1、生化檢測(cè)中的影響因素一、檢測(cè)前因素二、檢測(cè)中因素三、檢測(cè)后因素 檢測(cè)前的影響因素 一、 標(biāo)本的因素 1. 生理因素對(duì)生化檢驗(yàn)結(jié)果的影響 影響檢驗(yàn)結(jié)果的生理因素可分為可控因素和不可控因素兩種類型。主要有年齡、性別、運(yùn)動(dòng)、情緒、體位改變、生活方式、妊娠、季節(jié)變化、海拔高度、生理性波動(dòng)等.2.飲食對(duì)生化檢驗(yàn)結(jié)果的影響3.藥物對(duì)生化檢驗(yàn)結(jié)果的影響 藥物引起生化檢驗(yàn)結(jié)果出現(xiàn)誤差的原因可分為物理干擾和化學(xué)干擾，物理干擾是由于藥物進(jìn)入體內(nèi)后使血清的物理性質(zhì)如顏色等發(fā)生變化進(jìn)而影響某些項(xiàng)目的檢測(cè)，而化學(xué)干擾是由于藥物本身的化學(xué)性質(zhì)如藥物的強(qiáng)還原性等對(duì)體內(nèi)某些物質(zhì)測(cè)定的影響。此外，許多藥物的副作用使肝、腎功能發(fā)

2、生改變而引起檢驗(yàn)結(jié)果異常。值得注意的是長(zhǎng)期靜脈點(diǎn)滴的病人留取標(biāo)本時(shí)可使標(biāo)本稀釋，造成某些項(xiàng)目結(jié)果偏低，又因靜點(diǎn)時(shí)高濃度的藥物進(jìn)入標(biāo)本中，使許多檢驗(yàn)結(jié)果發(fā)生巨大變化。因此護(hù)理人員應(yīng)避免在靜點(diǎn)時(shí)和用藥4h以內(nèi)采取檢驗(yàn)標(biāo)本，必要時(shí)停藥后再查，以防藥物的干擾作用。4.標(biāo)本采集對(duì)生化檢驗(yàn)結(jié)果的影響5.標(biāo)本處理、儲(chǔ)存對(duì)生化檢驗(yàn)結(jié)果的影響 標(biāo)本的離心速度、時(shí)間,離心前放置的時(shí)間、以及標(biāo)本貯存的溫度、時(shí)間等都會(huì)對(duì)生化檢測(cè)結(jié)果產(chǎn)生影響。 6.標(biāo)本狀態(tài)對(duì)生化檢驗(yàn)結(jié)果的影響6.1 溶血 溶血是臨床生化檢驗(yàn)中最常見的一種影響因素，它能引起很多指標(biāo)明顯異常。溶血的干擾機(jī)理有以下三種：一是血細(xì)胞中高濃度組分逸出，使測(cè)定結(jié)

3、果增高,血細(xì)胞內(nèi)濃度比血漿中濃度明顯高的物質(zhì)有LDH、ACP、AST、K+，只要輕微溶血就可以對(duì)這些項(xiàng)目產(chǎn)生很大影響。另外若某些物質(zhì)的血細(xì)胞內(nèi)濃度低于血清濃度時(shí)，則溶血相當(dāng)于血清被稀釋，因而使這些血清成分特別是發(fā)生重度溶血時(shí)的檢測(cè)值降低，這類項(xiàng)目主要有Ca2+、Na+、Cl-、UA等。二是血細(xì)胞成分進(jìn)入血清中后因化學(xué)反應(yīng)而引起其他物質(zhì)的濃度改變，如溶血后紅細(xì)胞的磷脂進(jìn)入血清被血清中的磷酸酯酶水解，其結(jié)果造成血清無(wú)機(jī)磷濃度顯著增高。三是血紅蛋白本身顏色對(duì)檢測(cè)的光學(xué)干擾，血紅蛋白的顏色在431nm和555nm波長(zhǎng)附近能使比色、比濁法的吸光度增高，如溶血引起重氮單試劑法膽紅素測(cè)定結(jié)果明顯升高。實(shí)際上

