藥學(xué)(yàoxué)微生物基礎(chǔ)教案上課時(shí)間(shíjiān):200年月日授課內(nèi)容：微生物分布檢測(cè)技術(shù)授課人:汪穗福任教班級(jí):2005級(jí)班課時(shí):課型:新授課教學(xué)媒體:第一頁(yè)，共二十四頁(yè)。第五章微生物分布檢測(cè)技術(shù)教學(xué)目標(biāo)：1.熟知微生物在自然界和正常人體(réntǐ)的分布規(guī)律,掌握微生物分布測(cè)定的操作.2.了解微生物與自然界及人類的關(guān)系,建立有菌觀念.3.熟知微生物對(duì)藥物的損壞與防止藥物被微生物污染的方法.4.掌握中藥霉變的防治技術(shù).教學(xué)重點(diǎn)：

1.微生物分布測(cè)定的操作技術(shù).2.防止藥物(yàowù)被污染的方法.3.防治藥物(yàowù)霉變的技術(shù).4.正常菌體.條件致病菌及菌群失調(diào)癥等觀念.教學(xué)難點(diǎn):1.微生物分布測(cè)定操作技術(shù).2.防止藥物被微生物污染的方法.3.防治藥物霉變的技術(shù).第二頁(yè)，共二十四頁(yè)。第五章微生物分布檢測(cè)(jiǎncè)技術(shù)

微生物廣泛分布于自然界及存在于正常人體的體表及與外界相通的腔道中,因此，了解微生物的分布規(guī)律和掌握微生物分布的測(cè)定技術(shù)，在制藥生產(chǎn)中具有十分重要的意義。第一節(jié)理論基礎(chǔ):

一、微生物在自然界中的分布（一）微生物在土壤中的分布

土壤中含有各種豐富的營(yíng)養(yǎng),是微生物生長(zhǎng)繁殖的良好環(huán)境.在距地面(dìmiàn)10～20cm的農(nóng)田耕作層微生物最多，每克土壤中可含幾億至幾十億個(gè)。土壤中的微生物主要有細(xì)菌、放線菌、真菌、病毒等。第三頁(yè)，共二十四頁(yè)。

（二）微生物在水中的分布無(wú)論清澈的水中還是污濁的水中,都有微生物存在.多數(shù)微生物可在水中存活(cúnhuó)數(shù)天甚至數(shù)月。

水中的微生物主要有細(xì)菌、放線菌、真菌、螺旋體等。檢查水的污染，通常采用測(cè)定水中細(xì)菌總數(shù)和大腸菌群數(shù)作為判斷水被污染的指標(biāo)。我國(guó)飲用水的衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)是：細(xì)菌總數(shù)每毫升不得超過(guò)100個(gè)；大腸菌群數(shù)每1000毫升不得超過(guò)3個(gè)。第四頁(yè)，共二十四頁(yè)。（三）微生物在空氣中的分布空氣中含有飛起的塵土，又受人和動(dòng)物呼吸道及口腔分泌物等的污染，使得自然環(huán)境(zìránhuánjìnɡ)的空氣中均有微生物分布。空氣中的微生物主要附著在懸浮的塵埃和液滴中隨氣流傳播,并且分布不均沒有固定的類群。生產(chǎn)環(huán)境的空氣中，微生物數(shù)量的多少直接影響到藥物制劑的質(zhì)量。藥物生產(chǎn)的優(yōu)良操作規(guī)程（GMP）規(guī)定，生產(chǎn)不同劑型的藥物必須在相應(yīng)的空氣質(zhì)量級(jí)別下進(jìn)行。測(cè)定空氣中沉降菌和浮游菌的數(shù)量是判斷空氣質(zhì)量級(jí)別的重要指標(biāo)。微生物實(shí)驗(yàn)中應(yīng)按進(jìn)行必要的無(wú)菌操作。

第五頁(yè)，共二十四頁(yè)。二、微生物在正常人體(réntǐ)中的分布微生物除在自然界中有著廣泛存在外,在人體體表以及與外界相通的腔道中也有微生物存在。一般視機(jī)體防御能力或是否引起機(jī)體疾病分為:

正常菌群－－長(zhǎng)期寄居于人體表或與外界相通的腔道黏膜上，在機(jī)體防御機(jī)能正常時(shí)與機(jī)體保持相對(duì)平衡狀態(tài)，不引起疾病并且(bìngqiě)對(duì)機(jī)體有利的某些微生物稱之。第六頁(yè)，共二十四頁(yè)。正常菌群對(duì)人體主要(zhǔyào)有以下作用：

①提供營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)如存在于人腸道中的大腸桿菌可以利用食物殘?jiān)铣删S生素B和維生素K供人體腸黏膜吸收(xīshōu)；②生物拮抗作用正常菌群可以產(chǎn)生抑菌或殺菌物質(zhì)構(gòu)成一種生物屏障幫助人體抵抗入侵的病原微生物，如大腸桿菌可以產(chǎn)生大腸菌素有殺死痢疾桿菌的作用；

