強調以下幾點：（1）酶標儀不應安置在陽光或強光照射下，室溫宜在15－30℃，使用前先預熱儀器15－30分鐘，測讀結果更穩定。各種酶標儀性能不同，使用前應詳細閱讀說明書。（2）比色前應先用潔凈的吸水紙拭干板底附著的液體，然后將板正確放入比色架中，以免銹蝕酶標儀比色架。（3）比色測定時，一定要注意酶標儀的波長是否已調至合適或所用濾光片是否正確。三、酶聯免疫吸附試驗（ELISA）操作流程

三、酶聯免疫吸附試驗（ELISA）操作流程單波長或雙波長比色選擇的問題：所謂的單波長比色即是通常的以對顯色具有最大吸收的波長如450nm或492nm進行比色測定；而雙波長比色則在敏感波長如450nm和非敏感波長如630nm下各測定一次，最后酶標儀給出的數值為敏感波長下的吸光度值與非敏感波長下的吸光度值的差值。因此，雙波長比色測定具有能排除由微孔板本身、板孔內標本的非特異性吸收、指紋、刮痕、灰塵等對特異顯色干擾的優點。

三、酶聯免疫吸附試驗（ELISA）操作流程單波長或雙