1、Background mini reviewUnclearControversialNot reportedFurther investigationShortcomingsHypothesisExperimentsConclusionFuture InvestigationSignificanceMethodResultsDiscussion第一頁，共八十八頁。科 研 設 計第二頁，共八十八頁。科 研 設 計概論醫(yī)學科研的基本要素科研設計的基本原則科研設計的基本步驟統(tǒng)計學設計第三頁，共八十八頁。定 義 醫(yī)學科研設計是研究醫(yī)學科學研究中如何科學、合理地安排實驗因素，提高實驗效應，及如何排除影響

2、實驗的非處理因素。考慮周全、設計合理的研究方案可收事半功倍之效，而設計不佳的研究方案常招致失敗及時間、經費的浪費。 專業(yè)設計： 指運用專業(yè)理論知識和技術進行設計, 主要是解決研究的有用性、獨創(chuàng)性和科學性,以回答、解決科學問題，驗證專業(yè)假說。 統(tǒng)計學設計：運用數(shù)理統(tǒng)計學理論和方法進行設計, 包括資料的收集、整理、分析全過程的統(tǒng)計學設想和科學安排，以保證樣本的代表性和樣本間的可比性,以最少的調查、實驗觀察例數(shù)進行高效率的統(tǒng)計分析，得出準確的結果和可靠的結論。 第四頁，共八十八頁。專業(yè)設計錯誤蘇聯(lián)一神經論權威設計了免疫抗體形成的神經反射機制的實驗：他將動物后肢與軀體分離，僅保留由肢體傳入軀體的神經干

3、，然后在“離體”后肢注射抗原，不久將該神經干切斷。過些時候動物血中出現(xiàn)特異性抗體。該權威認為特異性抗體是由于抗原作用于神經感受器經反射而形成的。設計用動物急性感染實驗模型研究Th1/Th2細胞在炎癥中的作用。第五頁，共八十八頁。定 義 醫(yī)學科研設計是研究醫(yī)學科學研究中如何科學、合理地安排實驗因素，提高實驗效應，及如何排除影響實驗的非處理因素。考慮周全、設計合理的研究方案可收事半功倍之效，而設計不佳的研究方案常招致失敗及時間、經費的浪費。 專業(yè)設計： 指運用專業(yè)理論知識和技術進行設計, 主要是解決研究的有用性、獨創(chuàng)性和科學性,以回答、解決科學問題，驗證專業(yè)假說。 統(tǒng)計學設計：運用數(shù)理統(tǒng)計學理論和

4、方法進行設計, 包括資料的收集、整理、分析全過程的統(tǒng)計學設想和科學安排，以保證樣本的代表性和樣本間的可比性,以最少的調查、實驗觀察例數(shù)進行高效率的統(tǒng)計分析，得出準確的結果和可靠的結論。 第六頁，共八十八頁。實驗設計實驗設計主要為了保證科研結果符合四個性：有用性：目的性和可行性獨創(chuàng)性：先進性可重復性經濟性第七頁，共八十八頁。科 研 設 計概論醫(yī)學科研的基本要素科研設計的基本原則科研設計的基本步驟統(tǒng)計學設計第八頁，共八十八頁。是否主動施加干預?1. 實驗研究(干預): 受試對象：人臨床試驗（clinical trial） 動物動物實驗（ animal experiment ） 臨床試驗：治療臨床療

5、效實驗 預防社區(qū)干預實驗（community intervention trial） 2. 調查研究(無干預):被動地觀察、如實記錄 聯(lián)系： 調查研究可為實驗研究提供線索，而實驗研究還需要通過調查研究加以證實。第九頁，共八十八頁。實驗研究的基本要素降壓藥高血壓病人血壓值處理因素受試對象實驗效應三要素：1.處理因素；2.受試對象；3.實驗效應其他因素其他效應第十頁，共八十八頁。處理因素(study factor，treatment) 例：藥劑、手術方法、毒物 抓住主要處理因素 區(qū)分處理與非處理因素 處理因素必須標準化 處理因素是指外界施加于受試對象的因素，是在實驗中需觀察并闡明其效應功能的因素。

