實驗三酵核核酸的提取及測定—習報告一研背生物大分子物質通常是指動物植物微生物進行新陳代謝時所產生的蛋白質和核酸等有機化合物它僅是生物科學工者研究者的重要對象與化學醫學和食品等工業部門有密切關系在科研和醫學方面討結構與功能防某些疾病時常需要較純的生物大分子物質這物質往往與自然界存在的各種不同的化合物結合在一起或自身之間相互結合在一起，離體后穩定性較差，含量偏低，且提取的材料復雜，因此純化的方法也很多。微生物是工業上大量生產核酸的原料中酵母最為理想次實驗以干酵母粉為實驗材料，提取，測定其含量。二研目掌握核酸分離純化的基本設計思想及主要操作細節和生物制品開發的基本思路。三研策酵母細胞中RNA通與蛋白結合。要提取RNA就要破細胞壁，讓它釋放出來。濃鹽法通過改變細胞膜的通透性釋放出胞內物質，然后沸水浴使R水酶失活。再通過調節pHRNA充沉淀，洗滌，干燥，量。四研方及行分濃鹽法是在加熱條件下，利用高濃度的鹽改變細胞膜的通透性，使NA釋放出來。提取RNA時注意掌握溫度，接在90~100浸提，避免在20~70℃之間的時間過長，磷二酯酶和磷酸單酯酶作用活躍的溫度范圍，會使RNA降解而降低提取率。洗滌沉淀時要反復抽提，離心以純化RNA測定提取的核酸含量，只需測定組成核苷酸的任意一種組分即可。堿基在有吸收，采用紫外吸收法可測定核酸含量。五具實設、所主要材料：食品用干酵母粉；試劑：10%NaCl,6MHCl,乙氨水，沉劑鉬酸銨+193ml水過氯酸儀器設備烘離機天紫外分光光度計液器恒溫水浴鍋玻勻漿器，計主要器皿：研缽，離心管，容量瓶25ml50ml；具塞試管；三角瓶；小燒杯。、具體操作步驟

提取：取酵母粉，于研缽中小心研成面粉狀粉末，轉移至三角瓶。量取倒三角瓶，使酵母粉完全徹底懸浮浸潤高度鹽溶液改變細胞膜的通透性釋放胞內物質）小心置于沸水浴，浸提40minRNA解酶失活）分離：出上述提取液，冰浴冷卻治酶復性）轉入離心管，3500r/min,提取上清液。沉淀RNA：傾倒上清液于小燒杯中，冰浴冷卻至1℃以下后拿去）用6M在攪拌下調節（等電點時RNA溶解度最小，沉淀量最大調節好后繼續于冰浴中放置使沉淀顆粒變大。洗滌純：將冰浴后的懸浮液輕柔徹底地充分攪拌，轉入離心管離心15min。棄上清液，在離心管中用95%乙醇洗滌沉淀三次，每次用約15ml乙充分徹底懸浮攪拌洗滌，離。干燥：后一次洗滌RNA沉后，立即將預先在80℃烘箱內干燥的硫酸紙取出，精確稱重后折成框（半厘米高藥將RNA沉從離心管內轉出，均勻涂布于硫酸上。置于80烘箱內使淀充分干燥，避免稱誤)干燥后的硫酸紙與沉淀一起稱重。將大部分RNA制小心轉移至玻璃勻漿器，記錄剩余制品和硫酸紙總重量。紫外法量測定：提取的RNA小心轉入玻璃勻漿器后，加入蒸水，沉穩垂直地勻漿至均一的膠體溶液。轉移至潔凈小燒杯。用10ml左的蒸餾水分次清洗勻漿器一并轉入燒杯意燒杯刻度不能超過）混勻燒杯內RNA溶，氨調節。轉入容瓶，蒸餾水分次清洗一并轉入。定容，混勻取兩支試管按下表配制：管號AB

RNA溶5ml5ml

H5ml--

沉淀劑--5ml

）各自混勻，冰浴轉移入離心管，3500r/min離10min取上清液于另兩支試管，分別混勻。各取0.5ml于個容量瓶，蒸餾水定容。紫外分光光度計下測定OD。260、預期原始數據記錄）RNA的取硫酸紙質量______;0

干燥后硫酸紙與沉淀總質量m______;1轉移后剩余制品與硫酸紙總質量m_______;2RNA總品質量=1

0定量樣品質量=1

2RNA制品純=）紫外法測RNA含量管號OD260

產率=________AB六、質疑及相關思考、作為商品開發，我們更多的是應該考慮市場需求的共性還是個性？為什么？相應，如何完成相關欲開發產品的定位？答：我應更多地考慮市場需的個性。隨著社會的發展，市場由賣方市場轉變為買方市場，商品豐富，貨源充沛，消費者有了挑選商品的余地，而賣方之間在質量、價格、促銷等方面展開競爭在爭激烈的市中若有優于其他產品的特性并成功定位給自己貼上合理的標簽，就能夠抓住消費者的心，否則就只能在莫大的市場淹沒。產品的定位應追求差異化如物制劑的開發從量上比其它制劑純度更高格相對便宜等，都是合理的產品定位。、基于生物制品的產業開發，探討實驗室的科學研究和大學工業生產之間的關系和同之處？答實室是一個較小的環境大都可以在比較好的條件下進行實驗在應用到工業生產的大環境中時可能會遇到更多細節方面的問題如器設備的精度等業產選擇方案要盡量低成本少量物品的成本對實驗室不是主要