1、實驗室生物安全標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程HYEY -PGC-2016（第三版）2016年1月11日發(fā)布2016年1月20日實施懷遠縣第二人民醫(yī)院實驗室生物安全標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程（SOPHYEYPGC-2016修訂表第1 頁 共1 頁第3版 第0次修訂2016年1月11日發(fā)布/1月20日實施版號規(guī)程號修訂次序修訂 內(nèi)容批準(zhǔn)日期實驗室生物安全標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程（SOPHYE*GC-2016第1 頁 共1 頁目錄第3版 第0 次修訂2016年1月11日發(fā)布/1月20日實施HYEWGCG-2016HYEYPGC02-2016HYEYPGC03-2016HYEYPGC04-2016HYEYPGC05-2016HYEWGC06-2

2、016HYEWGC07-2016HYEWGC08-2016HYEWGC09-2016HYEWGC10-2016HYEWGC11-2016實驗室人員進出實驗室實驗室檢測樣品采集實驗室檢測樣品包裝和運送實驗室檢測樣品接收樣品檢測操作規(guī)程電氣設(shè)備操作規(guī)程實驗室消毒劑配制標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程無菌間使用標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程實驗室廢棄物處理標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 實驗室消毒標(biāo)準(zhǔn)操作程序 實驗室意外事故處理實驗室生物安全標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程（SOPHYEWGCG-2016第1 頁 共 1 頁檢驗科實驗室人員進出實驗室第3版 第0 次修訂201年1月11日發(fā)布/1月20日實施目的制定檢驗科實驗室人員進出的標(biāo)準(zhǔn)操作程序，保障實驗室生物安全。適用

3、范圍適用于檢驗科實驗室人員進出程序。職責(zé)實驗室工作人員執(zhí)行本程序的規(guī)定。實驗室負責(zé)人負責(zé)監(jiān)督執(zhí)行。規(guī)程要求進入程序?qū)嶒炇胰藛T需將外衣掛入（避免將外衣與工作服混放），穿上工作服，按要求戴手 套、口罩等防護用品方可進入實驗室。退出程序工作結(jié)束后，實驗室人員在實驗室將一次性口罩、手套、鞋套等放入指定容器。先 用0.5%新潔爾滅對手進行消毒，再用消毒肥皂洗手。在指定區(qū)域脫下工作服，必要時 進行紫外消毒。實驗室人員退出實驗室后，必須將實驗室入口門關(guān)好，方可離開實驗 室。實驗室生物安全標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程（SOPHYEYPGC02-2016實驗室檢測樣品采集第1 頁共4 頁第3版 第0 次修訂2016年1月11日

4、發(fā)布/1月20日實施1目的為保障檢測實驗的順利進行，規(guī)范采樣程序，防止病原微生物在實驗室采樣過程 中產(chǎn)生污染。2適用范圍適用于實驗室內(nèi)采集、處理動物樣品。3職責(zé)采集檢測樣品的工作人員在采集過程中應(yīng)當(dāng)防止病原擴散，并對樣本的來源、采 集過程和處理方法等作詳細記錄。檢驗人員必須嚴格按照本操作規(guī)程操作，不可擅自做出超出本規(guī)程的操作，所有 實驗人員對所從事的工作負相應(yīng)的責(zé)任。4過程要求工作條件具有采集、處理樣品所需要的生物安全防護設(shè)備；具有掌握相關(guān)專業(yè)知識和操作技能的工作人員；具有有效的防止病原擴散的措施；具有保證檢測樣品質(zhì)量的技術(shù)方法和手段。實驗材料準(zhǔn)備滅菌的解剖器械（剪刀、銀子、手術(shù)刀、大刀、斧頭