6、第十一頁，共八十八頁。單因素單水平表3-1細菌脂多糖對人外周血單個核細胞干擾素分泌的影響組別 目 的LPS 觀察LPS（1g/ml）刺激后人外周血單個核細胞干 擾素分泌水平 對照 溶劑（PBS），其他條件與實驗組一致，排除非處 理因素引起的變化第十二頁，共八十八頁。單因素多水平孕激素對滋養(yǎng)細胞基質金屬蛋白酶-9表達的影響 組別 目 的孕激素110-7 mol/L 觀察不同濃度的孕激素對滋養(yǎng)細孕激素110-6 mol/L 胞表達基質金屬蛋白酶-9的影響 孕激素110-5 mol/L 空白對照 排除非處理因素的干擾第十三頁，共八十八頁。多因素單水平 美托康對大鼠腦缺血再灌注損傷的保護作用 組別 腦

7、缺血再灌注 美托康 目 的 處理組 + + 觀察美托康對大鼠腦缺血再 灌注損傷的保護作用 對照A 假手術 + 觀察美托康的影響對照B + - 觀察腦缺血再灌注的影響 對照C 假手術 - 排除手術的影響 對照D 不手術 - 排除其他因素的影響 第十四頁，共八十八頁。多因素多水平 地塞米松抗過敏效應實驗研究 組別 口服 肌注 目的處理組A 0.1 mg/kg 口服小劑量地塞米松對過敏反應的作用 處理組B 0.5 mg/kg 口服中劑量地塞米松對過敏反應的作用 處理組C 1.0 mg/kg 口服大劑量地塞米松對過敏反應的作用 處理組D 0.1 mg/kg 肌注小劑量地塞米松對過敏反應的作用 處理組E

8、 0.5 mg/kg 肌注中劑量地塞米松對過敏反應的作用 處理組F 1.0 mg/kg 肌注大劑量地塞米松對過敏反應的作用 對照組G 溶劑 排除口服因素造成的影響 對照組H 生理鹽水 排除肌注因素造成的影響 對照組I 排除其他因素的影響 第十五頁，共八十八頁。受試對象(study subjects)病例的選擇：納入標準、剔除標準動物的選擇：種類、品系、年齡、體重、窩別、營養(yǎng)離體器官、組織 細胞 分子 須對處理因素敏感 反應須穩(wěn)定 體內外實驗相結合 in vitro， in vivo， ex vivo第十六頁，共八十八頁。人體實驗常見的設計類型病例報告 為疾病的發(fā)病表現(xiàn)、機理及診治提供詳盡的感性

9、資料。病例報告往往是識別新出現(xiàn)或不常見的疾病或疾病罕見表現(xiàn)的第一線索。橫斷面研究 包括普查和抽樣調查。 病例對照研究 回顧病例組暴露因素，通過與對照組進行比較，研究這些暴露因素的發(fā)生頻率與某疾病之間的關系。(由果到因）隊列研究 按照所研究人群是否暴露于某種因素將受試對象分為實驗組和對照組，隨訪觀察兩組人群某病的發(fā)病率，判斷暴露因素與疾病發(fā)病率的關系。分為前瞻性隊列研究(由因到果）和回顧性隊列研究。臨床試驗 臨床試驗中的受試對象一般采用隨機化原則分為治療組和對照組，觀察治療手段的療效。 第十七頁，共八十八頁。動 物 分類按微生物學要求，實驗動物可分為4個等級 ：I級：普通動物 II級：清潔動物

10、III級：無特殊病原體動物 （SPF）IV級：無菌動物 （GF）按照遺傳學特性要求，實驗動物也可分為4類：I類：近交系或稱為純系動物II類：突變系動物，包括轉基因動物和基因敲除動物III類：遠交系動物，又稱封閉群 IV類：雜交群或稱異系雜交 第十八頁，共八十八頁。第十九頁，共八十八頁。家兔對體溫變化十分敏感，宜選用做發(fā)熱、解熱及致熱源檢查實驗。觀察避孕藥對排卵影響的實驗宜選用兔、貓；對具有雌激素活性的藥物進行避孕藥效研究，不能選用小鼠與大鼠。以高膽固醇膳食飼喂兔、雞、豬、狗、猴等動物，均可誘發(fā)高脂血癥或動脈粥樣硬化，而猴和豬的心臟冠狀動脈前降支還形成斑塊及大片心肌梗死，情況與人更為相似，故動脈

