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文檔簡介
1、關于酵母細胞的固定化課件第一張,PPT共二十六頁,創作于2022年6月教學目標知識與能力1. 了解固定化酶在生產實踐中的優點。3. 掌握固定化酶或細胞的方法。 2. 掌握固定化酶和固定化細胞的作用和原理。 4. 產是指被固定化酵母細胞,并利用固定化酵母細胞進行酒精發酵。第二張,PPT共二十六頁,創作于2022年6月第三張,PPT共二十六頁,創作于2022年6月 有什么辦法可以使酵母菌反復使用? 在日常生活中,我們無法將酵母菌反復使用。 酶的應用中存在的問題:生活中許多產品需要添加酶制劑,但酶對高溫、強酸強堿等條件非常敏感,容易失活;且溶液中的酶很難回收,這樣不僅提高了生產成本,也會影響產品口感
2、、質量。解決辦法:將酶固定在不溶于水的載體上。第四張,PPT共二十六頁,創作于2022年6月教材習題答案 1. 直接使用酶、使用固定化酶和使用固定化細胞催化反應,有哪些優點與不足?類型優點缺點直接使用酶催化效率高低耗能低污染對環境條件非常敏感,容易失活;溶液中的酶很那回收,不能被再次利用,提高了生產成本;反應后酶會混在產物中,可能影響產品質量第五張,PPT共二十六頁,創作于2022年6月類型優點缺點固定化酶酶既能與反應物接觸,又能與產物分離,同時,固定在載體上的每還可以被反復利用一種酶只能催化一種化學反應,而在生產實踐中,很多產物的形成都通過一系列的酶促反應才能得到固定化細胞成本低操作更容易,
3、對酶活性影響小、可以使酶再利用。固定后的細胞與反應物不容易接近,可能導致反映效果下降等vv第六張,PPT共二十六頁,創作于2022年6月 固定化細胞技術 1.固定化酶和固定化細胞技術是利用物理或化學方法將酶或細胞固定在一定的空間內的技術,包括_、 _ 、_三種方法。包埋法化學結合法物理吸附法酶物理吸附法化學結合法細胞 包埋法原因:細胞個大,酶分子很小個體大的細胞難以被吸附或結合而個小的酶容易從包埋的材料中漏出第七張,PPT共二十六頁,創作于2022年6月2. 實驗設計 今天我們以酵母細胞為實驗材料,進行酵母細胞的固定化實驗。第八張,PPT共二十六頁,創作于2022年6月實驗材料干酵母CaCl2
4、溶液海藻酸鈉干酵母第九張,PPT共二十六頁,創作于2022年6月干酵母 取1g干酵母,放10mL水中, 用玻璃棒攪拌成糊狀, 放置1h左右使其活化 1 .干酵母活化為什么需要進行酵母細胞的活化?在缺水狀態下,微生物處于休眠狀態。活化就是讓處于( )的微生物重新恢復正常的生活狀態休眠狀態第十張,PPT共二十六頁,創作于2022年6月2、配置物質的量濃度為0.05mol/L的CaCl2溶液 過程 稱取無水CaCl2 0.83g,放入200ml的燒杯中,加入150ml的蒸餾水,使其充分溶解,待用注意事項 溶解物質要徹底,勿用自來水溶解,以防自來水中各種離子影響實驗結果。第十一張,PPT共二十六頁,創
5、作于2022年6月3、配制海藻酸鈉溶液 稱取0.7g海藻酸鈉,放入50ml小燒杯中,加入10ml水,用酒精燈加熱,邊加熱邊攪拌,將海藻酸鈉調成糊狀,直至完全溶化,用蒸餾水定容至10ml。 過程注意事項 加熱時要用( ),或者( ),反復幾次,直到海藻酸鈉溶化為止小火間斷加熱 海藻酸鈉的濃度涉及到固定化細胞的質量。如果海藻酸鈉濃度過高,將很難形成凝膠珠;如果濃度過低,形成的凝膠珠所包埋的酵母細胞的數目少。第十二張,PPT共二十六頁,創作于2022年6月 將已經活化的酵母細胞加 入到海藻酸鈉溶液中 用玻璃棒進行充分攪拌, 使其混合均勻4.海藻酸鈉溶液和酵母細胞混合tips:1、溶化好的海藻酸鈉溶液