5、等）、滅菌試管、平皿 或自封袋、載玻片、棉簽、營養(yǎng)肉湯、30% 50畫油鹽水緩沖液、加抗生素的PBS（病 毒保存液）、50%甘油磷酸鹽緩沖液、酒精燈、滅菌注射器、15mL的離心管、1.5mLEP 管、記號筆、簽字筆、防護服、無粉乳膠手套、防護口罩、鉛筆、空白標(biāo)簽紙、膠布、 75%酉精棉球、碘酒棉球、冰袋、冷藏容器、消毒藥品、采樣單等。活畜樣品的采集血清樣品的采集實驗室生物安全標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程（SOPHYEYPGC03-2016實驗室檢測樣品采集第2 頁 共4 頁第3版 第0 次修訂2016年1月11日發(fā)布/1月20日實施采血方法對采血部位的皮膚先剃（拔）毛，碘酊消毒，75%的酒精消毒，待干燥后采血

6、。采血方法推行生豬站立式前腔靜脈、牛羊站立式頸靜脈、禽類翅靜脈采血，采血過程 嚴格無菌。采血數(shù)量單一病種抗體監(jiān)測的每頭（只）采集 23mL全血，多病種抗體檢測的每頭（只） 采集510mL全血。全血保存采集好的全血轉(zhuǎn)入盛血試管，斜面存放，室溫凝固后直接放在盛有冰塊的保溫箱， 送實驗室。從全血采出到血清分出的時間不超過 10ho 4.3.1.4 血清分離凝固全血在室溫24h后，有血清析出時，用無菌針剝離血凝塊，然后放入4c 冰箱48h后，待大量血清析出時，吸出血清。必要時經(jīng)離心機3000rpm、30min離心，吸出血清。分離的血清，一般不加防腐劑。血清若在12周內(nèi)即可檢驗，可放在4c冰箱內(nèi)保存；如

7、果保存時間較長，應(yīng)放在 -20 C-80 C冰箱內(nèi)保存。運送血清 時可將血清放在盛有冰塊的保溫箱中運送。全血樣品的采集全血采集后應(yīng)直接注入盛有抗凝劑的試管中，立即搖動，充分混合。也可將全血 液注入盛有玻璃珠的滅菌瓶中，立即連續(xù)振蕩脫纖維蛋白活禽樣品的采集咽喉拭子的采集：將棉簽插入喉頭口及上顆裂處來回刮35次取咽喉分泌液,泄殖腔拭子的采集：將棉簽插入取泄殖腔轉(zhuǎn) 23圈并沾取少量糞便，再將咽喉拭子、 泄殖腔拭子一并放入盛有0.81.0mL加有抗生素PBS的EP管中，加蓋，編號。 4.5病死（屠宰）畜禽樣品的采集解剖前檢查實驗室生物安全標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程（SOPHYEYPGC03-2016第3 頁 共4

8、頁實驗室檢測樣品采集第3版第0 次修訂2016年1月11日發(fā)布/1月20日實施急性死亡的牛、羊、豬、馬等動物，解剖之前應(yīng)作臨床檢查，疑似炭疽病的應(yīng)采 血、鏡檢，排除炭疽病時，方可解剖。動物死亡后應(yīng)在6h內(nèi)進行剖檢。解剖人員要做好自我防護工作。肝、脾、腎、淋巴結(jié)、肺和牛、馬心臟樣品的采集在肝、脾、腎、淋巴結(jié)、肺和牛、馬心臟有病變的部位各采取23cmi的小方塊,分別置于滅菌的試管或平皿中。其他畜禽采集整個心臟，置于自封袋中。細菌分離樣 品的采集可用燒紅的刀片燙烙臟器表面，在燒烙部位刺一孔，用滅菌后的柏金耳伸入 孔內(nèi)，取少量組織或液體，作涂片鏡檢或劃線接種于適宜的培養(yǎng)基上。腦、脊髓樣品的采集3 -取

