1、尿液有形成分分析的方法學開展摘要隨著科學技術(shù)的日新月異，尿液有形成分的臨床檢驗方法發(fā)生了根本性的變化。從過去簡單的目測顏色、性狀到顯微鏡檢查高倍估計,從干化學的初篩檢驗到尿液流式細胞儀全自動分析,大大進步了尿液檢驗速度,而且為尿液有形成分檢驗標準化奠定了基矗本文就近年來國內(nèi)尿液有形成分檢驗中傳統(tǒng)顯微鏡檢查和現(xiàn)代干化學分析與流式全自動分析檢驗的結(jié)合在臨床上的應用作一綜述。關(guān)鍵詞尿液；有形成分；顯微鏡檢查；尿干化學；尿流式分析1尿液有形成分檢測的意義在尿液形成過程中，泌尿道常有組織的脫落物和細胞滲出，尿離體離心或自行沉降，其沉降物稱為尿沉渣,是尿液中的有形成分，包括細胞、管型、細菌、霉菌、結(jié)晶、藥

2、物等。尿沉渣檢查是尿液分析的重要組成部分，以往直接將尿離心，取沉渣在顯微鏡下檢查，稱為“尿沉渣檢查1，而目前開展的流式原理自動化檢查方法，無需離心即可直接分析尿中有形成分，稱為尿有形成分分析2。近年來強調(diào)分析尿中所有顆粒，即細胞、管型、細菌、霉菌、結(jié)晶、藥物等。尿液有形成分分析可確定進入尿路中的細胞種類，如紅細胞增多常提示尿路出血，進一步檢查紅細胞形態(tài)那么有助于確定血尿來源；白細胞增多那么提示尿路感染；不同尿路上皮細胞增多有助于判斷各種尿路病變部位。管型增多那么提示腎小球腎炎、腎小管(遠端，集合管病變)及腎功能減退，所以說尿液有形成分分析可反映泌尿系統(tǒng)各部位的變化，協(xié)助對泌尿系統(tǒng)疾病進展診斷、

3、定位、鑒別及預后判斷等，為泌尿系統(tǒng)疾病診斷提供可靠根據(jù)。難怪有人稱尿沉渣檢查為“體外無創(chuàng)性腎活檢3。2傳統(tǒng)尿液有形成分的檢驗尿液有形成分分析有多種方法，而目前臨床常用的包括顯微鏡檢查法、干化學方法和流式細胞法。傳統(tǒng)的離心后顯微鏡檢查法,即取混勻的新穎尿液10l于一刻度管內(nèi)，用回轉(zhuǎn)半徑15的程度離心機以1500r/in(RF=378G)沉淀5in，取出離心管傾去上層液體使剩約0.2l，混勻管底沉淀物，用吸管吸出沉淀物的20l，滴于載玻片上，用蓋玻片覆蓋后鏡檢。先用低倍鏡(1010倍)觀察全片，再用高倍鏡(1040倍)仔細觀察，細胞以高倍鏡所見最低和最高數(shù)字表示，管型以低倍鏡所見最低和最高數(shù)字表示

4、4。這種傳統(tǒng)方法受操作者主觀影響誤差較大，重復性差，判斷不標準，不易定量，報告結(jié)果不利于臨床動態(tài)觀察，是缺乏標準化的實驗方法。3干化學對尿液有形成分的初篩20世紀80年代,90年代臨床上大量使用干化學分析儀方法,尿干化學分析儀對尿中紅細胞、白細胞檢測是應用化學方法進展的。對尿中白細胞的測定是基于中性粒細胞胞漿內(nèi)含有酯酶，可催化吲哚酚酯分解出吲哚酚，后者再與重氮鹽反響呈現(xiàn)紫色復合物，其顏色深淺與細胞多少呈比例關(guān)系，但淋巴細胞不含酯酶，那么不與淋巴細胞發(fā)生反響。此外高比重尿，尿中含有頭孢霉素、慶大霉素、四環(huán)素、硼酸、草酸也可致假陰性。尿中含有里甲醛、呋喃坦啶及大量膽紅素，氧化型清潔劑那么可致假陰性

5、。尿干化學分析儀對紅細胞測定是利用血紅蛋白(Hb)具有過氧化氫酶樣活性，可使過氧化氫茴香素或過氧化氫稀枯分解出，后者能氧化色原使其顯色，它既可測完好HB，也可測游離Hb，此法最大問題是受易熱酶干擾。在尿液中常存在類過氧化酶性的物質(zhì)，其具有Hb一樣的氧化色原的作用，造成紅細胞結(jié)果偏高或出現(xiàn)假陽性。對尿中細菌的檢測主要基于尿液中細菌能產(chǎn)生的亞硝酸鹽含量，只有尿中致病菌含有硝酸鹽復原酶時，且尿中含有適量硝酸鹽，允許細菌與尿液充分作用(在膀胱停留間隔h)，否那么試驗將出現(xiàn)假陰性5。干化學分析儀靈敏度較高，相對特異性較差，假陽性較多，只能作為患者診斷的初篩，不能作為確診的根據(jù)。干化學分析對尿中紅白細胞的

