抗HIV篩查實驗室生物安全管理及醫學處置抗HIV篩查實驗室生物安全管理及醫學處置高效空氣過濾器(HEPA)：通常以濾除≥0.3μm微粒為目的，濾除效率符合相關要求的過濾器。安全罩(safetyhood)：置于實驗室工作臺或儀器設備上的負壓排風罩，以減少實驗室工作者的暴露危險。生物安全柜(biologicalsafetycabinet,BSC)：負壓過濾排風柜。防止操作者和環境暴露于實驗過程中產生的生物氣溶膠。個人防護裝備(personalprotectiveequipment,PPE)：用于防止人員受到化學和生物等有害因子傷害的器材和用品。實驗室分區(laboratoryarea)：按照生物因子污染概率的大小，對實驗室進行合理的分區。一、常用術語及定義高效空氣過濾器(HEPA)：通常以濾除≥0.3μm微粒為目緩沖間(bufferroom)：設置在清潔區、半污染區和污染區相臨兩區之間的緩沖密閉室，具有通風系統，其兩個門具有互鎖功能，且不能同時處于開啟狀態。氣鎖(airlock)：氣壓可調節的氣密室，用于連接氣壓不同的兩個相鄰區域，其兩個門具有互鎖功能，不能同時處于開啟狀態。在實驗室中用作特殊通道。定向氣流(directionalairflow)：在氣壓低于外環境大氣壓的實驗室中，從污染概率小且相對壓力高處向污染概率高且相對壓力低處受控制流動的氣流。材料安全數據單(materialsafetydatasheet,MSDS)：提供詳細的危險和注意事項信息的技術通報。一、常用術語及定義緩沖間(bufferroom)：設置在清潔區、半污染區和污一、常用術語及定義一、常用術語及定義Ⅰ級：低個體危害、低群體危害——不會導致健康工作者和動物致病的細菌、真菌、病毒和寄生蟲等生物因子。Ⅱ級：中等個體危害、有限群體危害——能引起人或動物發病，但一般情況下對健康工作者、群體、家畜或環境不會引起嚴重危害的病原體。實驗室感染可能發生，但不會導致嚴重疾病，具有有效治療和預防措施，并且傳播危險有限。Ⅲ級：高個體危害、低群體危害——能引起人類或動物嚴重疾病，造成嚴重經濟損失，但通常不會因偶然接觸而在個體間傳播，或能用抗生素、抗寄生蟲藥物治療的病原體。Ⅳ級：高個體危害、高群體危害——能引起人類或動物非常嚴重的疾病，一般不能治愈，容易直接或間接或因偶然接觸在人與人、或動物與人、或人與動物、或動物與動物之間傳播的病原體。二、生物安全級別與生物因子危害等級Ⅰ級：低個體危害、低群體危害——不會導致健康工作者和動物致病HIV危害程度

①按衛生部2006年《人間傳染的病原微生物名錄》(簡稱《名錄》)，人類免疫缺陷病毒(HIV)危害程度屬于第2類病原微生物。

②根據國務院2004年頒布的424號令《病原微生物實驗室生物安全管理條例》，HIV屬于高致病性病原微生物。HIV檢測實驗室要求

①HIV抗體檢測：HIV抗體檢測實驗室屬于非病毒培養的實驗，僅為血清學檢測，按《名錄》要求，應在符合Ⅱ級生物安全實驗室(BSL-2)要求的HIV抗體檢測實驗室中操作。②HIV分離：研究HIV分離、細胞培養及研究工作按《名錄》要求，應在Ⅲ級生物安全實驗室(BSL-3)中進行。三、HIV危害程度及實驗室設置要求HIV危害程度三、HIV危害程度及實驗室設置要求人間傳染的病原微生物名錄中華人民共和國衛生部制定二○○六年一月十一日人間傳染的病原微生物名錄抗HIV篩查實驗室生物安全管理及醫學處置課件抗HIV篩查實驗室生物安全管理及醫學處置課件抗-HIV檢測實驗室設置①抗-HIV確認實驗室。