11、粥樣硬化實驗多選用豬、猴及兔。家犬的胰腺、胃較小，宜用于胰腺摘除術及胃腸道生理的研究。大鼠無膽囊，不會嘔吐，故不能用于膽功能觀察；狗、貓、猴等動物嘔吐反應敏感，適宜用于嘔吐實驗。BALB/c小鼠與其他近交系相比，肝、脾與體重的比值較大，對放射線甚為敏感，故常用于制備單克隆抗體。C57BL/6小鼠具有干擾素產量高、對放射物質中等耐受、補體活性高、易誘發(fā)免疫耐受等特性，是腫瘤學及免疫學研究的常用品系。如遺傳性高血壓大鼠、糖尿病小鼠、自身免疫病小鼠等。還可利用某些特殊缺陷型小鼠，如胸腺缺陷的裸鼠，由于缺乏T細胞，故可接種人腫瘤，用以篩選抗腫瘤藥等。第二十頁，共八十八頁。細 胞原代細胞 ：經特殊分離方

12、法從胚胎、組織器官及外周血等初分離的細胞在體外培養(yǎng) 。傳代細胞：經傳代方式進行再次培養(yǎng)的細胞稱為傳代細胞。 細胞株：單細胞大量擴增后形成生物學特性穩(wěn)定的克隆化細胞群，稱為細胞株 。包括正常細胞株和腫瘤細胞株。基因缺陷和轉基因細胞株。懸浮細胞和貼壁細胞。第二十一頁，共八十八頁。用細胞做實驗的優(yōu)缺點不受機體內環(huán)境因素影響，從而避免個體差異，有利于探討各種物理、化學和生物因素對腫瘤細胞生命活動的影響。便于同時從細胞、分子與基因三個水平研究腫瘤細胞的結構、功能及癌變發(fā)生機制。能長期傳代、保存，便于觀察腫瘤細胞生物學特性和遺傳行為的改變。能快速篩選抗癌藥物，適宜進行耐藥機制、信號轉導的研究。研究周期較短

13、，經濟。 缺點：不能完全反映體內狀況，常與體內實驗互相驗證。長期培養(yǎng)易改變原有的性狀。易發(fā)生支原體感染。優(yōu)點：第二十二頁，共八十八頁。細胞庫資源ATCC (American Type Culture Collection) ，即美國細胞、菌種保藏中心，目前能提供 3000余種細胞系、15000余種細菌和噬菌體、2500余種動植物病毒、700余種人癌細胞系。Cascade Biologics, Inc.：該公司主要產品為人原代細胞，包括正常人皮膚細胞、心血管內皮細胞、角膜上皮細胞、黑色素細胞等。網址：第四軍醫(yī)大學實驗動物中心：該中心保存多種腫瘤細胞株。網址：武漢大學中國典型培養(yǎng)物保藏中心：是國內

14、較大且保存品種較多的細胞保藏中心。E-mail: 中國科學院典型培養(yǎng)物保藏委員會細胞庫：是國內較大且保存品種較多的細胞保藏中心。網址：中山醫(yī)科大學實驗動物中心。中國醫(yī)學科學院基礎醫(yī)學研究所、中國協(xié)和醫(yī)科大學基礎醫(yī)學院。 第二十三頁，共八十八頁。分子研究 DNA、RNA和蛋白質常用的重要數(shù)據(jù)庫為：基因數(shù)據(jù)庫（http:/www.ncbi.nlm. /Genbank/）非編碼RNA數(shù)據(jù)庫（）蛋白質數(shù)據(jù)庫（或）蛋白質組分析數(shù)據(jù)庫（） 第二十四頁，共八十八頁。分子研究基因與蛋白分子的檢測：單個、幾個與芯片的檢測；基因多態(tài)性研究、SNP、微衛(wèi)星等基因組、蛋白組和代謝酶組的變化基因和蛋白的調控、分子表觀遺

15、傳學基因和蛋白的結構基因和蛋白的關系、蛋白與蛋白的相互作用 第二十五頁，共八十八頁。實驗效應 (experimental effect) 處理因素作用于受試對象的結果，通過觀察指標表達。觀察指標應相關聯(lián)、客觀、精確、靈敏、特異。1. 客觀性：主觀指標和客觀指標。2. 精確性： 準確度(accuracy)或真實性（validity） ：觀察值與真值的接近程度，受系統(tǒng)誤差的影響(如靈敏度、特異度)。 精密度(precision)或可靠性（reliabiliy）或重復性（repeatability） ：重復觀察時觀察值與其均值的接近程度，受隨機誤差的影響（如一致百分率、Kappa值）。3. 靈敏性和