4、，以上三類干擾在溶血標(biāo)本中同時(shí)存在并可相互作用，因而使受影響的檢項(xiàng)更為復(fù)雜，這在超微量、高精度和多指標(biāo)的檢測(cè)分析中顯然不可忽視，因此，嚴(yán)控標(biāo)本溶血是保證檢驗(yàn)質(zhì)量的重要方面。.2脂血對(duì)生化檢測(cè)的干擾:血液脂濁可散射光線，所以對(duì)吸光度一般產(chǎn)生正向干擾，導(dǎo)致某些項(xiàng)目如ALB、UA、總蛋白（TP）23等測(cè)定結(jié)果。而在pH10以上的環(huán)境中，乳糜中的TG會(huì)皂化可使血清逐漸變清，使許多比色法測(cè)定如Ca2+、Cr、ALP、TP等結(jié)果產(chǎn)生負(fù)誤差。6.3 黃疸 膽紅素對(duì)反應(yīng)結(jié)果產(chǎn)生黃色化合物的比色分析影響很大，一般可以用樣本空白或兩點(diǎn)比色法、連續(xù)監(jiān)測(cè)法來(lái)消除膽紅素對(duì)黃色結(jié)果的影響，但由于膽紅素不穩(wěn)定，隨著膽紅素被

5、氧化為膽綠素、膽褐素而變色，此時(shí)如果使用兩點(diǎn)法、連續(xù)監(jiān)測(cè)法同樣也不能排除膽紅素對(duì)結(jié)果的干擾。此外膽紅素作為一種還原劑對(duì)氧化反應(yīng)有干擾，如氧化酶法測(cè)定GLU、TG、UA、膽固醇等，因?yàn)槟懠t素可以與上述過程中H2O2分解產(chǎn)生的新生態(tài)氧發(fā)生反應(yīng)，從而使新生態(tài)氧與氧化酶法反應(yīng)中的色源物質(zhì)結(jié)合減少，導(dǎo)致結(jié)果偏低。此時(shí)也可用雙波長(zhǎng)法或設(shè)計(jì)樣本空白消除干擾，亦或當(dāng)外觀檢查發(fā)現(xiàn)是黃疸血清時(shí)可先除蛋白，然后加膽紅素氧化酶預(yù)先將膽紅素氧化成較穩(wěn)定的氧化產(chǎn)物膽褐素，可大大減低甚至消除膽紅素的干擾。 返回生化分析儀的校準(zhǔn)對(duì)測(cè)定標(biāo)本的儀器一定要求進(jìn)行校準(zhǔn)，校準(zhǔn)時(shí)要選擇合適的（配套的）標(biāo)準(zhǔn)品/校準(zhǔn)品；如有可能，校準(zhǔn)品應(yīng)能

6、溯源到參考方法或/和參考物質(zhì)；對(duì)不同的分析項(xiàng)目要根據(jù)其特性確立各自的校準(zhǔn)頻率.儀器的精密度檢查儀器的維護(hù)保養(yǎng)用已糖激酶（HK）法則定葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液時(shí)，葡萄糖的消耗與NADH的生成是等摩爾關(guān)系，校準(zhǔn)生化分析儀340nm處NAD(P)H的摩爾吸光系數(shù)。可用ALP測(cè)定試劑的緩沖液作為測(cè)定試劑，對(duì)硝基苯酚標(biāo)準(zhǔn)液作為血清標(biāo)本，實(shí)際測(cè)定405nm的吸光度值，根據(jù)對(duì)硝基苯酚的濃度可計(jì)算值。檢測(cè)方法的選擇 不同的檢測(cè)方法對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響是不言而預(yù)的,我們應(yīng)優(yōu)先選擇國(guó)際、國(guó)內(nèi)，行業(yè)內(nèi)權(quán)威機(jī)構(gòu)推薦的方法，沒有推薦常規(guī)方法的，應(yīng)該選擇公認(rèn)的測(cè)定方法。試劑的影響生化試劑盒有許多生產(chǎn)廠家，不同廠家產(chǎn)品的質(zhì)量、技術(shù)含量等常