②抗-HIV篩查實驗室。

③抗-HIV檢測點。抗-HIV篩查實驗室主要配置：酶標儀、洗板機、離心機、加樣器、普通冰箱、恒溫箱、高壓滅菌器、洗眼器、緊急沖淋裝置、生物安全柜、安全防護用品等。生物安全柜應放置在沒有氣流明顯流動的地方，避免生物安全柜在工作時受到外界氣流的影響導致正常內部層流發生變化。三、HIV危害程度及實驗室設置要求抗-HIV檢測實驗室設置三、HIV危害程度及實驗室設置要求實驗室生物安全水平分級：根據生物因子的危害程度和采取的防護措施，將生物安全防護水平(biosafetylevel，BSL)分為4級：I級防護水平最低，IV級防護水平最高。以BSL-1、BSL-2、BSL-3、BSL-4表示實驗室的相應生物安全防護水平；以ABSL-1、ABSL-2、ABSL-3、ABSL-4表示動物實驗室的相應生物安全防護水平。三、HIV危害程度及實驗室設置要求實驗室生物安全水平分級：根據生物因子的危害程度和采取的防護措三、HIV危害程度及實驗室設置要求三、HIV危害程度及實驗室設置要求個人防護裝備——實驗室防護服實驗室應確保有足量的、有適當防護水平的、清潔的工作服或罩衫等防護服可供使用。清潔防護服不用時，應置于專用處存放。防護服被污染應立即更換，污染的防護服應置于有適當標記的、防漏的袋(箱)中存放并即時處置。間隔一定時間應更換防護服以確保清潔。離開實驗室時，防護服必須脫下并留在實驗室內，不得穿著外出，更不能攜帶回家。三、HIV危害程度及實驗室設置要求個人防護裝備——實驗室防護服三、HIV危害程度及實驗室設置要個人防護裝備——手套檢驗人員工作或接觸感染及潛在感染材料、物表、設備時應戴手套，以防生物因子、化學品、電離輻射污染，并防刺傷、擦傷、動物抓咬傷等。若發生感染性材料的溢出或濺出，宜戴雙層手套。檢驗人員應接受手套選擇、配戴、使用、摘除的培訓。所戴手套應滿足舒適、靈活、耐磨、耐扎、耐撕、無破損要求。手套戴好后應完全遮住手及腕部，如必要，可覆蓋實驗室長罩服或外衣袖子。手套破損、污染時，應更換手套。手套為實驗室工作專用，不得戴著手套離開實驗室。工作完成后應摘除手套并安全處置。一次性手套不得再次使用。三、HIV危害程度及實驗室設置要求個人防護裝備——手套三、HIV危害程度及實驗室設置要求個人防護裝備——鞋鞋應舒適，鞋底應防滑。推薦使用皮制或合成材料的防滲漏液體的鞋類。從事可能出現漏液的工作時，應穿一次性防水鞋套。實驗室的特殊區域(如在防靜電要求的區域)或BSL-3和BSL-4實驗室工作時，應使用橡膠靴子等專用鞋。三、HIV危害程度及實驗室設置要求個人防護裝備——鞋三、HIV危害程度及實驗室設置要求個人防護裝備——呼吸防護裝備一些實驗操作不可能在生物安全柜內進行而必須采取外部操作時，為防止感染性材料濺出或霧化危害，必須使用面部保護裝置。當要求使用呼吸防護裝備，如面罩、個人呼吸器、正壓服等時，應經培訓并嚴格按SOP文件操作。應對呼吸器作個體適合性測試，并加強對呼吸器使用者的監控和醫學評估，確保正確使用。進行容易產生高危害氣溶膠或易濺出高危害液體的操作時，應在生物安全柜或其他物理防護設備中進行，并使用個體其他防護裝備，如護目鏡、面罩、個體呼吸保護用品或防濺保護裝備等。三、HIV危害程度及實驗室設置要求個人防護裝備——呼吸防護裝備三、HIV危害程度及實驗室設置要實驗室設計和建造要求⑴無特殊選址要求，建筑應遵守國家、地方及實驗室專用建筑安全標準。實驗區與辦公區要分開，實驗室需劃分污染區、半污染區與清潔區。⑵實驗室應設在耐火等級不低于二級的建筑物內，設計應保證對技術區域中生物、化學、輻射和物理危害的防護水平控制在經過評估的風險程度范圍內，防止風險進入周圍環境。⑶實驗室能開啟的窗戶必須安裝防昆蟲進入的紗窗，下水道和排風管道應安裝防老鼠等動物進入的鐵網。⑷生物安全防護二級實驗室必須滿足本標準一級生物安全防護實驗室中實驗室設計和建造的特殊要求各款的要求。⑸配備各種消毒方法的設施，安裝紫外線消毒燈或人機共存消毒機，高壓滅菌器、化學消毒裝置等。三、HIV危害程度及實驗室設置要求實驗室設計和建造要求三、HIV危害程度及實驗室設置要求針筒內的血要小心緩慢地沿管壁注入試管內，防止血液外濺。實驗室感染可能發生，但不會導致嚴重疾病，具有有效治療和預防措施，并且傳播危險有限。③通向工作區的所有進出口都應標明存在的危險，尤其應注意火險以及易燃、有毒、放射性、有害和生物危險材料。建立健全實驗室安全管理制度體系，實驗室管理層對所有員工和實驗室來訪者的安全負責。①所有人員必須立即撤離相關區域，任何暴露人員都應接受醫學咨詢。檢驗人員工作或接觸感染及潛在感染材料、物表、設備時應戴手套，以防生物因子、化學品、電離輻射污染，并防刺傷、擦傷、動物抓咬傷等。實驗室分區(laboratoryarea)：按照生物因子污染概率的大小，對實驗室進行合理的分區。緩沖間(bufferroom)：設置在清潔區、半污染區和污染區相臨兩區之間的緩沖密閉室，具有通風系統，其兩個門具有互鎖功能，且不能同時處于開啟狀態。廢棄物處置：實驗室產生的所有廢棄物，包括不再需要的血液樣品、反應板、陰陽性對照、ELISA標記物、試劑包裝盒等，均應視為感染性廢棄物，按衛部門要求規范處置。HIV抗體檢測主要采集血液樣品，樣品采集的工作人員應掌握相關專業知識和操作技能，能有效地防止病原微生物擴散和感染。實驗室接收樣本應在生物安全柜內開啟包裝件，要求工作人員將所有實驗操作移至生物安全柜中進行。②穿著適宜的個體防護裝備(鞋、防護服、口罩、雙層手套、護目鏡等)后進入實驗室。實驗室設計和建造要求⑹就近設置洗眼器和緊急沖淋裝置，并有足夠的洗手池。⑺實驗室需有限制進入設施，入口和出口應可分辨，入口應有可鎖閉的門(門鎖應不妨礙緊急疏散)并貼生物危險等標記，非授權人員未經許可不得入內，通向出口的通道應無障礙，應設緊急出口并有發光指示標記，緊急撤離路線應有在黑暗中可辨的標識。⑻實驗室宜有適當的通風換氣次數，應對空氣的流動速度進行常規監測以保證足夠的通風和防止潛在傳染因子和有害氣體的擴散。⑼實驗室內溫度、濕度、照度、噪聲和潔凈度等內環境符合要求，照明要充足，光線不要眩目，也不應產生倒影。⑽要有可靠和充分的電力供應及緊急照明以便安全撤離。三、HIV危害程度及實驗室設置要求針筒內的血要小心緩慢地沿管壁注入試管內，防止血液外濺。實驗室實驗室設計和建造要求⑾墻壁、天花板和地板要光滑且易于清掃，對液體要有防滲透性，對實驗室日常應用的化學藥品及消毒劑要有抗腐蝕性。地面應防滑、無縫隙。⑿實驗臺面應不透水、耐腐蝕、耐高溫。⒀存放高危樣本、培養物、危化品等還需采取其他保安措施，如雙門雙鎖等。應評估生物材料、樣本、危化品和機密資料被盜和被不正當使用的危險，并采取相應防范措施。⒁實驗室危害評估：對新建或已建的HIV抗體檢測實驗室必須作一次實驗活動危害評估，評估內容應根據各實驗室現況、條件、人員，以及具體實驗活動等諸多因素綜合考慮。三、HIV危害程度及實驗室設置要求實驗室設計和建造要求三、HIV危害程度及實驗室設置要求三、HIV危害程度及實驗室設置要求三、HIV危害程度及實驗室設置要求建立健全實驗室安全管理制度體系，實驗室管理層對所有員工和實驗室來訪者的安全負責。實驗室必須建立嚴格的人員準入制度，嚴禁非工作人員進入實驗區域。應有一名有適當資質和經驗的安全負責人協助管理層負責安全工作，安全負責人應運用PDCA工具，制訂安全計劃、組織實施，檢查評估、持續改進。實驗室安全負責人有權阻止不安全的活動。實驗室負責人應制定規定和程序確保實驗室設施、設備、個人防護設備、材料等符合國家有關安全要求，定期檢查、維護、更新，確保不降低其設計性能。實驗室應有程序報告實驗室事件、傷害、事故、職業性疾病以及潛在危險。四、HIV實驗室生物安全管理建立健全實驗室安全管理制度體系，實驗室管理層對所有員工和實驗員工健康管理①有文件證明所有員工對實驗室全部設施中潛在的風險受過培訓。②實驗室所有員工應接受免疫接種以預防可能接觸的生物因子感染，應按有關規定保存免疫記錄。③個人物品、服裝和化妝品應放在清潔區。④食品、飲料及類似物品應在非實驗室區中存放和食用。⑤冰箱應適當標記以明確其用途，醫用冰箱與生活冰箱要區分。⑥實驗室內禁止吸煙。⑦禁止在工作區內使用化妝品和處理隱形眼鏡。⑧在工作區內不應配帶戒指、手鐲等飾品。四、HIV實驗室生物安全管理員工健康管理四、HIV實驗室生物安全管理危險標識①應系統而清晰地標識出危險區，且適用于相關的危險。某些情況下，宜同時使用標記和物質屏障標識出危險區。

