1、*實驗動物研究中心屏障動物實驗室工作人員崗前培訓(xùn)2009年10月- -目錄外單位在我中心開展動物實驗流程2一、提出實驗意向、洽談實驗細(xì)節(jié)3二、提交實驗動物使用計劃3三、屏障動物實驗室工作人員崗前培訓(xùn)內(nèi)容31、屏障設(shè)施概述4（1）、概念4（2）、屏障設(shè)施的布局42、進(jìn)入屏障設(shè)施實驗人員的要求6（1）、屏障設(shè)施動物實驗人員的衛(wèi)生及健康檢查6（2）、屏障設(shè)施動物實驗人員衛(wèi)生管理63、屏障動物實驗室工作流程7（1）、進(jìn)入屏障實驗區(qū)7TOC o 1-5 h z（2）、人員進(jìn)入屏障動物實驗室的步驟7（3）、動物進(jìn)入屏障動物實驗室的步驟8（4）、物品進(jìn)入屏障動物實驗室的注意事項8（5）、進(jìn)入屏障動物實驗室后

2、的準(zhǔn)備工作9（6）、屏障動物實驗室內(nèi)工作的注意事項9（7）、離開屏障動物實驗室的注意事項104、屏障動物實驗室常見突發(fā)事件的應(yīng)急處理10（1）、意外斷電10（2）、動物咬傷11（3）、漏電11- -外單位在我中心開展動物實驗流程向我單位提出實驗意向、洽談實驗細(xì)節(jié)向我單位提交實驗動物使用計劃簽訂實驗室使用協(xié)議進(jìn)行屏障動物實驗室工作人員崗前培訓(xùn)實驗開始前準(zhǔn)備工作（動物、儀器等的傳入）進(jìn)行實驗實驗結(jié)束收尾工作（動物、取材、數(shù)據(jù)的傳出）各項費用的結(jié)算- -一、提出實驗意向、洽談實驗細(xì)節(jié)外單位在我中心開展動物實驗首先需要提出實驗意向，包括：實驗名稱、實驗方案、實驗周期、實驗人員（具體進(jìn)入屏障內(nèi)工作的實驗

3、人員）、實驗動物使用計劃、實驗器材及其他特殊要求。同時實驗單位須向我中心保證不得在屏障設(shè)施內(nèi)有任何威脅屏障安全運轉(zhuǎn)的行為或?qū)嶒灢僮鳎òú坏眠`反各項操作規(guī)程、不得帶入任何病原微生物等）。二、提交實驗動物使用計劃及時提交實驗動物使用計劃是動物實驗順利進(jìn)行的前提和保障。實驗動物使用計劃包括以下內(nèi)容：動物品系、數(shù)量、性別、體重或周齡、需求時間。分批使用實驗動物的還要注明使用每批動物的間隔時間。如需外購實驗動物在我中心開展動物實驗必須征求我中心同意。三、屏障動物實驗室工作人員崗前培訓(xùn)內(nèi)容為保證在屏障內(nèi)各單位實驗的順利進(jìn)行、及屏障設(shè)施的安全運轉(zhuǎn)，所有進(jìn)入屏障設(shè)施的實驗人員都必須進(jìn)行屏障動物實驗室工作人員

4、崗前培訓(xùn)。培訓(xùn)內(nèi)容包括：屏障設(shè)施的基本概念、了解我中心屏障動物實驗室的各個區(qū)域及其功能、學(xué)習(xí)屏障動物實驗室各項SOP、屏障動物實驗室工作流程、常見突發(fā)事件的應(yīng)急處理。1、屏障設(shè)施(BarrierFacility)概述（1）、概念是指一個相對密閉的實驗動物設(shè)施環(huán)境，設(shè)有恒溫、恒濕和除菌nunu換氣系統(tǒng)。要求送入空氣的潔凈度達(dá)10,000級，室內(nèi)保持正壓，嚴(yán)格的微生物控制，用以飼養(yǎng)清潔級或SPF級動物。（2）、屏障設(shè)施的布局屏障設(shè)施一般分為清潔區(qū)、污染區(qū)和外部。凡是進(jìn)入該設(shè)施內(nèi)的物品均需經(jīng)過消毒滅菌處理，人員經(jīng)過專門培訓(xùn)，進(jìn)入清潔區(qū)前經(jīng)淋浴，更換無菌衣帽，遵循嚴(yán)格的操作規(guī)程和管理制度，保證屏障內(nèi)不