7、有區(qū)別，有時(shí)即使同一廠家不同批號(hào)的同種試劑因原料來(lái)源、純度不同以及生產(chǎn)條件變動(dòng)，會(huì)產(chǎn)生批間變異。同一批號(hào)的同種試劑盒在儲(chǔ)存、運(yùn)輸時(shí)的情況有所不同，性能也可能發(fā)生變化。同項(xiàng)目試劑盒之間作比較，如果穩(wěn)定性好、線性范圍寬、正向型試劑空白吸光度低、反向型試劑空白吸光度高、試劑空白速率低、瓶間差小者可視為優(yōu)質(zhì)試劑。 項(xiàng)目參數(shù)的設(shè)置對(duì)結(jié)果的影響 項(xiàng)目參數(shù)主要包括:標(biāo)本用量、試劑的配比及用量、反應(yīng)的溫度、延遲時(shí)間、反應(yīng)時(shí)間、監(jiān)測(cè)的主波長(zhǎng)、次波長(zhǎng)、反應(yīng)類型、監(jiān)測(cè)的時(shí)間、空白吸光度、底物耗盡及前帶現(xiàn)象的監(jiān)測(cè)、額外的清洗。必須要針對(duì)不同類型的反應(yīng)，不同試劑的性質(zhì)設(shè)置合理的檢測(cè)參數(shù)。分析后階段 目前大多數(shù)檢驗(yàn)科室都

8、實(shí)行了計(jì)算機(jī)網(wǎng)絡(luò)管理技術(shù)，病人資料、檢驗(yàn)數(shù)據(jù)網(wǎng)上共享，各實(shí)驗(yàn)室當(dāng)天的測(cè)試結(jié)果通過聯(lián)機(jī)即時(shí)傳達(dá)電腦網(wǎng)絡(luò)，這種模式提高了工作效率，也避免了以往由人為抄錄結(jié)果時(shí)發(fā)生的誤差。由于標(biāo)本量大，影響因素多而復(fù)雜，加上審核人員的經(jīng)驗(yàn)等原因的影響生化檢驗(yàn)的幾種異常結(jié)果的分析1.體檢標(biāo)本中的Glu結(jié)果普遍偏低；2.體檢標(biāo)本中部分TG,T-CH結(jié)果偏低;3.CK-MB大于CK;4.Mg、TBA、K等項(xiàng)目的結(jié)果在與其它一些項(xiàng)目在一起檢測(cè)的結(jié)果與單獨(dú)檢測(cè)的結(jié)果差距較大；5.黃疸標(biāo)本中的UA、Cr、Glu等結(jié)果偏低；6.溶血標(biāo)本中的K、LDH、AST、DBIL、CRP等結(jié)果偏高； 7.ALT檢測(cè)中原倍結(jié)果遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于標(biāo)本稀釋

9、的檢測(cè)結(jié)果； 血清ALT測(cè)定，血清中的內(nèi)源性丙酮酸及其它酮酸也可與試劑中的指示酶（乳酸脫氫酶）起反應(yīng)，使結(jié)果偏高。若先加入缺乏-酮戊二酸的第一試劑，使其它酮酸與指示酶反應(yīng)之后再加入含有-酮戊二酸的第二試劑，啟動(dòng)真正的ALT酶促反應(yīng)生成丙酮酸，而丙酮酸與乳酸脫氫酶的反應(yīng)消耗的NAD能真正反映ALT的活性，從而消除以上副反應(yīng)的影響。4.4 積極參與各級(jí)臨檢中心的室間質(zhì)控評(píng)比活動(dòng) 室間質(zhì)控是實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可的重要依據(jù)，是保證實(shí)驗(yàn)室開展項(xiàng)目的基礎(chǔ)，反映了實(shí)驗(yàn)室的準(zhǔn)確度和可信度。臨床常規(guī)生化室間質(zhì)量評(píng)比活動(dòng)是相互校正各參與實(shí)驗(yàn)室測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確性，并使各實(shí)驗(yàn)室之間的結(jié)果有可比性，減少實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的系統(tǒng)誤差等。 4.5 危機(jī)值報(bào)告制度的建立與應(yīng)用 危急值是一組代表會(huì)危及患者生命的數(shù)據(jù)，應(yīng)采取及時(shí)、有效的治療措施，否則會(huì)產(chǎn)生不良后果，出現(xiàn)危急值的標(biāo)本必須復(fù)查，結(jié)果及時(shí)報(bào)告臨床。 4.6 提高檢驗(yàn)人員自身素質(zhì) 這是生化檢驗(yàn)質(zhì)量的保證。隨著檢驗(yàn)醫(yī)