②應清楚地標識在實驗室或實驗室設備上使用的具體危險材料。

③通向工作區的所有進出口都應標明存在的危險，尤其應注意火險以及易燃、有毒、放射性、有害和生物危險材料。

④應使涉及的非實驗室員工(如維護人員、合同方、分包方)知道其可能遇到的任何危險。

⑤員工應受培訓，熟悉并掌握相關SOP文件，并能熟練運用。

⑥應標識和評審對孕婦健康和易感人員的潛在危險。

⑦應進行危害評估并記錄。

⑧實驗室管理層應負責定期評審和更新危險標識系統以確保其適用現有的危險，該活動每年應至少進行一次。四、HIV實驗室生物安全管理危險標識四、HIV實驗室生物安全管理HIV抗體檢測主要采集血液樣品，樣品采集的工作人員應掌握相關專業知識和操作技能，能有效地防止病原微生物擴散和感染。樣品采集過程中，工作人員必須清楚意識到待檢樣品的潛在感染性，操作時須戴手套(如果采集已知的HIV感染者或病人的樣本時，應戴雙層手套)，提倡使用真空采血器，若使用普通的注射器，采血后，不得用手摘取針頭，不得給注射器重新“戴帽”，避免刺傷手。針筒內的血要小心緩慢地沿管壁注入試管內，防止血液外濺。試管在注入血液前應認真檢查試管底、管壁有否裂紋和破損。盛有血液的試管必須及時加蓋，并放置于穩妥的試管架上。使用后的真空采血器、普通注射器及止血棉球都含有待檢樣本的血液，必須消毒滅菌處理。五、樣品采集HIV抗體檢測主要采集血液樣品，樣品采集的工作人員應掌握相關若因流行病學調查及疾病監測需要，現場采集樣本時須注意：

①大面積采血時，盡可能避免污染采血現場，工作臺面應使用一次性臺布鋪墊。②受檢人員較多時，應有工作人員維持秩序，防止血液樣本被打翻。③備足消毒液，以便消毒被污染的環境。④工作完畢，應將所用物品打包(針頭等銳器應置于銳器盒內)帶回醫院高壓滅菌后作無害化處理。⑤采集的血液樣本按照有關規定運輸。⑥離開現場前，須對現場進行一次徹底的消毒處理。五、樣品采集若因流行病學調查及疾病監測需要，現場采集樣本時須注意：五、樣醫院內部運輸：一般醫院的采血點與實驗室都有一定的距離，可能在同一樓，或在另一樓，采好的樣本放在規定的容器內送到實驗室，不得徒手拿到實驗室。實驗室間遠程運輸：需利用車、船、飛機等交通工具運輸的樣品，應采用WHO提出的三級包裝系統，根據衛生部2005年第45號令《可感染人類的高致病性病原微生物菌(毒)種或樣本運輸管理規定》的要求，高致病性病原微生物事先應進行規范合適的包裝和標記，辦妥必要的運輸申請手續，方可實施運輸。六、樣品轉移醫院內部運輸：一般醫院的采血點與實驗室都有一定的距離，可能在實驗室接收樣本應在生物安全柜內開啟包裝件，要求工作人員將所有實驗操作移至生物安全柜中進行。安全柜內工作臺面由左至右分為相對清潔區和污染區。檢查盛裝樣品的試管有無破損或滲液情況。發現漏液應立即將存留的樣品移出，并對被污染的試管、試管架和容器作嚴格消毒。應備有適宜的消毒液，以隨時清除濺出物及溢出物。樣品在離心前，最好在實驗室自然放置1-2h。在離心時，最好使用帶有密封離心桶或密封轉頭的離心機分離血清。七、樣品接收、開啟、血清分離實驗室接收樣本應在生物安全柜內開啟包裝件，要求工作人員將所有離心后，應在生物安全柜里開啟試管蓋，推薦使用全自動試管開蓋機開蓋。操作時，盡量避免產生氣溶膠，工作人員的手臂動作幅度不宜過大，以免影響安全柜內的空氣層流。如果是無蓋的試管，應在離心完畢，靜止30min后，再開啟離心機蓋。如發生試管破損，須對離心機進行徹底消毒。操作完畢后，所用的吸管、吸頭、含血球的試管等廢棄物應消毒或高壓滅菌處理。若使用濾紙片作為載體收集樣本，在實驗室內使用緩沖液浸泡、離心收集樣本，參照上述要求處理。七、樣品接收、開啟、血清分離離心后，應在生物安全柜里開啟試管蓋，推薦使用全自動試管開蓋機由于人感染了HIV約在2-3周后機體會逐漸產生抗-HIV抗體，因此檢測HIV抗體就可得知該個體是否感染上HIV，抗體檢測是目前最簡單易行的方法，可在一般的篩查實驗室內進行。HIV抗體檢測目前可使用的樣本包括血液、尿液、唾液等，最常用的是血液。抗體檢測分為初篩和確認兩個步驟，缺一不可。初篩檢測包括：酶聯免疫吸附試驗(ELISA)、顆粒凝集法(PA)、快速檢測法(膠體硒)等。確認實驗：最常用方法是免疫印跡法(westernblot,WB)和條帶免疫印跡法(linearimmunoblotassay,LIA)，其中以WB法最常用。八、樣品檢測由于人感染了HIV約在2-3周后機體會逐漸產生抗-HIV抗體需保存的血清或血漿樣本，按國家高致病性樣本管理要求保存——專用冰箱、登記存檔、專人保管。不需保存的樣本，按實驗室廢棄物處置。廢棄物處置規范：應符合《實驗室生物安全通用要求》(GB19489-2004)和《消毒技術規范》(2002年版)。廢棄物處置：實驗室產生的所有廢棄物，包括不再需要的血液樣品、反應板、陰陽性對照、ELISA標記物、試劑包裝盒等，均應視為感染性廢棄物，按衛部門要求規范處置。記錄：做好廢棄物處置記錄，包括交接登記。滅菌效果監測：用化學指示劑與生物指示劑監測壓力蒸汽滅菌器的滅菌效果。九、剩余樣品及廢棄物處置需保存的血清或血漿樣本，按國家高致病性樣本管理要求保存——專生物安全柜應定期檢查空氣的層流、流速、噪音、泄漏、紫外線強度、高效過濾膜的破損等。每次開啟后首先檢查氣流正常與否，實驗完畢，使用防腐蝕消毒液擦拭安全柜內壁。生物安全柜殼體破損或側壁泄漏出現正壓、或不能正常工作、或報警時，可能室內有生物因子污染，對工作人員存在潛在危害，應立即關閉電源，停止工作，緩慢撤出雙手，降低安全柜氣流外泄。在保持房間負壓和加強個人防護的條件下進行消毒處理，撤離實驗室。生物安全柜的高效過濾膜阻塞時，須請專業人員更換，更換下的濾膜應置于專用塑料袋密封后移出實驗室，送到指定地點銷毀。十、生物安全柜生物安全柜應定期檢查空氣的層流、流速、噪音、泄漏、紫外線強度銳器刺傷處理及報告程序①工作人員發生職業暴露后，按衛生部衛醫發〔2004〕108號《醫務人員艾滋病病毒職業暴露防護工作指導原則》處置。