9、腦、脊髓23cm浸入50初油鹽水中或?qū)⒄麄€頭部（豬、牛、馬除外）割下， 用消毒紗布包裹，置于不漏水的容器中。腸、腸內(nèi)容物及糞便樣品的采集腸樣品的采集：選擇病變最嚴重的部分，將其中的內(nèi)容物棄去，用滅菌的生理鹽 水輕輕沖洗后，置于試管中。腸內(nèi)容物樣品的采集：燒烙腸壁表面，用吸管扎穿腸壁， 從腸腔內(nèi)吸取腸內(nèi)容物，放入盛有 30%r油鹽水中或者直接將帶有糞便的腸管兩端結(jié) 扎，從兩端剪斷。糞便樣品的采集：用棉簽插到直腸黏膜表面采集糞便，然后將拭子 放入盛有30初油鹽水中。液體病料樣品的采集采集膽汁、膿、粘液、關(guān)節(jié)液、水泡液等樣品時，用藥物或燙烙法消毒采樣部位， 用滅菌吸管（毛細吸管、注射器）經(jīng)消毒部位插

10、入，吸取內(nèi)部液體，然后將病料注入 滅菌試管中，加蓋。也可用接種環(huán)經(jīng)消毒部位插入，提取病料直接接種在培養(yǎng)基上。胎兒樣品的采集取流產(chǎn)后的整個胎兒，裝入自封袋或不透水塑料薄膜中。皮膚樣品的采集用清水清洗病變皮膚后，取病變皮膚35g放入滅菌小瓶中，加適量50%甘油磷實驗室生物安全標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程（SOPHYE-PGC03-2016實驗室檢測樣品采集第4 頁 共4 頁第3版 第0 次修訂2016年1月11日發(fā)布/1月20日實施酸鹽緩沖液（pH7.4）,加蓋密封。死（屠宰）禽樣品的采集死（屠宰）禽樣品的采集除按上述方法采集，也可將整個死禽裝入不透水塑料薄 膜袋或自封袋中或其他容器內(nèi)。組織樣品采集完后的無害化處

11、理活畜禽、病死畜禽組織樣品采集完后，應(yīng)做好樣品外包裝和環(huán)境消毒以及病死畜 禽及其產(chǎn)品的無害化處理。樣品編號、抽樣單填寫樣品編號每頭動物的不同部位的組織樣品應(yīng)單獨包裝。包裝好后，在樣品袋或平皿外貼上 標(biāo)簽，標(biāo)簽注明樣品名、樣品編號、采樣日期等。采集好不同部位的樣品后，同一動 物的樣品集中包裝。采樣單填寫可根據(jù)具體要求填寫實驗室生物安全標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程（SOPHYEWGC03-2016第1 頁 共2 頁實驗室檢測樣品包裝和運送第3版 第 0次修訂2016年1月11日發(fā)布/1月20日實施1目的維護檢測樣品的質(zhì)量，防止病原的泄漏和擴散，保障樣品檢測的順利開展。2適用范圍適用于檢測樣品的包裝和運送。3職責(zé)操

12、作者必須嚴格按照本程序操作，不可擅自做出超出本程序的操作，所有實驗人 員對所從事的工作負相應(yīng)的責(zé)任。實驗室負責(zé)人負有對樣品包裝、運輸?shù)谋O(jiān)督和管理職責(zé)，并監(jiān)督檢查相關(guān)工作人 員的安全工作程序和行為。4過程要求擬運輸?shù)臉悠罚髧烂馨b，外表加以消毒，編號、登記后，貼上“生物危險” 標(biāo)識，并嚴防標(biāo)識脫落。樣品必須經(jīng)三層包裝。樣品的包裝內(nèi)包裝外包裝實驗室生物安全標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程（SOPHYEYPGC03-2016第2 頁 共2 頁實驗室檢測樣品包裝和運送第3版 第0 次修訂2016年1月11日發(fā)布/1月20日實施4.1.3包裝要求在輔助包裝周圍必須放置冰、干冰或者其他冷凍劑，或者按照規(guī)定將冷凍劑放在 由

13、一個或者多個完整包裝件組成的合成包裝件中，內(nèi)部要有支撐物，干冰或者干冰消 耗掉以后，仍可以把輔助包裝固定在原位置上。如果使用冰，包裝必須不透水；如果 使用干冰，外包裝必須能排出二氧化碳氣體；如果使用冷凍劑，主容器和輔助包裝必 須保持良好的性能，在冷凍劑消耗完以后，仍能承受運輸中的溫度和壓力。主容器必須是火焰封口的玻璃安甑或者是用金屬封口的膠塞玻璃瓶。 在輔助包裝周圍還必須放置冰、干冰或者其他冷凍劑實驗室生物安全標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程（SOPHYE*GC04-2016第1 頁 共1 頁實驗室檢測樣品接收第3版 第0 次修訂2016年1月11日發(fā)布/1月20日實施1目的規(guī)范接收檢測樣品，保證生物安全2適用范