6、檢查不能代替顯微鏡，大量的臨床試驗證明,只有在干化學結(jié)果尿蛋白，尿亞硝酸鹽，尿白細胞(B)，尿RB結(jié)果均為陰性且尿液來自非泌尿系疾病患者，才可視為尿液中的RB，B數(shù)量在參考范圍內(nèi)可免于鏡檢6。尿有形成分分析是尿常規(guī)檢驗的核心，具有非常重要的臨床價值，而要獲得有價值的實驗資料，就必須實行標準化、標準化的尿沉渣檢查。4尿液有形成分的標準化建議及參考值5尿流式對尿液有形成分的檢驗隨著自動化儀器的應用，為尿有形成分定量提供了新的方法。Sysex公司消費的UF-50,UF-100尿液分析儀是根據(jù)流式細胞術(shù)設(shè)計的專門用于尿沉渣檢查的儀器。該儀器所用尿液不用離心，經(jīng)熒光染色后，應用鞘流技術(shù)將尿中有形成分單個

7、有序通過檢測系統(tǒng)。根據(jù)檢測后發(fā)出的熒光強度和在前向角測定的散射激光強度以及脈沖的大小綜合分析，報告尿中的有形成分種類和數(shù)量，儀器可自動報告紅細胞、白細胞、上皮細胞、管型、細菌5個定量參素數(shù)，還可測出尿液電導率指標。另外，研究說明，假如采用定量報告方式(/l)，最好采用不離心多數(shù)量計數(shù)法9。尿液離心鏡檢是將尿液離心再懸浮后鏡檢計數(shù)的一種方法，可能受到離心部分變形溶解或離心沉淀不完全等因素影響，要比實際理論值明顯減低10。UF100作為一種尿有形成分流式定量計數(shù)儀器，最大檢測速度每小時可到達100個樣本,用于成形成分快速挑選，進展標本常規(guī)定量是合適臨床應用的。在大工作量環(huán)境下，即保證了檢驗速度又保

8、證了檢測質(zhì)量，為臨床診斷提供了可靠根據(jù)11。6尿液有形成分檢驗方法比較總的看來,顯微鏡檢查方法是尿液有形成分的金標準,在目前儀器分析細胞仍存在許多局限性,產(chǎn)生疑問時必需鏡檢確診，但它費時，重復性差，結(jié)果隨意性大，不易定量，受操作者主觀影響，判斷不標準，結(jié)果不利于臨床動態(tài)觀察。干化學方法具有所需尿量少，操作方法簡便，檢測速度快，重復性較好，對幾項化學成分分析從定性進入半定量報告方式，但它對有形成分檢測有一定局限性，尿液中存在一定量的干擾物質(zhì)，可導致檢測結(jié)果呈假陰性或假陽性，只合適于臨床的初篩工作。尿流式細胞分析儀方法具有標本無須離心，檢測速度快，病理成分敏感度及重復性好，且由于每份標本檢測步驟形

9、式一致便于質(zhì)量控制及標準化，但它不能檢出滴蟲、脂肪滴、病理及藥物結(jié)晶,也不能識別腫瘤細胞,當尿中存在大量細菌、酵母菌、結(jié)晶等顆粒可干擾紅細胞計數(shù),也不能識別影型紅細胞及病理管型12，見表1。表1尿液有形成分主要3種檢測方法比較略傳統(tǒng)手工鏡檢法由于操作要求高、費時，且不能定量報告結(jié)果。隨著尿液檢查方法的標準化、標準化，尿有形成分定量法測定已被推廣。目前可采用尿液干化學分析，尿流式分析儀(UF-100)，尿沉渣手工鏡檢三者相結(jié)合的檢測方法。以UF100型尿流式分析儀和尿液干化學分析作為過篩手段，可以在3小時以內(nèi)將住院患者尿液標本檢測完畢，符合“尿沉渣顯微鏡檢查標準化建議規(guī)定，保證了檢驗質(zhì)量并大大進步了工作效率。真正實現(xiàn)了尿沉渣從理化檢查到沉渣檢查全程自動化，將同一檢測目的的幾種主要方法有機的整合在一起，對同一份標本的不同方法結(jié)果(干化學、尿流式、沉渣計數(shù))進展形式匹配，方法學優(yōu)勢互補，特別是干化學的快速簡便和尿流式細胞分析儀對有形成分定量分析的準確性及自動化，從而可以有效地降低手工鏡檢地勞動強度。采用干化學和尿流式進展過篩不是取消鏡檢而是更好地鏡檢，往往儀器給出異常結(jié)果，要靠顯微鏡檢查來驗證、校準和補充，這樣的工作流程是科學的，檢驗結(jié)果是有保證的，是符合檢驗醫(yī)學開展趨勢的。參