②立即擠出傷口部位的血，用流動水沖洗，75%酒精或0.5%碘伏消毒傷口。③檢測感染者與被感染者HBVM、HIV等。

④報告實驗室負責人和主管部門，填寫刺傷報告表。

⑤感染者給予預防性治療。

⑥定期隨訪追蹤。十一、實驗室意外及職業暴露處置銳器刺傷處理及報告程序十一、實驗室意外及職業暴露處置生物安全柜內溢灑物溢出處理①實驗室須備足應急使用消毒劑，消毒劑應在有效期內，確保消毒效果。發生意外事故時，應立即采取相應緊急處理措施，并報告實驗室負責人。

②處理溢灑物時不要將頭伸入安全柜內，也不要將臉直接面對前操作口，而應處于前視面板的后方。

③選擇消毒劑時需要考慮消毒劑對生物安全柜的腐蝕性。

④如果溢灑的量不足1ml時，可直接用消毒劑浸濕的紙巾(或其它材料)擦拭。

⑤如溢灑量大或容器破碎，按操作程序消毒。

⑥如果溢灑物流入生物安全柜內部，則視情況，或對生物安全柜進行熏蒸，或請專業維修人員處置。十一、實驗室意外及職業暴露處置生物安全柜內溢灑物溢出處理十一、實驗室意外及職業暴露處置感染性物質溢出的處理①血液溢漏、傾翻于臺面或地面時，應立即消毒處理。②穿著適宜的個體防護裝備(鞋、防護服、口罩、雙層手套、護目鏡等)后進入實驗室。必要時需兩人協同處理溢灑物。

③用紙巾等吸水材料覆蓋溢灑物，從外圍向中心傾倒適量消毒劑，根據感染物性質讓其作用(混合)30-60min。

④小心將吸收了溢灑物的吸水材料連同溢灑物收集到專用的收集袋或容器中，并反復用新的吸水材料將剩余物質吸凈。

⑤破碎的玻璃或其它銳器要用鑷子或鉗子處理，并將它們置于可防刺透的容器(銳器盒)中。

⑥用消毒劑噴灑或擦拭可能被污染的區域，包括手套和防護服。

⑦脫去個體防護裝備，將暴露部位向內折，置于專用的收集袋或容器中封好。

⑧洗手。

⑨處理用具及廢物高壓滅菌。十一、實驗室意外及職業暴露處置感染性物質溢出的處理十一、實驗室意外及職業暴露處置離心管發生破裂處置①離心機正在運行時發生破裂或懷疑發生破裂，應關閉電源，密閉30min使氣溶膠沉降。

②戴結實的手套(如厚橡膠手套)及口罩(避免吸入氣溶膠)。

③使用鑷子清理玻璃碎片，或用鑷子夾著棉球來清理。

④破碎的離心管及離心桶、轉軸和轉子都應放在無腐蝕性的、對微生物具有殺滅作用的消毒劑內浸泡60min以上。

⑤未破損的帶蓋離心管應放在另一個消毒容器中適當浸泡，或用消毒劑徹底擦拭處理。

⑥離心機內腔應用適當濃度的同種消毒劑擦拭。

⑦使用含氯消毒劑后，應再用清水擦拭，并干燥。

⑧清理的全部材料按感染性廢棄物處理。

⑨向實驗室安全員報告，進行事故記錄。十一、實驗室意外及職業暴露處置離心管發生破裂處置十一、實驗室意外及職業暴露處置實驗室內操作人員突然暈倒①其他人員應保持冷靜，迅速更換新手套。②將暈倒人員扶到坐的姿勢，讓暈倒人員的背和頭靠在救護者的胸前。