14、圍適用于送檢樣品的交接管理。3職責(zé)專人負責(zé)接收樣品和接樣的生物安全。4過程要求檢測樣品由專人接收，在接收送檢樣品時應(yīng)作好樣品登記，填寫樣品接收登記 表，并對樣品進行符合性檢查，檢查包括：(1)樣品包裝、標(biāo)志及外觀是否完好；(2)對照抽樣單核查樣品的名稱、采樣地點、樣品數(shù)量、性狀等信息；(3)樣品是否損壞、污染或已過有效期。接樣人進行樣品登記、保存后，報告實驗室負責(zé)人安排檢測工作。檢驗后的剩余樣品，由樣品保管人負責(zé)留存。實驗室生物安全標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程(SOPHYE*GC05-2016第1 頁 共1 頁樣品檢測操作規(guī)程第3版 第0 次修訂2016年1月11日發(fā)布/1月20日實施1目的為規(guī)范樣品的檢測，

15、特制定本規(guī)程。2適用范圍適用不同待檢樣品的檢測。3職責(zé)實驗室工作人員嚴格依照本規(guī)程進行樣品的檢測。實驗室負責(zé)人負責(zé)監(jiān)督實驗室工作人員樣品的檢測工作。4過程要求樣品的檢測方法應(yīng)采用作業(yè)指導(dǎo)書-檢測標(biāo)準(zhǔn)(GPADC-ZYBZ-201E規(guī)定的方 法。5.相關(guān)文件作業(yè)指導(dǎo)書-檢測標(biāo)準(zhǔn)(GTCADC-ZYBZ-201E實驗室生物安全標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程(SOPHYEWGC06-2016電氣設(shè)備操作規(guī)程第1 頁 共1 頁第3版 第0 次修訂2016年1月11日發(fā)布/1月20日實施1目的為規(guī)范實驗室電氣設(shè)備的使用和維護，特制定本規(guī)程2適用范圍適用于電氣設(shè)備的操作和維護。3職責(zé)實驗室工作人員嚴格依照本規(guī)程進行使用電氣

16、設(shè)備。4過程要求實驗室工作人員必須熟悉儀器的性能、用途、使用方法，嚴格按照說明書使用， 遵守儀器操作規(guī)程。儀器使用過程中發(fā)生故障必須立即停止使用，并報告實驗室負責(zé)人，及時查找原 因，盡快排除，并登記。使用完畢必須對使用過的儀器設(shè)備按相關(guān)要求去除污染，以減少污染風(fēng)險。5相關(guān)文件作業(yè)指導(dǎo)書-儀器設(shè)備操作規(guī)程(GTCADC-ZYGC-2016)實驗室生物安全標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程(SOPHYE-PGC07-2016第1 頁 共2 頁實驗室消毒劑配制標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程第3版 第0 次修訂2016年1月11日發(fā)布/1月20日實施1目的規(guī)范實驗室消毒劑配制，保證消毒液的有效性和實驗室生物安全。.適用范圍適用于檢驗科實驗室

17、常用消毒劑的配制。.職責(zé)實驗室工作人員負責(zé)常用消毒劑的配制。.過程要求消毒劑配制配制前，實驗室工作人員應(yīng)洗凈配制容器及量具，自然晾干。按試劑配制的配 方和配質(zhì)量量取所需藥品。按配制要求的先后順序加入藥品，攪拌均勻配制試劑。4.3配制過程產(chǎn)熱的試劑待自然冷卻后分裝，并將填寫好品名、濃度、配制時間、有 效期的標(biāo)簽貼于盛裝容器上。做好配制記錄。常用消毒劑的配方及注意事項見下表 1實驗室生物安全標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程（SOPHYE-PGC07-2016第2 頁 共2 頁實驗室消毒劑配制標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程第3版 第0 次修訂2016年1月11日發(fā)布/1月20日實施表1常用消毒劑種類和配制方法表消毒劑名稱用途配制方法備注

