1、HPLC法測定安坤益母草片中鹽酸水蘇堿的含量【摘要】目的建立安坤益母草片中鹽酸水蘇堿的含量測定方法。方法采用氨基柱，以乙腈-水體積比7822為流動相，檢測波長是202n，流速是1Lin-1，柱溫是30。結果鹽酸水蘇堿在5.62528.125g內有良好的線性關系，r0.9992，回收率為100.3，RSD為2.4。結論本法專屬性強，準確、簡便，可為安坤益母草片的質量標準提供根據。【關鍵詞】安坤益母草片；高效液相色譜法；鹽酸水蘇堿安坤益母草片是由作者經由安坤益母草膏改劑型而得，由益母草、川芎、白芍、地黃、當歸等藥材組成。具有養經調血、化淤生新的成效，臨床上主要用于血淤氣滯引起的月經不調、行經腹痛、

2、量少色暗、產后淤血不凈等癥，獲得滿意效果。益母草是方中君藥，鹽酸水蘇堿是有效成分之一，其測定方法有雷氏鹽沉淀溶解比色法1、紫外分光光度法2、薄層掃描法3、HPL法4等。為更好地控制制劑質量，確保臨床療效，本文采用HPL法測定鹽酸水蘇堿的含量，結果說明方法專屬性強、精細度高、別離度好，可用于控制安坤益母草片中鹽酸水蘇堿的含量測定。1儀器與試藥ATERS2695-2996型高效液相色譜儀美國。安坤益母草片自制；鹽酸水蘇堿對照品批號：712-9903，中國藥品生物制品檢定所；甲醇、乙腈為色譜純，其他試劑均為分析純。2方法與結果2.1色譜條件色譜柱：氨基柱2504.6,5，大連依利特公司；流動相：乙腈

3、-水體積比7822；流速：1Lin-1；檢測波長：202n；柱溫：30；進樣量：15L。在此條件下，供試品中鹽酸水蘇堿峰能到達基線別離，理論板數按鹽酸水蘇堿峰計應不低于4000，別離度均是3.6。見圖13。圖1鹽酸水蘇堿對照品HPL圖譜略Fig.1HPLhratgrafstahydrinehydrhlride圖2安坤益母草片HPL圖譜略Fig.2HPLhratgrafAnkuntherrttablets圖3安坤益母草空白片HPL圖譜略Fig.3HPLhratgrafblankntrlfAnkuntherrttablets2.2溶液的配制2.2.1對照品溶液的制備精細稱取鹽酸水蘇堿對照品11.2

4、5g置10L量瓶中，加甲醇使溶解，并稀釋至刻度，得到1.125g/L的鹽酸水蘇堿對照品溶液。2.2.2供試品溶液的制備取本品5片0.25g/片，除去薄膜衣，研細，精細稱取0.25g，置具塞錐形瓶中，精細參加20L乙醇，超聲處理30in，濾過，濾渣及容器用20L乙醇分次洗滌，濾過，合并濾液，蒸干，殘渣加乙醇溶解并轉移至10L的量瓶中，加乙醇稀釋至刻度，搖勻，離心5000r/in，5in，取上清液作為供試品溶液。2.2.3鹽酸水蘇堿空白供試液的制備按處方稱取除益母草外的藥材提取，取處方比例輔料，按安坤益母草片制備工藝制得安坤益母草空白片，再按“2.2.2項下制備方法制得空白對照供試液。轉貼于論文聯

5、盟.ll.2.3標準曲線的制備精細量取鹽酸水蘇堿對照品溶液(1.125g/L)5、7、10、15、20、25L注入液相色譜儀，按上述色譜條件測定鹽酸水蘇堿色譜峰面積，以鹽酸水蘇堿微克數為橫坐標，峰面積積分值為縱坐標，進展線性回歸，得回歸方程：y=5.89104x-1.52104(r=0.9992)，線性范圍：5.62528.125g。2.4干擾試驗按“2.1色譜條件，取鹽酸水蘇堿對照品溶液、供試品溶液、空白供試液，分別注入液相色譜儀，結果說明供試品色譜在與對照品色譜相應位置上，有一一樣的色譜峰，而空白供試液在此保存時間內不出峰，說明其他成分對測定鹽酸水蘇堿無干擾。2.5精細度試驗取對照品溶液(

6、1.125g/L)15L，重復進樣6次，記錄鹽酸水蘇堿的峰面積。結果鹽酸水蘇堿峰面積RSD0.8。2.6穩定性試驗取上述供試品溶液15L，分別在0、2、4、8、16、24h進樣，記錄鹽酸水蘇堿的峰面積，結果鹽酸水蘇堿峰面積的RSD=1.2%(n=6),說明供試品溶液在制備后24h內測定根本穩定。2.7重復性試驗取同一批安坤益母草片(批號:20220412)6份,按“2.2.2項方法處理樣品并測定鹽酸水蘇堿峰面積,計算鹽酸水蘇堿含量，結果RSD=1.7%，說明此方法測定鹽酸水蘇堿含量重復性好。2.8加樣回收試驗精細稱取含量的樣品(批號20220406，鹽酸水蘇堿含量10.8g/片)6份，每份取樣

7、量為供試品取樣量0.25g/片的50，按“2.2.2項方法操作，以當前取樣含量的11，分別精細參加鹽酸水蘇堿對照品溶液1.08g/L5L，制備加樣回收供試品溶液，按含量測定條件測定，計算回收率，結果見表1。表1鹽酸水蘇堿回收率試驗結果(n=6)略Tab.1ReveryfStahydrineHydrhlride2.9樣品測定取5批批號20220510、20220513、20220520、20220517、2022051910個樣品，按“2.2.2項方法制備供試品溶液，進樣測定。結果安坤益母草片鹽酸水蘇堿平均含量是10.33g/片。3討論鹽酸水蘇堿構造中既含有堿性的NH4+，又含有酸性的H-，分子

8、量小，極性大，在常規的18柱中難保存5。以常規的生物堿分析方法很難將鹽酸水蘇堿別離，最后參考文獻6改用氨基柱，以乙腈-水體積比7822為流動相，在此條件下，鹽酸水蘇堿不僅能得到較好的保存，而且與其他峰完全別離，別離度到達要求。【參考文獻】1徐履琴.用硫代氰酸鉻銨剩余比色法測定益母草中生物堿J.中草藥,1985,(11):7-8.2盧日剛.分光光度法測定益母草沖劑中生物堿的含量J.藥學學報，1986,21(9):522-524.3周世玉，徐智明.薄層掃描法測定益母草膏中鹽酸水蘇堿的含量J.華西藥學雜志,1999,14(5-6):395-396.4楊雪萍，何召允.HPL法測定安宮止血顆粒中鹽酸水蘇堿的含量J.江西中醫藥，2022，382：51.5