16、特異性： 指標的互補性、可靠性和穩(wěn)定性（標準化）第二十六頁，共八十八頁。科 研 設 計概論醫(yī)學科研的基本要素科研設計的基本原則科研設計的基本步驟統(tǒng)計學設計第二十七頁，共八十八頁。試驗設計的原則對照的原則：-意義：消除系統(tǒng)誤差，鑒別處理和非處理因素的差異-類型：空白對照、陽性對照、陰性對照、自身對照、相互對照隨機的原則：- 對照組和處理組除處理因素不同外，其余應全部相同。- 動物實驗隨機分組；觀察切片也應隨機選擇視野重復的原則：- 隨機原則可排除大部分非處理因素的影響，但不能全部消除；因此，有必要重復，以反映客觀真實性。- 表現(xiàn)為一定的試驗樣本數(shù)（人、動物、細胞株）第二十八頁，共八十八頁。對照(

17、control)的原則 對照的意義 ：區(qū)分處理因素與非處理因素的效應，是比較的必要基礎 藥物治療例: 老年性慢性支氣管炎氣候轉暖,自然緩解消除和減少實驗誤差 處理組：對照組：比較結果處理因素非處理因素+處理效應+非處理效應非處理因素非處理效應處理因素處理效應第二十九頁，共八十八頁。直接凝集和間接凝集試驗 診斷血吸蟲、RA、鉤端螺旋體陽性對照和陰性對照可監(jiān)控方法的正確性和特異性第三十頁，共八十八頁。對照的形式 空白對照(blank control)：對照組不加任何處理因素。 例如：試劑空白、血樣空白、無酶解空白、底物空白等。包括：空白對照、實驗對照、標準對照、自身對照、相互對照 、歷史對照第三十

18、一頁，共八十八頁。對照的形式 實驗對照(experimental control)：施加每一因素均需設置對照+非處理因素對照（安慰劑對照）。含賴氨酸面包+非處理因素賴氨酸效應 + 面包效應+非處理因素效應 面包+非處理因素 面包效應+非處理因素效應賴氨酸 賴氨酸效應 非處理因素 +非處理因素效應第三十二頁，共八十八頁。對照的形式 標準對照(standard control)：以現(xiàn)有的標準或正常值作對照。 例某種新的方法能否代替?zhèn)鹘y(tǒng)方法的研究； 某病患者與正常人的某生理、生化指標是否相同。 實驗室應用較多 第三十三頁，共八十八頁。對照的形式 自身對照：實驗在同一受試對象上進行特點： 簡單易行，使

19、用廣泛。但若試驗前后某些環(huán)境或自身因素發(fā)生改變，并且會影響試驗結果，就難以說明問題。 第三十四頁，共八十八頁。對照的形式 相互對照 ：幾個實驗組互相對照例如：比較幾種藥物治療同一疾病的療效常用半數(shù)有效量、半數(shù)致死量比較幾種藥物之間的效應和毒性。第三十五頁，共八十八頁。對照的形式 歷史對照：以過去的研究結果作對照。 與本人或他人過去的研究結果作比較 不好！第三十六頁，共八十八頁。對照設置方法配對對照法：節(jié)省樣本數(shù)，抽樣誤差最小，統(tǒng)計效率最高 自體配對：指在同一個體處理前后或不同部位作為對照組和處理組，比較兩組間差異。 異體配對：選擇同窩，性別、體重一致的動物，或相同疾病、性別、年齡、病情等相當?shù)?/p>

20、病人配對，在每個對子內部隨機分至對照組和實驗組，比較兩組間差異。組間對照法：組間對照是將條件基本一致的不同個體隨機分組，分別接受對照處理與實驗處理，比較兩組或幾組間差異。 交叉對照法：即先接受對照處理的個體隨后接受試驗處理，先接受試驗處理的個體隨后接受對照處理，通過交叉而減少個體差異。 第三十七頁，共八十八頁。試驗設計的原則對照的原則：-意義：消除系統(tǒng)誤差，鑒別處理和非處理因素的差異-類型：空白對照、陽性對照、陰性對照、自身對照、相互對照隨機的原則：- 對照組和處理組除處理因素不同外，其余應全部相同。- 動物實驗隨機分組；觀察切片也應隨機選擇視野重復的原則：- 隨機原則可排除大部分非處理因素的