18、0.2%新潔爾火手消毒，儀器表面消1寸量取5%新潔爾滅溶液 100mL置于配制容器中，加入2400mL純化水?dāng)嚢杌靹颉?%NaOH溶液原位消毒稱取20gNaOH固體，緩慢加入純化水定容到1000mL。強堿pH值大于1375%乙醇手表面消毒取750mL無水乙醇加純化水定容到 1000mL。配制好的過15%18%過氧乙冰醋酸：H2O2 :濃 H2SO4按體積比140.0 : 60.0 : 2.1配制。根據(jù)需要量分別量取所氧乙酸需室 溫放置48h后 使用。超過酸實驗室薰烝消毒需的過氧化氫、冰醋酸和濃硫酸。置于配制容 器中攪拌均勻。使用時可加入催化劑高鎰酸鉀 或加熱。20%的過氧乙酸會發(fā)生爆炸。一周內(nèi)

19、用完。實驗室生物安全標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程（SOPHYEY-PGC08-2016第1 頁 共2 頁無菌間使用標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程第3版 第0 次修訂2016年1月11日發(fā)布/1月20日實施1目的確保無困室環(huán)境的無困狀態(tài)。2適用范圍適用于無菌間空氣微生物監(jiān)測。3職責(zé)實驗室工作人員負責(zé)實驗室空氣微生物監(jiān)測和實施。4過程要求實驗室工作人員在進無菌間之前，應(yīng)先用2%碳酸或來蘇爾對手進行浸泡消毒。緩沖間在每次使用前，應(yīng)先打開紫外燈，紫外照射 30 min；工作人員在進入無菌 室前，必須于緩沖間內(nèi)更換消毒過的工作服、 工作帽及工作鞋。檢驗用的有關(guān)器材（待 檢品除外），搬入無菌室前必須分別進行滅菌消毒。將無菌間和生物安全柜的

20、紫外燈打開照射 30min后，才能進行工作。實驗完畢后，用0.2%新潔爾滅消毒液擦拭生物安全柜臺面，打開生物安全柜內(nèi)紫外燈，照射30min。同時無菌間和緩沖間的紫外燈一并打開，照射30min。工作人員在緩沖間脫下工作服、工作帽及工作鞋。適時應(yīng)對無菌間進行熏蒸消毒。每月應(yīng)對無菌間進行一次無菌檢查記錄營養(yǎng)瓊脂平板的制備按營養(yǎng)瓊脂說明書配制營養(yǎng)瓊脂，120c 15min高壓滅菌后，冷卻到50c左右傾 倒于9cm的平板。待瓊脂凝固后，放37C 48h培養(yǎng)，無菌生長，方可以使用。沉降菌數(shù)測定先打開無菌室內(nèi)紫外燈照射30min后，將備妥的營養(yǎng)瓊脂平板5個。以無菌方式移入 操作間，置四個角落和中央各1個，開

21、蓋，暴露30分鐘后將蓋蓋上。在37c培養(yǎng)箱 內(nèi)倒置培養(yǎng)48h,取出檢查。分別數(shù)出5個平板的生長菌落數(shù)并得出5個平板的平均菌落數(shù)實驗室生物安全標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程（SOPHYEY-PGC08-2016第2 頁 共2 頁無菌間使用標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程第3版 第0 次修訂2016年1月11日發(fā)布/1月20日實施無菌室內(nèi)的潔凈級別應(yīng)達到10000級，即在進行沉降菌數(shù)測定時，平均菌落數(shù)應(yīng) 小于或等于3個（小90mm, 0.5h）。如所測得的平均菌落數(shù)小于 3個，則證明該無 菌室無菌程度符合要求，否則該無菌室的無菌程度不符合要求，需要對無菌間進行徹 底消毒，直至重復(fù)檢查符合要求為止。實驗室生物安全標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程（SOPHY

