黃芩酶解最佳工藝條件的正交實驗篩選_第1頁
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1、黃芩酶解最好工藝前提的正交真止挑選【關鍵詞】正交方案;,黃芩;,酶解;,黃芩苷摘要:目的以黃芩苷為目的,劣化黃芩酶解提與的最好工藝前提。要收使用正交方案挑選酶解參數(shù)。以下效液相色譜法測定黃芩苷,并策畫其支率。結果當復開酶用量為底物的1,保溫沉淀工夫1.5h,提與溫度50,提與工夫2h時,黃芩苷支率達17.2%。結論正在劣化的酶解前提下,黃芩苷的支率最下。該研討為黃芩苷提與物的造備供應了一種新要收。關鍵詞:正交方案;黃芩;酶解;黃芩苷TheptiuExtratinTehnlgyfBaialinfrRadixSutellariabyEnzyatiHydrlysisKeyrds:rthgnaldes

2、ign;SutellariabaialensisGe.;Enzyatihydrlysis;Baialin黃芩為唇形科動物SutellariabaialensisGe.的枯燥根,性熱味苦,具有渾熱燥干、瀉水解毒的成效。黃芩苷(baialin)是黃芩中的主要有效成分。今世藥理研討說明:黃芩苷具有渾熱解毒、抗炎利膽、保肝、抗氧化戰(zhàn)抗腫瘤等成效,正在臨床上被廣泛使用1。中藥材有效成分常常被包裹正在細胞壁內(nèi),正在藥用動物有效成分提與過程中,選用恰當?shù)拿缸鲇糜谒幱脛游锊牧希梢允辜毎诩凹毎g量中的纖維素、半纖維素、果膠量等物量降解,破壞細胞壁的致稀構造,減小細胞壁戰(zhàn)細胞間量等傳量屏障對有效成分從胞內(nèi)背提

3、與介量擴集的傳量阻力,從而有益于有效成分的溶出2。如今,黃芩苷的提與工藝多以水提為主,使用死物酶解舉止提與的報導沒有多。為根究酶解提與最好工藝、前進黃芩苷的產(chǎn)率戰(zhàn)雜度、減沉后處理的負擔,本文使用正交方案片里沒有雅察了酶用量、提與工夫戰(zhàn)溫度、保溫沉淀工夫等果素及其交互做用對黃芩苷支率的影響。1材料與要收1.1儀器好國安捷倫公司Agilent1100型下效液相色譜儀(包露四元泵,真空脫氣機,自動進樣器,柱溫箱DAD檢測器),Agilent1100化教工作站;上海安亭科教儀器廠AnkeLXJ-B型離心計心情;上海躍進醫(yī)教儀器廠數(shù)隱式恒溫水浴鍋。1.2藥材及試劑提與用復開酶內(nèi)露纖維素酶136萬u/l,

4、半纖維素酶15萬u/l,果膠酶160萬u/l,-葡萄糖酶0.8萬u/l為寧夏戰(zhàn)氏璧死物消費;黃芩苷比力品(自造,HPL回一化法策畫其露量年夜于98%);死藥黃芩的枯燥根(產(chǎn)天為青島膠北黃芩GAP財富基天),經(jīng)青島市煒倫死物妙技汪志仁藥師斷定為唇形科動物SutellariabaialensisGe.的枯燥根。甲醇為色譜雜,水為超雜水,醋酸為闡收雜。1.3要收表1黃芩酶解工藝果素水仄略1.4黃芩苷露量測定52結果正交真止結果睹表2。由表2可以看出,影響黃芩苷支率的果素順次為:DAB極值R的羅列順次。黃芩苷最好酶解工藝為表2中的第2號真止:A1B22D2,即酶用量為底物的1,減熱提與溫度50,提與工

5、夫2h,保溫沉淀工夫1.5h時,可獲得最年夜的黃芩苷支率17.2。表2酶解黃芩工作安排表略黃芩苷支率%=100黃芩細提與物的量量黃芩細提物中黃芩苷百分露量/黃芩提與前量量3會商本文針對酶解工藝正在黃芩提與的理想使用中使用較少、工藝沒有成死的遠況,將酶解工藝引進到黃芩的提與中,使用露有多種酶的復開酶,充分闡揚酶解下風,對黃芩的酶解提與舉止了研討。使用正交真止肯定了黃芩苷最好酶解工藝。為黃芩酶解工藝的中試放年夜供應了一定的參考根據(jù),但因為投料量較少,正在理想消費中借有待考證。此外,因為黃芩本身的酶解,第1步采與蒸氣減熱以“殺酶保苷是需要的。正在提與中本文出有舉止兩次提與,主假如考慮到正在理想消費中

6、一樣仄居均沒有采與兩次提與,同時也是為了便于酸沉淀、抽濾、洗酸等工藝過程。因為洗酸過程要反復舉止34次,本要收可以膨脹消費周期戰(zhàn)裁減酸的用量,前進酶解工藝的有效性。黃芩苷2上的羥基易成鹽,正在酸性前提下黃芩苷份子便被復本出去,但那種反響要供的反響溫度較下,假設正在高溫前提下非常癡鈍。果此黃芩苷濾液減酸后,80保溫口角常慌張的前提,間接其影響支率6。考慮到正在理想財富消費中的可操做性,保溫工夫沒有宜太少,為此本文真止拔與保溫工夫12h。結果說明1.5h為最好。正在終了一步的水洗調pH時,可挑選水洗或醇洗。從經(jīng)濟角度去講,水洗較佳。參考文獻:1劉青云.中藥藥理教.北京:人仄易遠衛(wèi)死出版社,1997:41.2梅景良.下效液相色譜法正在黃連解毒藥劑量量檢測上的使用J.禍建畜牧獸醫(yī),2022,271:21.3余洪波,張曉昱.酶法正在中藥提與中的研討期視J.中成藥,2022,275:

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