21、影響，但不能全部消除；因此，有必要重復，以反映客觀真實性。- 表現(xiàn)為一定的試驗樣本數(shù)（人、動物、細胞株）第三十八頁，共八十八頁。隨機化(randomization)分組的原則 隨機化原則：隨機“隨便”, 指每個受試對象以機會均等的原則隨機地分配到試驗組和對照組。 目的是使各組非實驗因素的條件均衡一致，以消除對實驗結果的影響。第三十九頁，共八十八頁。隨機化分組方法1. 抽簽等2. 隨機數(shù)字表3. 計算器或計算機第四十頁，共八十八頁。隨機數(shù)字表分組例 試將10頭動物應用隨機數(shù)字表分配到甲、乙兩組。按動物體重編號從隨機表的第21行，第21列往上查10個隨機數(shù)規(guī)定雙號為甲組，單號為乙組 調整：再接著查

22、一個“6”以內的隨機數(shù)，以決定甲組中哪一號撥到乙組。本例查得隨機數(shù)為4，將甲組第4個（5號）調到乙組。 第四十一頁，共八十八頁。計算(器)機隨機化分組第四十二頁，共八十八頁。試驗設計的原則對照的原則：-意義：消除系統(tǒng)誤差，鑒別處理和非處理因素的差異-類型：空白對照、陽性對照、陰性對照、自身對照、相互對照隨機的原則：- 對照組和處理組除處理因素不同外，其余應全部相同。- 動物實驗隨機分組；觀察切片也應隨機選擇視野重復的原則：- 隨機原則可排除大部分非處理因素的影響，但不能全部消除；因此，有必要重復，以排除偶然因素的影響。- 表現(xiàn)為一定的試驗樣本數(shù)（人、動物、細胞株）第四十三頁，共八十八頁。重復的

23、原則 重復(replication)是指各處理組與對照組要有一定樣本含量(sample sizes)。 無限地增加樣本含量，將加大實驗規(guī)模，延長實驗時間，浪費人力物力，反而增加系統(tǒng)誤差出現(xiàn)的可能性。 樣本含量不足，檢驗效能（Power，1）偏低，導致總體中本來具有的差異無法檢驗出來。第四十四頁，共八十八頁。科 研 設 計概論醫(yī)學科研的基本要素科研設計的基本原則科研設計的基本步驟統(tǒng)計學設計第四十五頁，共八十八頁。最有成就的實驗家常常是這樣的人：他們事先對課題加以周密思考，并將課題分成若干關鍵的問題，然后，精心設計為這些問題提供答案的實驗第四十六頁，共八十八頁。實驗設計步驟研究目標主要實驗內容實驗

24、路線的設計實驗方案的設計第四十七頁，共八十八頁。確定研究目標：即該課題解決的科學問題-不要定的目標太大：如解決腫瘤治療問題-不要定的目標太多：最多2-3個目標。一個課題最好集中解決某個問題（總目標），如TNF在內毒素性休克中的作用-不要定不可達到的目標主要研究內容：善于把要解決的問題分支成若干小的問題，從不同角度進行研究。如研究某因素殺瘤作用：殺傷腫瘤譜、殺傷效率、誘導死亡方式，體內外試驗、殺傷機制等。第四十八頁，共八十八頁。研究路線的設計：根據(jù)研究內容不同而不同：對某基因表達的研究：mRNA、蛋白表達、定位及功能基因調控：EMSA、報告基因等新基因的研究：差顯表達、 RACE、基因克隆、蛋白

25、表達、功能研究蛋白組研究：二維電泳、資料比對、消化、酶解、質譜實驗方案：試驗對象（包括試驗模型）：人、動物、細胞、分子等處理因素：高糖、LPS、激素、細胞因子等；單因素多水平、多因素單水平、多因素多水平檢測指標：關聯(lián)性、客觀性、靈敏性、精確性、穩(wěn)定性第四十九頁，共八十八頁。尼科爾屬于那種在制定實驗方案之前周密考慮，精心構思，從而取得成功的人他絕不象第二流人物，做那種心思來潮而常常是考慮不周的實驗，自己急得如熱鍋螞蟻。相對來說，尼科爾做的實驗很少，很簡單。但是，他做的每一個實驗都是長時間智力孕育的結果，要考慮到一切可能的因素，并要在最后的實驗中加以檢驗。然后，他單刀直入，不做虛功。這就是巴斯德的