③抗衰老作用如雙歧桿菌能分解人體產(chǎn)生的有害物質(zhì)幫助人體抵抗衰老。

第七頁(yè)，共二十四頁(yè)。在特定條件下這種平衡會(huì)被打破，使正常菌群發(fā)生(fāshēng)數(shù)量和種類的改變?cè)斐膳R床感染癥狀，稱為“菌群失調(diào)癥”。

其條件有：①由于受涼、感冒、大面積燒傷、過(guò)度疲勞、患慢性長(zhǎng)期消耗性疾病、腫瘤等原因引起機(jī)體免疫力降低時(shí)；②由于手術(shù)、外傷等原因引起正常菌群移位時(shí)，如寄居于腸道的大腸桿菌，如果外科手術(shù)時(shí)進(jìn)入腹腔就會(huì)引起腹膜炎；③不適當(dāng)?shù)拈L(zhǎng)期大量使用廣譜(ɡuǎnɡpǔ)抗生素，引起正常菌群中的某些細(xì)菌被殺死，導(dǎo)致原來(lái)各菌群間的平衡被打破時(shí)。這種在一定條件下能引起感染的正常菌群又稱為條件致病菌。第八頁(yè)，共二十四頁(yè)。1．口、鼻、咽腔：葡萄球菌、綠色(lǜsè)鏈球菌、鏈球菌、肺炎嗜血桿菌、密螺旋體、梭形桿菌等

外耳(wàiěr)：葡萄球菌、類白喉菌假單孢菌、腸道：葡萄球菌、梭形桿菌(gǎnjūn)、厭氧菌、類白喉?xiàng)U菌、大腸桿菌、腸鏈球菌、乳酸桿菌、等胃：葡萄球菌、鏈球菌、乳酸桿菌、消化鏈球菌尿道與陰道：厭氧菌、變形桿菌、陰道加德納菌、擬桿菌、消化鏈球菌、假絲酵母、白色念珠菌等皮膚:金葡菌、芽孢桿菌、類白喉?xiàng)U菌、鏈球菌、假絲酵母等

第九頁(yè)，共二十四頁(yè)。三、微生物在藥物生產(chǎn)環(huán)境中的分布（一）廠房建筑物中的微生物建筑物的墻壁及內(nèi)部構(gòu)造均會(huì)黏附微生物。

藥物生產(chǎn)環(huán)境按要求不同，劃分為一般生產(chǎn)區(qū)、控制區(qū)和潔凈區(qū)。

要定期進(jìn)行清洗(qīngxǐ)、滅菌，即符合100級(jí)或10，000級(jí)的要求。第十頁(yè)，共二十四頁(yè)。（二）生產(chǎn)(shēngchǎn)設(shè)備中的微生物

藥物生產(chǎn)過(guò)程中所使用的設(shè)備、工具等也會(huì)黏附微生物，在生產(chǎn)過(guò)程中會(huì)直接或間接(jiànjiē)污染藥品。要求藥物生產(chǎn)的設(shè)備和工具盡量結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，便于拆卸和清洗，生產(chǎn)前后都要清洗或消毒滅菌。第十一頁(yè)，共二十四頁(yè)。（三）原材料中的微生物包括原材料、輔導(dǎo)料、添加劑、溶劑等會(huì)帶入微生物。生產(chǎn)中應(yīng)根據(jù)不同(bùtónɡ)原材料以及不同(bùtónɡ)藥物劑型的要求，采取相應(yīng)的處理措施加以消毒或滅菌。如天然來(lái)源且未經(jīng)處理的原材料含微生物數(shù)量最多，象動(dòng)植物來(lái)源的中藥材、明膠、阿拉伯膠、瓊脂等；化學(xué)合成的原材料一般含微生物數(shù)量較少。

（四）包裝物中的微生物包括包裝材料,包裝過(guò)程的操作。第十二頁(yè)，共二十四頁(yè)。第二節(jié)微生物分布(fēnbù)測(cè)定的操作一、水中微生物測(cè)定的操作（一）操作目的（二）測(cè)定項(xiàng)目1．細(xì)菌總數(shù)測(cè)定。2．大腸菌群數(shù)測(cè)定。（三）操作原理(yuánlǐ)1．細(xì)菌總數(shù)測(cè)定（平板菌落計(jì)數(shù)法）2．大腸菌群數(shù)測(cè)定第十三頁(yè)，共二十四頁(yè)。

（四）實(shí)驗(yàn)器材及藥品（五）前期準(zhǔn)備1．培養(yǎng)基配制2．器材滅菌(mièjūn)

（六）操作步驟

（七）操作要點(diǎn)二、空氣中微生物測(cè)定的操作

最常用的方法:1．沉降法2．氣流撞擊法3．濾過(guò)法第十四頁(yè)，共二十四頁(yè)。三、人體表中微生物測(cè)定(cèdìng)的操作操作(cāozuò)步驟

1．手指表面微生物檢查2．咽喉部位的微生物檢查第十五頁(yè)，共二十四頁(yè)。第三節(jié)微生物對(duì)藥物(yàowù)的損壞

微生物在自然界廣泛的存在.藥物制劑在生產(chǎn)、運(yùn)輸、貯藏等環(huán)節(jié)，均有被微生物污染的可能。甚至引起藥品霉變，降低、喪失療效，或引起藥源性疾病的發(fā)生。