6、必須冷卻至室溫,否則會因溫度過高殺死酵母菌;2、攪拌要徹底充分,使兩者混合均勻,以免影響實驗結果的觀察。第十三張,PPT共二十六頁,創作于2022年6月 將溶液轉移至注射器中 將注射其中的溶液勻速緩慢滴加到配置好的CaCl2溶液中 液滴在CaCl2溶液中形成 凝膠珠5.固定化酵母細胞2.海藻酸鈉膠體在CaCl2這種電解質的作用下,發生聚沉,形成凝膠珠,需穩定30min左右tips:1.可利用海藻酸鈉制成不含酵母菌的凝膠珠,用作對照第十四張,PPT共二十六頁,創作于2022年6月第十五張,PPT共二十六頁,創作于2022年6月用固定化酵母細胞發酵將固定化酵母細胞(凝膠珠)用蒸餾水沖洗23次,洗去
7、凝膠珠表面多余的電解質溶液1、過程 剛形成的凝膠珠應在CaCl2溶液中浸泡一段時間,以便形成穩定的結構。檢驗凝膠珠的質量是否合格,可以使用下列方法。一是用鑷子夾起一個凝膠珠放在實驗桌上用手擠壓,如果凝膠珠不容易破裂,沒有液體流出,就表明凝膠珠的制作成功。二是在實驗桌上用力摔打凝膠珠,如果凝膠珠很容易彈起,也能表明制備的凝膠珠是成功的。第十六張,PPT共二十六頁,創作于2022年6月將150ml質量分數為10的葡萄糖溶液轉移至200ml的錐形瓶中,再加入固定好的酵母細胞,置于25C下發酵24h2、注意事項控制好發酵溫度,一般是室溫25發酵時間可視具體情況而定,一般時間稍長一些,效果明顯可用不含酵
8、母的凝膠珠做相同的處理,對照實驗結果第十七張,PPT共二十六頁,創作于2022年6月(一)觀察凝膠珠的顏色和形狀 如果制作的凝膠珠顏色過淺、呈白色,說明海藻酸鈉的濃度偏低,固定的酵母細胞數目較少;如果形成的凝膠珠不是圓形或橢圓形,則說明海藻酸鈉的濃度偏高,制作失敗,需要再作嘗試。(二)觀察發酵的葡萄糖溶液 利用固定的酵母細胞發酵產生酒精,可以看到產生了很多氣泡,同時會聞到酒味課題成果評價第十八張,PPT共二十六頁,創作于2022年6月固定化酵母細胞的實驗過程酵母細胞的活化配置物質的量濃度為0.05mol/L的CaCl2溶液配制海藻酸鈉溶液海藻酸鈉溶液與酵母細胞混合固定化酵母細胞利用固定化酵母細
9、胞發酵第十九張,PPT共二十六頁,創作于2022年6月固定化酶技術高果糖漿生產中的應用 1. 將葡萄糖異構酶固定在顆粒狀載體上 2. 將酶顆粒裝入到反應柱內,反應柱底部有篩孔,可以使反應溶液通過,而酶顆粒不能通過4. 相關鏈接第二十張,PPT共二十六頁,創作于2022年6月3、生產流程含淀粉的漿液-淀粉酶糊精糖化酶葡萄糖葡萄糖異構酶葡萄糖的異構化42%45%轉化成果糖果葡糖漿果糖和葡萄糖分離葡萄糖再次異構化反復多次果糖含量70%90%高果糖漿第二十一張,PPT共二十六頁,創作于2022年6月3. 將葡萄糖溶液從反應柱上端注入葡萄糖 葡萄糖異構酶 果糖 4. 果糖溶液從下端流出,葡萄糖異構酶仍保
10、留在反應柱內第二十二張,PPT共二十六頁,創作于2022年6月 我們采取這種方法,成功地實現了酶與反應物的自由接觸與分離。 同時,反應柱能連續使用半年,大大降低了生產成本,提高了果糖的產量和質量第二十三張,PPT共二十六頁,創作于2022年6月1. (2009.江蘇)下列關于固定化酶和固定化細胞的敘述,正確的是( ) A. 固定化細胞技術在多步連續催化反應方面優勢明顯 B. 固定化酶的應用中,要控制好pH、溫度和溶解氧 C. 利用固定化酶降解水體中有機磷農藥,需提供適宜的營養條件 D. 利用固定化酵母細胞進行發酵,糖類的作用只是作為反應物高考鏈接A第二十四張,PPT共二十六頁,創作于2022年6月解析:本題考查固定化酶和固定化細胞的相關知識。B選項固定化酶不像普通酶那樣對環境要求那么高,耐受性比較好,
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