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文檔簡介
本文格式為Word版,下載可任意編輯——兩種不同染色方法在液基細(xì)胞學(xué)(TCT)檢查中的應(yīng)用價值本文運用HE(Haematoxylinandeosin)染色和巴氏染色兩種方法處理宮頸細(xì)胞學(xué)標(biāo)本。經(jīng)TCT檢測,對比分析兩種染色效果的優(yōu)缺點,以利同行們選擇適合的染色方法。
液基細(xì)胞學(xué);瑞氏;巴氏;H-E染色
液基細(xì)胞學(xué)(TCT)檢查是目前國際上較先進(jìn)的一種宮頸癌細(xì)胞學(xué)檢查技術(shù),檢出率為100%,在宮頸病變診斷中普及,改變了傳統(tǒng)手工涂片的方法,制片效果好,利于觀測,陽性檢出率高,是應(yīng)用于婦女宮頸癌篩查的一項先進(jìn)的技術(shù)[1-2]。宮頸細(xì)胞學(xué)的常用染色方法以巴氏染色,HE染色為主,效果各有優(yōu)劣。對比兩種染色方法,分析各自的優(yōu)缺點,便于在工作中選擇適合的染色方法。
1材料與方法
1.1儀器材料
福州泰普生物科學(xué)有限公司生產(chǎn)的TIB-AUTOPREP1000液基細(xì)胞制片儀。液基細(xì)胞保存液(天津伊諾新康醫(yī)療器械科技有限公司生產(chǎn))。巴氏染液:福州泰普生物科學(xué)有限公司生產(chǎn)的配套染液。H-E染液:福州泰普生物科學(xué)有限公司生產(chǎn)的配套染液。
1.2方法
液基細(xì)胞制片,婦科取材保存于細(xì)胞保存液中送檢。通過95%酒精固定30min,水沖洗,分別用巴氏、HE兩種染色法。巴氏染色:液基細(xì)胞涂片置蘇木素染液浸染3min,水沖洗,鹽酸酒精分化5s,水沖洗堿水反藍(lán),95%酒精2min,EA-50染色2min,95%酒精第一次分化lmin,95%酒精其次次分化lmin,100%酒精第一次分化2min,100%酒精其次次分化5min,二甲苯1~2min,中性樹膠封固,HE染色:浸入蘇木素染液浸染10~15min,水沖洗30s~1min,1%鹽酸酒精分化30S,流水沖洗15min,1%伊紅染色3~5min,水沖洗,90%~95%酒精第一次分化30s,95%酒精其次次1min,95%酒精第三次分化1min,100%酒精第一次分化2min,100%酒精其次次分化5min,二甲苯1~2min,中性樹膠封固。
2結(jié)果
2.1巴氏染色
巴氏染色法將胞核染為深藍(lán)色;大部分涂片染色的透明性好,著色較好,胞核結(jié)構(gòu)清楚,不足部分為部分細(xì)胞偏紅,核周有伊紅著色較深處,與核分界不清。染色程序?qū)Ρ确彪s。
2.2HE(Haematoxylinandeosin)染色
蘇木素染色后的細(xì)胞核浮現(xiàn)藍(lán)色,染色透明度好,核與胞質(zhì)比較顯明。紅蘭適度。
3探討
細(xì)胞學(xué)檢查中,核的變化是主要因素,把細(xì)胞核染好,核漿比較顯明是最重要的。液基細(xì)胞保存液中,細(xì)胞保存時間可較長,因含防腐劑對細(xì)胞的影響而對染色的要求較高[3]。
巴氏染液染色特點是細(xì)胞具有多色性顏色,細(xì)胞核結(jié)構(gòu)清楚,色調(diào)嬌艷多彩。染色效果好,適用于上皮細(xì)胞染色,特別是觀測女性雌激素水平對陰道上皮細(xì)胞的影響[4]。不足之處是有部分細(xì)胞核偏紅,核周有伊紅著色較深處,與核分界不清的狀況。并且染色時間長,操作繁瑣。
HE(Haematoxylinandeosin)染色的特點,首先染液的滲透性強(qiáng),染色透明度好,核漿比較顯明,操作簡便;再者宮頸陰道為非角化復(fù)層鱗狀上皮,H-E染色后的細(xì)胞涂片更易與組織切片相對照。其次當(dāng)HE(Haematoxylinandeosin)染色不理想時,還能進(jìn)行彌補(bǔ),如染色較淺,可分別進(jìn)行蘇木素及伊紅復(fù)染;如用蘇木素使涂片染色過深,后用鹽酸酒精處理,直到背景潔凈,至滿意為止[5-6]。最終H-E染色液也可以重復(fù)使用,直至認(rèn)為效果不佳時再換用新的染
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