我們應(yīng)了解藥物中污染微生物的主要來(lái)源，掌握判斷藥物被微生物損壞的標(biāo)準(zhǔn)和防止藥物被微生物污染的方法及中藥防霉技術(shù)等。以保證藥品質(zhì)量，確保人民(rénmín)用藥安全。第十六頁(yè)，共二十四頁(yè)。一、藥物(yàowù)中微生物的來(lái)源主要來(lái)自于藥物生產(chǎn)的原材料、生產(chǎn)用水、生產(chǎn)環(huán)境、生產(chǎn)設(shè)備、操作人員、包裝材料及容器等.（一）藥物原材料（二）生產(chǎn)用水（三）生產(chǎn)環(huán)境（四）生產(chǎn)設(shè)備及包裝容器（五）操作人員第十七頁(yè)，共二十四頁(yè)。二、微生物對(duì)藥物的損壞（一）判斷(pànduàn)藥物被污染的標(biāo)準(zhǔn)不同劑型的藥物有不同的污染判斷標(biāo)準(zhǔn)。

（1）規(guī)定滅菌藥物:要檢驗(yàn)微生物的毒性代謝產(chǎn)物,不得檢驗(yàn)出熱原質(zhì)。必須無(wú)菌。

（2）非規(guī)定滅菌藥物:允許含有活的微生物，但是微生物總數(shù)有限量要求，如果微生物總數(shù)超過(guò)限量規(guī)定即認(rèn)為被污染；同時(shí)不得檢驗(yàn)出病原菌或特定的控制菌。（二）藥物污染后理化性質(zhì)的改變（1）物理性質(zhì)的改變:外觀、顏色、氣味、硬度、粘性.澄清度等。（2）化學(xué)性質(zhì)的改變:降解、產(chǎn)味、產(chǎn)氣、失活等。第十八頁(yè)，共二十四頁(yè)。（三）影響微生物對(duì)藥物損壞的因素微生物對(duì)藥物的損害(sǔnhài)作用受很多因素的影響(即能影響微生物生長(zhǎng)的一些主要因素),主要的因素有:（1）污染程度（2）藥物化學(xué)成分（3）藥物的pH值（4）貯藏條件（5）包裝設(shè)計(jì)三、防止藥物被微生物污染的方法(fāngfǎ)（一）加強(qiáng)技術(shù)管理（二）加強(qiáng)衛(wèi)生管理（三）使用合適的防腐劑和抑菌劑

第十九頁(yè)，共二十四頁(yè)。四、中藥(zhōngyào)霉變的防治技術(shù)（一）中藥發(fā)生霉變后的危害（1）有效成分被分解破壞，使療效降低甚至失去療效。（2）霉變后再加工成藥,其色澤轉(zhuǎn)黯，氣味變淡，品質(zhì)降低，影響其成藥質(zhì)量。（3）霉變后中藥的組織結(jié)構(gòu)被破壞。（4）增加中藥的損耗，加大成本費(fèi)用。（5）某些產(chǎn)生真菌毒素的霉菌污染中藥后,會(huì)引起疾病,甚至引發(fā)癌癥。第二十頁(yè)，共二十四頁(yè)。（二）易引起中藥(zhōngyào)霉變的微生物類群

1.霉菌:中藥含水量在15％以上，空氣相對(duì)濕度超過(guò)70％，溫度在20～35℃范圍內(nèi)，最易引起霉變。常見的霉菌有:曲霉、青霉、毛霉、根霉、木霉

2．酵母菌:酵母菌最易在含糖高的物質(zhì)上生長(zhǎng)繁殖。

1．正確的采集加工處理2．嚴(yán)格入庫(kù)驗(yàn)收3．加強(qiáng)在庫(kù)檢查4．防止霉變的技術(shù)措施（三）中藥霉變的防治方法第二十一頁(yè)，共二十四頁(yè)。（四）霉變中藥的救治(jiùzhì)和處理（1）刷洗法（2）淘洗(táoxǐ)法（3）吹霉法（4）沸水噴灑法（5）醋洗法

總結(jié):1.微生物在自然界及人體中的分布及其分布測(cè)定的操作技術(shù)。2.微生物對(duì)藥物的損壞及防止(fángzhǐ)藥物被污染的方法。3.防治霉變的技術(shù)。第二十二頁(yè)，共二十四頁(yè)。作業(yè):1、解詞：浮游菌、沉降菌、大腸菌群、正常菌群、菌群失調(diào)癥。2、對(duì)藥物生產(chǎn)(shēngchǎn)的環(huán)境有何要求？3、空氣中微生物數(shù)量測(cè)定的操作要點(diǎn)有哪些？4、簡(jiǎn)述判斷藥物被污染的標(biāo)準(zhǔn)。5、試述防止藥物變質(zhì)的措施。6、試述防止中藥霉變的措施。第二十三頁(yè)，共二十四頁(yè)。內(nèi)容(nèiróng)總結(jié)藥學(xué)微生物基礎(chǔ)教案。空氣