22、E-PGC09-2016第1 頁 共2 頁實驗室廢棄物處理標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程第3版 第0 次修訂2016年1月11日發(fā)布/1月20日實施1目的制定實驗室廢棄物安全處理操作規(guī)程，保障實驗室生物安全。2適用范圍適用于實驗室廢棄物的處理。3職責(zé)實驗室工作人員嚴格遵守本規(guī)程，并對所從事的工作負有生物安全責(zé)任。實驗室負責(zé)人負有監(jiān)督和管理責(zé)任。4過程要求實驗室工作人員做好個人防護。穿好工作服、戴好手套、口罩和帽子等。實驗室廢棄物使用防滲專用包裝容器（袋）或者防銳器穿透密閉容器收集，及 時進行無害化處理，并做好實驗室廢棄物處理記錄。廢棄物分類處理感染性廢棄物處理培養(yǎng)基、標(biāo)本和菌（毒）種保存液、血液、血清、臨床標(biāo)本

23、等感染性廢棄物須進 行壓力蒸汽滅菌。用過的一次性實驗用品（包括手套、口罩、帽子等）及試管、吸管、 移液器吸頭等感染性廢棄物可進行壓力蒸汽滅菌或消毒液浸泡 24h0損傷性廢棄物處理針頭、縫合針、解剖刀、手術(shù)刀、備皮刀、手術(shù)鋸，試驗玻片、玻璃試管、玻璃 安甑等能夠刺傷或割傷人體的廢棄的實驗利（銳）器等損傷性廢棄物需放入符合要求 的利器盒里，容器裝滿3/4后封蓋，進行高壓蒸汽滅菌處理。藥物性廢棄物處理過期、淘汰、變質(zhì)或者被污染的診斷試劑可采用壓力蒸汽滅菌處理。病理性廢棄物處理動物組織及動物尸體使用兩層防滲專用包裝容器（袋）包裝好（外包裝進行徹底 的消毒處理），按要求進行焚燒、深埋或送往無害化處理場處

24、理。做好廢棄物處實驗室生物安全標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程（SOPHYE-PGC09-2016第2 頁 共2 頁實驗室廢棄物處理標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程第3版 第0 次修訂2016年1月11日發(fā)布/1月20日實施理記錄化學(xué)品廢棄按組分收集后，倒入專用化學(xué)廢棄物收集桶內(nèi)，集中處理實驗室生物安全標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程（SOPHYEWGC10-2016實驗室消毒標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程第1 頁 共 1 頁第3版 第0 次修訂2016年1月11日發(fā)布/1月20日實施1目的保護實驗室的生物安全，防止病原逃逸。2適用范圍實驗室日常清潔，實驗過程中產(chǎn)生的污染廢棄物、使用過的防護裝備及設(shè)施設(shè)備 等的消毒。3職責(zé)實驗室工作人員按照本標(biāo)準(zhǔn)進行日常消毒。4過程要求

25、儀器設(shè)備表面：用0.2湎潔爾或0.1%0.2%效氯消毒液擦拭，30min后再用清 潔的濕抹布擦拭2次。廢棄的病毒材料和操作過程中使用的一次性耗材先置于2%NaOH液浸泡2h,按照廢棄物的處理程序處理。生物安全柜臺面：用0.5%新潔爾、0.1%0.2%有效氯等消毒液浸濕的無紡抹布擦 拭，30min后再用清潔的濕抹布擦拭2次。使用生物安全柜前后，要用紫外線照射消 毒 30min。個人防護裝備：工作鞋、橡膠手套可用0.1%0.2%有效氯消毒液浸泡2h,工作衣帽和口罩高溫高壓消毒后清洗。手消毒：用75%L醇進行消毒。地面及墻壁：用0.1%0.2%有效氯消毒液浸濕的抹布擦拭，30min后再用清潔的 濕抹布擦拭1次。3 .4.7實驗室空間消毒：根據(jù)實驗室的空間