③救護者用雙手和胳膊架在暈倒人的腋下，將暈倒人員拖至緩沖區。

④用應急電話向室外人員求援。

⑤等待救援人員期間，幫助暈倒人員脫掉口罩、手套，并盡可能脫掉防護服，然后自己脫掉防護服。十一、實驗室意外及職業暴露處置實驗室內操作人員突然暈倒十一、實驗室意外及職業暴露處置衣物污染①盡快脫掉最外層防護服，并注意防止感染性物質進一步擴散。

②將已污染的防護服放入黃色垃圾袋內，高壓滅菌。③脫掉手套，到污染區出口處洗手。④更換防護服和手套。⑤必要時對發生污染及脫防護服的地方進行消毒處理。⑥如果內衣被污染，應立即脫掉已污染的衣物，消毒處理。十一、實驗室意外及職業暴露處置衣物污染十一、實驗室意外及職業暴露處置皮膚粘膜被污染感染性液體(血液、尿液標本或培養物)污染皮膚①立即停止工作，脫掉手套；②用75%的酒精進行皮膚消毒；③再用大量流水沖洗或淋浴(緊急沖淋裝置)。感染性液體濺入眼睛①立即停止工作，脫掉手套；②迅速用洗眼器沖洗(注意水溫和水壓)；③再用生理鹽水沖洗，注意動作輕柔，勿損傷眼睛。兩種情況都應做適當的預防治療和醫學觀察，并報告實驗室安全員進行事故記錄。十一、實驗室意外及職業暴露處置皮膚粘膜被污染十一、實驗室意外及職業暴露處置食入潛在感染性物質①立即脫下受害人的防護服并進行含漱、洗胃、催吐等相關醫學處理。②報告食入材料的鑒定和事故發生的細節，并保留完整適當的醫療記錄。十一、實驗室意外及職業暴露處置食入潛在感染性物質十一、實驗室意外及職業暴露處置潛在危害性氣溶膠釋放(生物安全柜外)①所有人員必須立即撤離相關區域，任何暴露人員都應接受醫學咨詢。

②立即通知實驗室負責人或生物安全管理員，采取相應措施。③為使氣溶膠外排及較大粒子沉降，在一定時間(1h)內嚴禁人員進入；如果實驗室沒有中央通風系統，則應推遲進入實驗室(24h)。

④應張貼“禁止進入”標志。⑤隔相應時間后，在生物安全管理員的指導下，穿戴適宜防護服和呼吸保護裝備清除污染。十一、實驗室意外及職業暴露處置潛在危害性氣溶膠釋放(生物安全柜外)十一、實驗室意外及職業暴ThankyouforyourattentionThankyouforyourattention身體健康，學習進步！身體健康，學習進步！抗HIV篩查實驗室生物安全管理及醫學處置抗HIV篩查實驗室生物安全管理及醫學處置高效空氣過濾器(HEPA)：通常以濾除≥0.3μm微粒為目的，濾除效率符合相關要求的過濾器。安全罩(safetyhood)：置于實驗室工作臺或儀器設備上的負壓排風罩，以減少實驗室工作者的暴露危險。生物安全柜(biologicalsafetycabinet,BSC)：負壓過濾排風柜。防止操作者和環境暴露于實驗過程中產生的生物氣溶膠。個人防護裝備(personalprotectiveequipment,PPE)：用于防止人員受到化學和生物等有害因子傷害的器材和用品。實驗室分區(laboratoryarea)：按照生物因子污染概率的大小，對實驗室進行合理的分區。一、常用術語及定義高效空氣過濾器(HEPA)：通常以濾除≥0.3μm微粒為目緩沖間(bufferroom)：設置在清潔區、半污染區和污染區相臨兩區之間的緩沖密閉室，具有通風系統，其兩個門具有互鎖功能，且不能同時處于開啟狀態。氣鎖(airlock)：氣壓可調節的氣密室，用于連接氣壓不同的兩個相鄰區域，其兩個門具有互鎖功能，不能同時處于開啟狀態。在實驗室中用作特殊通道。定向氣流(directionalairflow)：在氣壓低于外環境大氣壓的實驗室中，從污染概率小且相對壓力高處向污染概率高且相對壓力低處受控制流動的氣流。材料安全數據單(materialsafetydatasheet,MSDS)：提供詳細的危險和注意事項信息的技術通報。一、常用術語及定義緩沖間(bufferroom)：設置在清潔區、半污染區和污一、常用術語及定義一、常用術語及定義Ⅰ級：低個體危害、低群體危害——不會導致健康工作者和動物致病的細菌、真菌、病毒和寄生蟲等生物因子。Ⅱ級：中等個體危害、有限群體危害——能引起人或動物發病，但一般情況下對健康工作者、群體、家畜或環境不會引起嚴重危害的病原體。實驗室感染可能發生，但不會導致嚴重疾病，具有有效治療和預防措施，并且傳播危險有限。Ⅲ級：高個體危害、低群體危害——能引起人類或動物嚴重疾病，造成嚴重經濟損失，但通常不會因偶然接觸而在個體間傳播，或能用抗生素、抗寄生蟲藥物治療的病原體。Ⅳ級：高個體危害、高群體危害——能引起人類或動物非常嚴重的疾病，一般不能治愈，容易直接或間接或因偶然接觸在人與人、或動物與人、或人與動物、或動物與動物之間傳播的病原體。二、生物安全級別與生物因子危害等級Ⅰ級：低個體危害、低群體危害——不會導致健康工作者和動物致病HIV危害程度

①按衛生部2006年《人間傳染的病原微生物名錄》(簡稱《名錄》)，人類免疫缺陷病毒(HIV)危害程度屬于第2類病原微生物。

②根據國務院2004年頒布的424號令《病原微生物實驗室生物安全管理條例》，HIV屬于高致病性病原微生物。HIV檢測實驗室要求

①HIV抗體檢測：HIV抗體檢測實驗室屬于非病毒培養的實驗，僅為血清學檢測，按《名錄》要求，應在符合Ⅱ級生物安全實驗室(BSL-2)要求的HIV抗體檢測實驗室中操作。②HIV分離：研究HIV分離、細胞培養及研究工作按《名錄》要求，應在Ⅲ級生物安全實驗室(BSL-3)中進行。三、HIV危害程度及實驗室設置要求HIV危害程度三、HIV危害程度及實驗室設置要求人間傳染的病原微生物名錄中華人民共和國衛生部制定二○○六年一月十一日人間傳染的病原微生物名錄抗HIV篩查實驗室生物安全管理及醫學處置課件抗HIV篩查實驗室生物安全管理及醫學處置課件抗-HIV檢測實驗室設置①抗-HIV確認實驗室。

