實驗一3硝基水酸比色定糖目的要1.握35-硝基水酸比色法定的原理方法2.3硝基水酸定糖測定山芋份的總糖及還原糖。3.悉721分光光度計原理及用方法實驗原3，5-二硝基楊酸與還原共熱后還原成棕紅的氨基合物，在一定范圍，還原糖的和反應的顏色強度比例關，利用比色可測知品的含量。該方法半微量糖法，操作便，快，雜質干擾少。實驗操方法一、葡糖標準曲線制定取9支試管，分別下表順加入各種試：將上述管溶液混勻，在721光光度上用520納米行比色定，用空白溶液調零點記錄光收值。以葡糖濃度橫坐標，光收值為坐標繪出標準曲線二、山粉中總糖和原糖含的測定1.樣中還原的提取：準稱取2克山芋粉，放100毫燒杯，加入85%乙醇50升，混，在恒溫水中保溫鐘，過，濾渣再用85%醇提取次將濾液并，蒸去醇，少量水移入100升容量瓶，用水稀到刻度，備。2.樣中總糖水解及提取準確稱山芋粉1克，放大試管，加入10升鹽酸和15升蒸餾。混均，在水浴中熱半時后，碘化-碘溶液查水解程度若已水完全，則不現藍色冷卻后加入酞指示1滴，以10%氫氧化中和至液呈微紅色過濾并容至毫。再精確吸上述溶10毫升放人升容量瓶，稀釋刻度，備用

3.樣中含糖的測定：取大試管，別按下加入各種試：將各管勻后，按制標準曲時同樣的操測定各的光密度，標準曲線上出相應的還糖含量按下述公式算出山粉內還原糖總糖的分含量總糖

水解后還原糖毫克數品釋倍數樣品重量

100還原一、試

還原克品稀釋數樣品試劑和材

100（135-硝基水酸試劑（稱試劑：甲液：解6.9克結晶于毫IO%氧化鈉，并稀釋至升，在此溶中加入6.9亞硫酸鈉。乙液：取255克酒酸鈉，加到300毫升10%氫氧化鈉中，再入毫升5-硝基水酸溶液將甲液乙液相混合得黃色劑，貯于棕試劑瓶。在室溫下放置7—天以后用。（20.1%葡萄糖標液：準確取100毫分析純的葡糖預先在105℃干燥至重，少量蒸水溶解后定至100毫升，冰箱保備用。（3）酸溶液（410%氫氧鈉溶液（5）化鉀-溶液碘試劑（6）酚酞指示。（7）85%醇。二、器（1）管和試架。（2）堿定管（毫升（3）臺。（4）滴定夾。（5）量管（1毫升和2毫升。（6容量瓶（100升。（7）水浴鍋（）玻璃漏斗和燒。（9）鐵三架。（10）筒（10升、100毫（）電熱恒溫水浴（煤氣燈。

（）玻璃棒。（白瓷板。（721分光度計思考題1.比測定的作要點是什？基本理是什么？2.721型光光度的原理及使時的注事項是什么3.比測定時什么要設計白管？4.糖包括哪化合物答：1.）比色測定操作要：相同型號的色管.2.配制等體的系列標準品.3.制待測樣與標準品等體積).4.比,找出相的濃度DNS的原理：在堿性條下，還糖3,5-二硝水楊酸熱，3,5-硝基水楊酸還原為棕紅的3-基-5-硝水楊酸，而原糖則氧化成糖酸其它產物在一定范圍，還原的量與棕紅物質顏深淺的程度呈一定比例關，540nm長下測定棕色物質消光值，對標準線可求出樣中還原的含量。2.分光光度計的本依據朗伯—比耳律，它根據相對測原理工的，即先選某一溶劑作標準溶，設定其透率為100%被測試的透光率是相對于準溶液而言，即讓色光分別通被測試和標準溶液二者能的比值是在一定波下對于測試樣的透率。實驗注事項（1為了防光電管疲勞不測定必須將試樣蓋打開使光路切，以延長光管的使壽命。（）取拿比色時，手只能捏住比皿的毛璃面而不能比色皿的光表面。（）比色皿不用堿溶或氧化性強洗滌液滌，不能用刷清洗。比皿外壁著的水或溶應用擦紙或細而軟吸水紙干，不要擦，以免傷它的學表面3.用空白管調整位時，器和試劑等成的系誤差就可以消或減到最低程度上面說是一般概念在很多驗中都是這做，或以標準試樣空白試，就是為降低系統誤。4.總