26、方法，也是我們這個職業(yè)中所有偉大人物的方法。他們簡單的、結論明確的實驗，對于那些能夠欣賞的人來說，是一種莫大的精神享受。津澤（美國細菌學家）第五十頁，共八十八頁。試驗設計方案簡述Fas和FasL的作用。請設計一個實驗方案，說明腫瘤細胞表達FasL后，可逃避免疫系統(tǒng)的攻擊。 第五十一頁，共八十八頁。第五十二頁，共八十八頁。Tumor cells induce apoptosis in T lymphocytes via FAS activationCancer cells express FAS ligandBind to FAS receptor on T lymphocytes leadin

27、g to apoptosis 腫瘤細胞表達FasL后，可逃避免疫系統(tǒng)的攻擊。第五十三頁，共八十八頁。實驗目的：表達FasL的腫瘤細胞可逃避免疫攻擊實驗內容：腫瘤細胞是否表達FasL腫瘤細胞對活化的淋巴細胞是否具有殺傷作用體內實驗觀察表達和不表達FasL的腫瘤細胞的致瘤率實驗方案：FACS: 檢測腫瘤細胞是否表達FasL 凋亡檢測：腫瘤細胞對活化的淋巴細胞是否具有殺傷作用（活化淋巴細胞、腫瘤細胞活化淋巴細胞、腫瘤細胞非活化淋巴細胞、腫瘤細胞活化淋巴細胞抗FasL抗體）體內實驗第五十四頁，共八十八頁。課題申請書（開題報告）的撰寫第五十五頁，共八十八頁。課題設計書的撰寫對課題評價的標準立論依據(jù)研究目

28、的與研究內容研究路線和研究方案項目的創(chuàng)新性和特色研究的前期工作研究團隊和研究條件 第五十六頁，共八十八頁。國家自然科學基金的資助方向基礎理論研究2. 應用基礎研究以實驗醫(yī)學為基礎的第五十七頁，共八十八頁。國家自然科學基金的主要種類常規(guī)基金：面上項目（青年基金和地區(qū)基金）重點項目重大項目杰出青年基金特殊基金：主任基金專項基金創(chuàng)新群體基金合作基金（海外，港澳）第五十八頁，共八十八頁。國家自然科學基金的評審程序初審（函審）評審專家1評審專家2評審專家5評審專家3評審專家4終審（會審）選擇超出擬批準項目120-130%的預選項目進行評審學部批準第五十九頁，共八十八頁。申請人是否具有科研能力 ？課題是否

29、有科學意義、創(chuàng)新性和可行性 ？是否具備研究條件 ？課題評審者主要考慮的問題第六十頁，共八十八頁。課題設計書的撰寫對課題評價的標準立論依據(jù)研究目的與研究內容研究路線和研究方案項目的創(chuàng)新性和特色研究的前期工作研究團隊和研究條件 第六十一頁，共八十八頁。 所研究的是重要領域的重要問題具有重要的理論價值或應用前景課題研究的意義第六十二頁，共八十八頁。科 學 性研究的背景：國內外目前的研究現(xiàn)狀；包括自己前期實驗結果與數(shù)據(jù)存在的問題：提出研究的切入點與假說研究設想：研究目標及思路第六十三頁，共八十八頁。對國內外研究現(xiàn)狀的了解廣度和深度：近5年的主要研究進展 研究中存在的主要問題參考文獻： 國外文獻 近5年

30、 數(shù)量：20-30 雜志等級第六十四頁，共八十八頁。學術思想及創(chuàng)新性 理論創(chuàng)新：新學說或理論 方法創(chuàng)新：新方法 技術創(chuàng)新：技術改進或完善第六十五頁，共八十八頁。立 項 依 據(jù) （2-2.5張） 該研究項目的重要性：2-3行即可 常見問題：寫得太多！介紹在這個領域的國內外進展 ，包括自己的工作，并引用自己發(fā)表的SCI文獻（注意圍繞主題） 常見問題：寫得太多/太少、重點不突出、介紹與主題無關的進展凝練科學問題，提出假說 （創(chuàng)新性、科學性及實用性） 常見問題：不知道問題在哪兒？或提與主題無關的問題 根據(jù)自己前期工作（最好已發(fā)表SCI文章）提出假說 常見問題：沒有形成假說、無邏輯性簡介本項目擬開展的工