②抗-HIV篩查實驗室。

③抗-HIV檢測點。抗-HIV篩查實驗室主要配置：酶標儀、洗板機、離心機、加樣器、普通冰箱、恒溫箱、高壓滅菌器、洗眼器、緊急沖淋裝置、生物安全柜、安全防護用品等。生物安全柜應放置在沒有氣流明顯流動的地方，避免生物安全柜在工作時受到外界氣流的影響導致正常內部層流發生變化。三、HIV危害程度及實驗室設置要求抗-HIV檢測實驗室設置三、HIV危害程度及實驗室設置要求實驗室生物安全水平分級：根據生物因子的危害程度和采取的防護措施，將生物安全防護水平(biosafetylevel，BSL)分為4級：I級防護水平最低，IV級防護水平最高。以BSL-1、BSL-2、BSL-3、BSL-4表示實驗室的相應生物安全防護水平；以ABSL-1、ABSL-2、ABSL-3、ABSL-4表示動物實驗室的相應生物安全防護水平。三、HIV危害程度及實驗室設置要求實驗室生物安全水平分級：根據生物因子的危害程度和采取的防護措三、HIV危害程度及實驗室設置要求三、HIV危害程度及實驗室設置要求個人防護裝備——實驗室防護服實驗室應確保有足量的、有適當防護水平的、清潔的工作服或罩衫等防護服可供使用。清潔防護服不用時，應置于專用處存放。防護服被污染應立即更換，污染的防護服應置于有適當標記的、防漏的袋(箱)中存放并即時處置。間隔一定時間應更換防護服以確保清潔。離開實驗室時，防護服必須脫下并留在實驗室內，不得穿著外出，更不能攜帶回家。三、HIV危害程度及實驗室設置要求個人防護裝備——實驗室防護服三、HIV危害程度及實驗室設置要個人防護裝備——手套檢驗人員工作或接觸感染及潛在感染材料、物表、設備時應戴手套，以防生物因子、化學品、電離輻射污染，并防刺傷、擦傷、動物抓咬傷等。若發生感染性材料的溢出或濺出，宜戴雙層手套。檢驗人員應接受手套選擇、配戴、使用、摘除的培訓。所戴手套應滿足舒適、靈活、耐磨、耐扎、耐撕、無破損要求。手套戴好后應完全遮住手及腕部，如必要，可覆蓋實驗室長罩服或外衣袖子。手套破損、污染時，應更換手套。手套為實驗室工作專用，不得戴著手套離開實驗室。工作完成后應摘除手套并安全處置。一次性手套不得再次使用。三、HIV危害程度及實驗室設置要求個人防護裝備——手套三、HIV危害程度及實驗室設置要求個人防護裝備——鞋鞋應舒適，鞋底應防滑。推薦使用皮制或合成材料的防滲漏液體的鞋類。從事可能出現漏液的工作時，應穿一次性防水鞋套。實驗室的特殊區域(如在防靜電要求的區域)或BSL-3和BSL-4實驗室工作時，應使用橡膠靴子等專用鞋。三、HIV危害程度及實驗室設置要求個人防護裝備——鞋三、HIV危害程度及實驗室設置要求個人防護裝備——呼吸防護裝備一些實驗操作不可能在生物安全柜內進行而必須采取外部操作時，為防止感染性材料濺出或霧化危害，必須使用面部保護裝置。當要求使用呼吸防護裝備，如面罩、個人呼吸器、正壓服等時，應經培訓并嚴格按SOP文件操作。應對呼吸器作個體適合性測試，并加強對呼吸器使用者的監控和醫學評估，確保正確使用。進行容易產生高危害氣溶膠或易濺出高危害液體的操作時，應在生物安全柜或其他物理防護設備中進行，并使用個體其他防護裝備，如護目鏡、面罩、個體呼吸保護用品或防濺保護裝備等。三、HIV危害程度及實驗室設置要求個人防護裝備——呼吸防護裝備三、HIV危害程度及實驗室設置要實驗室設計和建造要求⑴無特殊選址要求，建筑應遵守國家、地方及實驗室專用建筑安全標準。實驗區與辦公區要分開，實驗室需劃分污染區、半污染區與清潔區。⑵實驗室應設在耐火等級不低于二級的建筑物內，設計應保證對技術區域中生物、化學、輻射和物理危害的防護水平控制在經過評估的風險程度范圍內，防止風險進入周圍環境。⑶實驗室能開啟的窗戶必須安裝防昆蟲進入的紗窗，下水道和排風管道應安裝防老鼠等動物進入的鐵網。⑷生物安全防護二級實驗室必須滿足本標準一級生物安全防護實驗室中實驗室設計和建造的特殊要求各款的要求。⑸配備各種消毒方法的設施，安裝紫外線消毒燈或人機共存消毒機，高壓滅菌器、化學消毒裝置等。三、HIV危害程度及實驗室設置要求實驗室設計和建造要求三、HIV危害程度及實驗室設置要求針筒內的血要小心緩慢地沿管壁注入試管內，防止血液外濺。實驗室感染可能發生，但不會導致嚴重疾病，具有有效治療和預防措施，并且傳播危險有限。③通向工作區的所有進出口都應標明存在的危險，尤其應注意火險以及易燃、有毒、放射性、有害和生物危險材料。建立健全實驗室安全管理制度體系，實驗室管理層對所有員工和實驗室來訪者的安全負責。①所有人員必須立即撤離相關區域，任何暴露人員都應接受醫學咨詢。檢驗人員工作或接觸感染及潛在感染材料、物表、設備時應戴手套，以防生物因子、化學品、電離輻射污染，并防刺傷、擦傷、動物抓咬傷等。實驗室分區(laboratoryarea)：按照生物因子污染概率的大小，對實驗室進行合理的分區。緩沖間(bufferroom)：設置在清潔區、半污染區和污染區相臨兩區之間的緩沖密閉室，具有通風系統，其兩個門具有互鎖功能，且不能同時處于開啟狀態。廢棄物處置：實驗室產生的所有廢棄物，包括不再需要的血液樣品、反應板、陰陽性對照、ELISA標記物、試劑包裝盒等，均應視為感染性廢棄物，按衛部門要求規范處置。HIV抗體檢測主要采集血液樣品，樣品采集的工作人員應掌握相關專業知識和操作技能，能有效地防止病原微生物擴散和感染。實驗室接收樣本應在生物安全柜內開啟包裝件，要求工作人員將所有實驗操作移至生物安全柜中進行。②穿著適宜的個體防護裝備(鞋、防護服、口罩、雙層手套、護目鏡等)后進入實驗室。實驗室設計和建造要求⑹就近設置洗眼器和緊急沖淋裝置，并有足夠的洗手池。⑺實驗室需有限制進入設施，入口和出口應可分辨，入口應有可鎖閉的門(門鎖應不妨礙緊急疏散)并貼生物危險等標記，非授權人員未經許可不得入內，通向出口的通道應無障礙，應設緊急出口并有發光指示標記，緊急撤離路線應有在黑暗中可辨的標識。⑻實驗室宜有適當的通風換氣次數，應對空氣的流動速度進行常規監測以保證足夠的通風和防止潛在傳染因子和有害氣體的擴散。⑼實驗室內溫度、濕度、照度、噪聲和潔凈度等內環境符合要求，照明要充足，光線不要眩目，也不應產生倒影。⑽要有可靠和充分的電力供應及緊急照明以便安全撤離。三、HIV危害程度及實驗室設置要求針筒內的血要小心緩慢地沿管壁注入試管內，防止血液外濺。實驗室實驗室設計和建造要求⑾墻壁、天花板和地板要光滑且易于清掃，對液體要有防滲透性，對實驗室日常應用的化學藥品及消毒劑要有抗腐蝕性。地面應防滑、無縫隙。⑿實驗臺面應不透水、耐腐蝕、耐高溫。⒀存放高危樣本、培養物、危化品等還需采取其他保安措施，如雙門雙鎖等。應評估生物材料、樣本、危化品和機密資料被盜和被不正當使用的危險，并采取相應防范措施。⒁實驗室危害評估：對新建或已建的HIV抗體檢測實驗室必須作一次實驗活動危害評估，評估內容應根據各實驗室現況、條件、人員，以及具體實驗活動等諸多因素綜合考慮。三、HIV危害程度及實驗室設置要求實驗室設計和建造要求三、HIV危害程度及實驗室設置要求三、HIV危害程度及實驗室設置要求三、HIV危害程度及實驗室設置要求建立健全實驗室安全管理制度體系，實驗室管理層對所有員工和實驗室來訪者的安全負責。實驗室必須建立嚴格的人員準入制度，嚴禁非工作人員進入實驗區域。應有一名有適當資質和經驗的安全負責人協助管理層負責安全工作，安全負責人應運用PDCA工具，制訂安全計劃、組織實施，檢查評估、持續改進。實驗室安全負責人有權阻止不安全的活動。實驗室負責人應制定規定和程序確保實驗室設施、設備、個人防護設備、材料等符合國家有關安全要求，定期檢查、維護、更新，確保不降低其設計性能。實驗室應有程序報告實驗室事件、傷害、事故、職業性疾病以及潛在危險。四、HIV實驗室生物安全管理建立健全實驗室安全管理制度體系，實驗室管理層對所有員工和實驗員工健康管理①有文件證明所有員工對實驗室全部設施中潛在的風險受過培訓。②實驗室所有員工應接受免疫接種以預防可能接觸的生物因子感染，應按有關規定保存免疫記錄。③個人物品、服裝和化妝品應放在清潔區。④食品、飲料及類似物品應在非實驗室區中存放和食用。⑤冰箱應適當標記以明確其用途，醫用冰箱與生活冰箱要區分。⑥實驗室內禁止吸煙。⑦禁止在工作區內使用化妝品和處理隱形眼鏡。⑧在工作區內不應配帶戒指、手鐲等飾品。四、HIV實驗室生物安全管理員工健康管理四、HIV實驗室生物安全管理危險標識①應系統而清晰地標識出危險區，且適用于相關的危險。某些情況下，宜同時使用標記和物質屏障標識出危險區。

