1、高原鼢鼠肉木瓜卵白酶酶解物對小鼠免疫成效的影響潘明，趙弋清，侯假設彤，劉素君，楊志榮【關(guān)鍵詞】高原鼢鼠肉；木瓜卵白酶；酶解；免疫成效Keyrds：yspalaxbaileyieat；Papain；Hydrlysis；Iunefuntin高原鼢鼠yspalaxbaileyi是棲息于青藏高原的一種危害草場和農(nóng)田的數(shù)目宏大的地下嚙齒動物。據(jù)營養(yǎng)身分的闡發(fā)結(jié)果?四川動物?待發(fā)，高原鼢鼠肌肉除含有亞油酸等對人體有益的不飽和脂肪酸外，另有富厚的卵白質(zhì),鈣、鎂、鐵、鋅、磷等無機鹽和煙酸、核黃素、視黃醇等維生素，是一種營養(yǎng)代價很高的卵白質(zhì)資源。比年的研究表白，卵白質(zhì)水解為小肽后就可以被人體汲取1，而卵白質(zhì)水解

2、產(chǎn)物具有卵白質(zhì)無法相比的生理成效和營養(yǎng)代價。近幾年對高原鼢鼠肉的研究會合在脂溶性身分抗缺氧機制上25，如今尚未見對高原鼢鼠肌肉卵白酶解液免疫成效的相干研究報道。為了綜合開拓使用高原鼢鼠資源，變害為寶，進步高原鼢鼠肉卵白的營養(yǎng)和使用代價，本研究接納酶法水解高原鼢鼠肉，對酶解液的氨基酸身分舉行了闡發(fā)，并針對免疫體系中T淋巴細胞、B淋巴細胞和NK細胞，舉行了T淋巴細胞轉(zhuǎn)化實行、小鼠抗體天生脾細胞數(shù)(Ig-PF)、NK細胞殺傷毒性實行等免疫學實行，探究高原鼢鼠肉酶解液對小鼠免疫成效的影響。1質(zhì)料與要領(lǐng)1.1質(zhì)料與試劑高原鼢鼠yspalaxbaileyi：捕于四川省阿壩州假設爾蓋縣。木瓜卵白酶5.810

3、5U/g，美國Siga公司產(chǎn)物；RIP1640造就基，美國GIB公司產(chǎn)物；TT，nA，LPS；Alsever溶液；Hanks溶液；0.8%戊二醛溶液；1.51%綿羊紅細胞懸液。別的試劑：市售，均為闡發(fā)純。昆明種康健成年小鼠，牝牡各半，體重2022g，由四川大學華西實行動物中央提供。1.2儀器與裝備1.3要領(lǐng)殺傷率(%)=(靶細胞D值-實行組D值)靶細胞D值100%2結(jié)果2.1水解液的身分闡發(fā)在以上確定的最正確條件下水解得到的水解液呈淡黃色透明狀態(tài)，氨基酸闡發(fā)結(jié)果見表1。表1水解液的游離氨基酸和總氨基酸的闡發(fā)略2.2T淋巴細胞轉(zhuǎn)化實行結(jié)果見圖1。結(jié)果表現(xiàn)，與比較組相比，差異劑量組酶解產(chǎn)物對小鼠脾

4、T淋巴細胞增殖活性均有必然影響，存在顯著的劑量依靠干系，此中在濃度較低低劑量組時，對淋巴細胞增殖活性的調(diào)治作用很小，隨著添加濃度的增大，作用漸漸顯著，當濃度為0.4g/kg高劑量組時，增殖作用到達最大，與正常比較組比力，差異有明顯意義P0.05。從表1可見，高原鼢鼠肉卵白水解液含8種必須氨基酸在內(nèi)的17種氨基酸，且必須氨基酸占總氨基酸量的46.58%，說明高原鼢鼠肉水解后其必須氨基酸數(shù)目富足，構(gòu)成比例較為公正，切合FA/H發(fā)起的人體必須氨基酸形式；E/N=0.92，大于FA/H保舉的0.6；高原鼢鼠水解液中含有較高量嬰幼兒所需的組氨酸和精氨酸，以是高原鼢鼠肉水解液是一種優(yōu)質(zhì)卵白液；由于此中氨基