31、作、思路及意義 常見問題：不寫第六十六頁，共八十八頁。科學問題凝練過程問項：科學問題是在一定科學知識背景下, 存在于科學知識體系內和科學實踐中有待解決的疑難，需要深層思考及高度凝練。答域：是對求解范圍的限定。 - 全域：對解答范圍不給予任何限制的科學問題。（瘧疾是什么引起的？） - 類域：若對某科學問題有了初步認識, 希望能進一步深入, 問題的解答范圍即相應有了一定程度的限定。（清除污水為何減少瘧疾的發(fā)生？） - 特域：一旦科學問題的答域限定為某個具體答案，此時的答域稱為特域。研究者根據(jù)科學推理給出嘗試性解答或假說。（瘧疾是由蚊子傳播的。）第六十七頁，共八十八頁。課題設計書的撰寫對課題評價的標

32、準立論依據(jù)景研究目的與研究內容研究路線和研究方案項目的創(chuàng)新性和特色研究的前期工作研究團隊和研究條件 第六十八頁，共八十八頁。研究目標、研究內容和擬解決的關鍵問題研究目標：明確、集中，用2-3句話描述。 常見問題：太大、分散或不明確 研究內容：根據(jù)假說，將研究問題分支，從不同側面或角度進行研究；每一分支就組成一個研究內容。注意研究內容要集中，圍繞假說從不同角度（平行）及不同層次（縱深）開展研究。 常見問題：太細、與研究方案混淆擬解決的關鍵問題：包括解決的關鍵科學問題、整個研究中最關鍵的環(huán)節(jié)及技術難點 （如模型的制備、分子表達率和純化等） 常見問題：找不準第六十九頁，共八十八頁。研究內容和擬解決的

33、關鍵問題范圍合適：3-5個內容重點突出：1-2個重點關鍵問題選擇準確：1-3個關鍵問題第七十頁，共八十八頁。課題設計書的撰寫對課題評價的標準立論依據(jù)景研究目的與研究內容研究路線和研究方案項目的創(chuàng)新性和特色研究的前期工作研究團隊和研究條件 第七十一頁，共八十八頁。研究路線和研究方案 研究路線：整個實驗流程及線路，可以用線路圖表示，但要簡明易懂。 常見問題：未寫，或線路圖畫得太復雜研究方案：研究對象、處理因素、分組、用某種技術檢測某種指標等。可按照研究內容在分標題下描述。 常見問題：將方法寫得太細、檢測指標太多，不突出重點；或不寫具體檢測哪種信號分子；未設計正確對照；臨床病例要排除和納入標準及樣本

34、數(shù)；僅做平行檢測，無深度； 注意問題：設計巧妙、盡量使用先進技術、盡量從不同角度去驗證一個問題、注意合理應用抑制性、促進性和排除性實驗手段第七十二頁，共八十八頁。肝臟缺血再灌注損傷及藥物的保護（技術路線）培養(yǎng)肝竇內皮細胞缺氧再氧化細胞凋亡缺血再灌注損傷體外實驗體內實驗肝臟缺血再灌注功能評價活性氧NOMMPs 藥物保護（PGE、 API、 764-3)Tunel stainingDNA ladderFACS細胞凋亡第七十三頁，共八十八頁。技 術 路 線 設計合理： 基礎與臨床體外與體內分子、細胞、整體第七十四頁，共八十八頁。研究路線和研究方案 研究路線：整個實驗流程及線路，可以用線路圖表示，但要簡明易懂。 常見問題：未寫，或線路圖畫得太復雜研究方案：研究對象、處理因素、分組、用某種技術檢測某種指標等。可按照研究內容在分標題下描述。 常見問題：將方法寫得太細；檢測指標太多，不突出重點，不相關；或不寫具體檢測哪種信號分子；未設計正確對照；臨床病例要排除和納入標準及樣本數(shù)；僅做平行檢測，無深度； 注意問題：設計巧妙、盡量使用先進技術、盡量從不同角度去驗證一個問題、注意合理應用抑制性、促進性和排除性實驗手段第七十五頁，共八十八頁。研究方案及手段方法先進技術成熟可靠有創(chuàng)新，設計科學及可行要求：緊密相關、清晰、科學判斷、獨到模型和材料、先進、創(chuàng)新、有替代方案第七十六頁，共八十八