②應清楚地標識在實驗室或實驗室設備上使用的具體危險材料。

③通向工作區的所有進出口都應標明存在的危險，尤其應注意火險以及易燃、有毒、放射性、有害和生物危險材料。

④應使涉及的非實驗室員工(如維護人員、合同方、分包方)知道其可能遇到的任何危險。

⑤員工應受培訓，熟悉并掌握相關SOP文件，并能熟練運用。

⑥應標識和評審對孕婦健康和易感人員的潛在危險。

⑦應進行危害評估并記錄。

⑧實驗室管理層應負責定期評審和更新危險標識系統以確保其適用現有的危險，該活動每年應至少進行一次。四、HIV實驗室生物安全管理危險標識四、HIV實驗室生物安全管理HIV抗體檢測主要采集血液樣品，樣品采集的工作人員應掌握相關專業知識和操作技能，能有效地防止病原微生物擴散和感染。樣品采集過程中，工作人員必須清楚意識到待檢樣品的潛在感染性，操作時須戴手套(如果采集已知的HIV感染者或病人的樣本時，應戴雙層手套)，提倡使用真空采血器，若使用普通的注射器，采血后，不得用手摘取針頭，不得給注射器重新“戴帽”，避免刺傷手。針筒內的血要小心緩慢地沿管壁注入試管內，防止血液外濺。試管在注入血液前應認真檢查試管底、管壁有否裂紋和破損。盛有血液的試管必須及時加蓋，并放置于穩妥的試管架上。使用后的真空采血器、普通注射器及止血棉球都含有待檢樣本的血液，必須消毒滅菌處理。五、樣品采集HIV抗體檢測主要采集血液樣品，樣品采集的工作人員應掌握相關若因流行病學調查及疾病監測需要，現場采集樣本時須注意：