5、酸(谷氨酸、天冬氨酸、甘氨酸和丙氨酸等)的含量較高，占氨基酸總量的26.11%，故水解液味道非常鮮美。2.3酶解液對小鼠抗體天生脾細胞數(shù)(-PF)的影響圖2表現(xiàn)，各組小鼠脾臟的抗體天生細胞數(shù)依次升高，此中，酶解液高劑量組、中劑量組與比較組比力，差異具有明顯性意義(P0.05)，說明酶解液具有加強小鼠特異性體液免疫的成效。圖3表現(xiàn)，酶解液低劑量組、酶解液中劑量組、酶解液高劑量組與生理鹽水組比力，NK殺傷率均有進步；此中，酶解液低劑量組、酶解液中劑量組、與生理鹽水組比力，差異具有明顯性意義(P0.05)；酶解液高劑量組與生理鹽水組比力，差異具有極明顯性意義(P0.01)，說明高原鼢鼠肉木瓜卵白酶解

6、液能進步機體免疫力。3討論高原鼢鼠肉木瓜卵白酶解產(chǎn)物是氨基酸與多肽的混淆物，酶解能改變卵白質(zhì)的成效特性，如酶解能大大進步其溶解性；必然程度的水解也能進步其乳化性等，肽作為動物消化道卵白質(zhì)的酶解產(chǎn)物，是被敏捷汲取的氨基酸供體，可以或許調(diào)治動物體消化、神經(jīng)、內(nèi)排泄和免疫等體系的生命運動，這類物質(zhì)被稱為腔內(nèi)信號分子，隨著肽汲取理論為越來越多的人們擔當，活性肽在動物卵白質(zhì)營養(yǎng)中的作用愈發(fā)受到存眷，因此有人提出卵白質(zhì)的營養(yǎng)是肽的營養(yǎng)。機體免疫成效特殊是細胞免疫成效落落，是導致細菌和病毒熏染等發(fā)病率高的重要因素，體外淋巴細胞轉(zhuǎn)化實行是如今測定機體細胞免疫成效狀態(tài)的一種較好的要領(lǐng)9。天然殺傷細胞NK細胞是一

7、類緊張的免疫調(diào)治細胞，是機體細胞免疫成效的構(gòu)成部門，能非特異性地殺傷靶細胞，到場細胞免疫，在腫瘤免疫、抗病毒熏染中也具有緊張作用，其介導的細胞毒性作用是腫瘤細胞免疫監(jiān)視的第一道防地，因此，NK細胞在腫瘤免疫中的作用越來越受到器重，是如今已被公認的免疫監(jiān)視中最緊張的效應細胞。因此，研究生物活性物質(zhì)對NK細胞殺傷活性的影響有緊張意義。對T-細胞依靠的抗原SRB的抗體反響是體液免疫本領(lǐng)的表現(xiàn)，它是免疫力闡發(fā)中最敏感和最優(yōu)先的參數(shù)10，體內(nèi)對SRB的抗體反響，是反響了增長抗原細胞、T-細胞、B-細胞之間協(xié)同本領(lǐng)的免疫反響。本實行為了綜合開拓使用高原鼢鼠資源，探究高原鼢鼠肉酶解液對小鼠免疫成效的影響，變

8、害為寶，進步高原鼢鼠肉卵白的營養(yǎng)和使用代價，接納酶法水解高原鼢鼠肉得到的酶解物，針對免疫體系中T淋巴細胞、B淋巴細胞和NK細胞的免疫學實行。實行表白酶解物具有加強細胞免疫活性、體液免疫活性及NK細胞殺傷毒性的本領(lǐng)。【參考文獻】1黃鸝虹.大豆多肽的生理成效及應用J.食品科技，1999，3：50.2魏登邦，張寶琛.高原鼢鼠肉抗缺氧身分的挑選J.中國獸醫(yī)科技，2022，332：56.3魏登邦，張寶琛.高原鼢鼠肉脂溶性物質(zhì)的抗缺氧結(jié)果與化學身分J.動物學報2002，8(6)：7644劉海春，魏登邦.高原鼢鼠肉脂溶性物質(zhì)抗缺氧機制的探究J.黑龍江畜牧獸醫(yī)，2022，4：7.5魏登邦,張寶琛.高原鼢鼠肉脂溶性部門的抗氧化結(jié)果J.黑龍江畜牧獸醫(yī)，2002，7：1.6潘明，侯假設彤，王曉峰，等.高原鼢鼠肉卵白的木瓜卵白酶水解工藝研究J.四川大學學報工程科學版2022，37(3):68.7杜念興.獸醫(yī)免疫學.北京:中國農(nóng)業(yè)出書社，1995：210.8陳奇.中藥藥理研究要領(lǐng)學.北京:人民衛(wèi)生出書社,1994753.