①大面積采血時，盡可能避免污染采血現場，工作臺面應使用一次性臺布鋪墊。②受檢人員較多時，應有工作人員維持秩序，防止血液樣本被打翻。③備足消毒液，以便消毒被污染的環境。④工作完畢，應將所用物品打包(針頭等銳器應置于銳器盒內)帶回醫院高壓滅菌后作無害化處理。⑤采集的血液樣本按照有關規定運輸。⑥離開現場前，須對現場進行一次徹底的消毒處理。五、樣品采集若因流行病學調查及疾病監測需要，現場采集樣本時須注意：五、樣醫院內部運輸：一般醫院的采血點與實驗室都有一定的距離，可能在同一樓，或在另一樓，采好的樣本放在規定的容器內送到實驗室，不得徒手拿到實驗室。實驗室間遠程運輸：需利用車、船、飛機等交通工具運輸的樣品，應采用WHO提出的三級包裝系統，根據衛生部2005年第45號令《可感染人類的高致病性病原微生物菌(毒)種或樣本運輸管理規定》的要求，高致病性病原微生物事先應進行規范合適的包裝和標記，辦妥必要的運輸申請手續，方可實施運輸。六、樣品轉移醫院內部運輸：一般醫院的采血點與實驗室都有一定的距離，可能在實驗室接收樣本應在生物安全柜內開啟包裝件，要求工作人員將所有實驗操作移至生物安全柜中進行。安全柜內工作臺面由左至右分為相對清潔區和污染區。檢查盛裝樣品的試管有無破損或滲液情況。發現漏液應立即將存留的樣品移出，并對被污染的試管、試管架和容器作嚴格消毒。應備有適宜的消毒液，以隨時清除濺出物及溢出物。樣品在離心前，最好在實驗室自然放置1-2h。在離心時，最好使用帶有密封離心桶或密封轉頭的離心機分離血清。七、樣品接收、開啟、血清分離實驗室接收樣本應在生物安全柜內開啟包裝件，要求工作人員將所有離心后，應在生物安全柜里開啟試管蓋，推薦使用全自動試管開蓋機開蓋。操作時，盡量避免產生氣溶膠，工作人員的手臂動作幅度不宜過大，以免影響安全柜內的空氣層流。如果是無蓋的試管，應在離心完畢，靜止30min后，再開啟離心機蓋。如發生試管破損，須對離心機進行徹底消毒。操作完畢后，所用的吸管、吸頭、含血球的試管等廢棄物應消毒或高壓滅菌處理。若使用濾紙片作為載體收集樣本，在實驗室內使用緩沖液浸泡、離心收集樣本，參照上述要求處理。七、樣品接收、開啟、血清分離離心后，應在生物安全柜里開啟試管蓋，推薦使用全自動試管開蓋機由于人感染了HIV約在2-3周后機體會逐漸產生抗-HIV抗體，因此檢測HIV抗體就可得知該個體是否感染上HIV，抗體檢測是目前最簡單易行的方法，可在一般的篩查實驗室內進行。HIV抗體檢測目前可使用的樣本包括血液、尿液、唾液等，最常用的是血液。抗體檢測分為初篩和確認兩個步驟，缺一不可。初篩檢測包括：酶聯免疫吸附試驗(ELISA)、顆粒凝集法(PA)、快速檢測法(膠體硒)等。確認實驗：最常用方法是免疫印跡法(westernblot,WB)和條帶免疫印跡法(linearimmunoblotassay,LIA)，其中以WB法最常用。八、樣品檢測由于人感染了HIV約在2-3周后機體會逐漸產生抗-HIV抗體需保存的血清或血漿樣本，按國家高致病性樣本管理要求保存——專用冰箱、登記存檔、專人保管。不需保存的樣本，按實驗室廢棄物處置。廢棄物處置規范：應符合《實驗室生物安全通用要求》(GB19489-2004)和《消毒技術規范》(2002年版)。廢棄物處置：實驗室產生的所有廢棄物，包括不再需要的血液樣品、反應板、陰陽性對照、ELISA標記物、試劑包裝盒等，均應視為感染性廢棄物，按衛部門要求規范處置。記錄：做好廢棄物處置記錄，包括交接登記。滅菌效果監測：用化學指示劑與生物指示劑監測壓力蒸汽滅菌器的滅菌效果。九、剩余樣品及廢棄物處置需保存的血清或血漿樣本，按國家高致病性樣本管理要求保存——專生物安全柜應定期檢查空氣的層流、流速、噪音、泄漏、紫外線強度、高效過濾膜的破損等。每次開啟后首先檢查氣流正常與否，實驗完畢，使用防腐蝕消毒液擦拭安全柜內壁。生物安全柜殼體破損或側壁泄漏出現正壓、或不能正常工作、或報警時，可能室內有生物因子污染，對工作人員存在潛在危害，應立即關閉電源，停止工作，緩慢撤出雙手，降低安全柜氣流外泄。在保持房間負壓和加強個人防護的條件下進行消毒處理，撤離實驗室。生物安全柜的高效過濾膜阻塞時，須請專業人員更換，更換下的濾膜應置于專用塑料袋密封后移出實驗室，送到指定地點銷毀。十、生物安全柜生物安全柜應定期檢查空氣的層流、流速、噪音、泄漏、紫外線強度銳器刺傷處理及報告程序①工作人員發生職業暴露后，按衛生部衛醫發〔2004〕108號《醫務人員艾滋病病毒職業暴露防護工作指導原則》處置。

②立即擠出傷口部位的血，用流動水沖洗，75%酒精或0.5%碘伏消毒傷口。③檢測感染者與被感染者HBVM、HIV等。

④報告實驗室負責人和主管部門，填寫刺傷報告表。

⑤感染者給予預防性治療。

⑥定期隨訪追蹤。十一、實驗室意外及職業暴露處置銳器刺傷處理及報告程序十一、實驗室意外及職業暴露處置生物安全柜內溢灑物溢出處理①實驗室須備足應急使用消毒劑，消毒劑應在有效期內，確保消毒效果。發生意外事故時，應立即采取相應緊急處理措施，并報告實驗室負責人。

②處理溢灑物時不要將頭伸入安全柜內，也不要將臉直接面對前操