5、被污染。同時，設(shè)施內(nèi)產(chǎn)生的污染氣體和塵埃也不能污染外部，一般應(yīng)根據(jù)設(shè)施內(nèi)產(chǎn)生的污染物的特點，采取行之有效的方法。1、屏障設(shè)施(BarrierFacility)概述1、屏障設(shè)施(BarrierFacility)概述rjlAMft-1、屏障設(shè)施(BarrierFacility)概述1、屏障設(shè)施(BarrierFacility)概述1屏障設(shè)施的組成市匕兮刪醜- -*實驗動物中心屏障動物室實驗區(qū)平面圖- #- -淋浴間衛(wèi)生間電梯間男外更室女外衣室動物尸體DDD廊圖例三號動物實驗室一號動物實驗室清潔物品貯存庫洗刷間物品走向人員、物品走向潔凈區(qū)四號動物實驗室二號動物實驗室動物檢驗檢疫間男內(nèi)更室而人員走向-

6、 -勤洗頭、勤修剪30min內(nèi)或飲酒后2、進(jìn)入屏障設(shè)施實驗人員的要求進(jìn)入屏障設(shè)施的實驗人員必須經(jīng)過特定的技術(shù)培訓(xùn)，這是屏障設(shè)施內(nèi)安全和標(biāo)準(zhǔn)化運行的前提也是實驗結(jié)果真實可信的保證。（1）、屏障設(shè)施動物實驗人員的衛(wèi)生及健康檢查檢查、了解動物實驗人員及其家庭有無過敏史，尤其是對動物的皮屑、血液、尿液等有無過敏反應(yīng)；應(yīng)沒有明顯的運動、呼吸、循環(huán)等系統(tǒng)障礙。重點檢查人與動物存在交叉?zhèn)魅镜募?xì)菌如沙門氏菌、布氏桿菌、結(jié)核桿菌等，真菌如皮膚真菌及寄生蟲等。與動物接觸的人員每年應(yīng)進(jìn)行1次健康狀況檢查。（2）、屏障設(shè)施動物實驗人員衛(wèi)生管理主要控制好設(shè)施內(nèi)人員的清潔衛(wèi)生，否則容易通過人員進(jìn)出污染設(shè)施，因此，必須建立

7、屏障設(shè)施內(nèi)人員衛(wèi)生管理規(guī)程，并由指定負(fù)責(zé)人檢查、記錄、實施。其衛(wèi)生管理有以下要求：設(shè)施內(nèi)作業(yè)人員要養(yǎng)成無菌觀念和清潔習(xí)慣，指甲及胡須等。皮膚有損傷、炎癥、瘙癢癥者，對化學(xué)纖維、化學(xué)試劑、藥品及動物等有過敏反應(yīng)者，手汗嚴(yán)重者不宜進(jìn)入潔凈區(qū)。患流感、感冒、咳嗽、噴嚏者、腹瀉者、頭皮多者，者等待其恢復(fù)正常健康后方可進(jìn)入潔凈區(qū)。禁止化妝進(jìn)入潔凈區(qū)，女性經(jīng)期不宜進(jìn)入屏障設(shè)施工作。禁止在潔凈區(qū)內(nèi)吸煙、進(jìn)食和飲水。吸煙后不能進(jìn)入潔凈區(qū)。3、屏障動物實驗室工作流程（1）、進(jìn)入屏障實驗區(qū)進(jìn)入屏障實驗區(qū)要通知屏障實驗室管理人員，在非工作日進(jìn)入屏障區(qū)要事先與屏障實驗室管理人員溝通。進(jìn)入和離開屏障區(qū)都必須填寫進(jìn)出記錄

8、，并更換拖鞋。進(jìn)入屏障動物實驗區(qū)需更換實驗區(qū)拖鞋。進(jìn)出屏障動物實驗室需填寫實驗室進(jìn)出記錄。進(jìn)入屏障實驗區(qū)開展一個新實驗還需填寫與實驗相關(guān)的各種表格（2）、人員進(jìn)入屏障動物實驗室的步驟：進(jìn)入外更衣室，關(guān)閉外側(cè)門。脫下的衣服及其他物品放在更衣柜內(nèi)（個人物品如鑰匙、手表、飾品等禁止帶入潔凈區(qū)，請事先妥善保管）。通過淋浴間，進(jìn)入內(nèi)更衣室，先用外科洗手液將雙手反復(fù)搓洗消毒后才能接觸內(nèi)更衣室的無菌物品。先戴一次性口罩，再穿上隔離服，最后戴上一次性手套。打開內(nèi)更衣室紫外燈開關(guān)同時關(guān)閉照明燈開關(guān)，迅速離開內(nèi)更衣室。進(jìn)入風(fēng)淋間進(jìn)行風(fēng)淋后進(jìn)入清潔走廊。注意事項：要盡量減少進(jìn)入潔凈區(qū)的人次。未按規(guī)定處理的任何物品不

9、能帶入潔凈區(qū)。在屏障設(shè)施內(nèi)操作人員動作幅度要小，不能拖步行走和跳躍。各區(qū)域要隨手關(guān)門，并更換在該區(qū)域內(nèi)使用的拖鞋，實驗人員不得進(jìn)入與其實驗無關(guān)房間。禁止在潔凈區(qū)內(nèi)解（拉）開工作服暴露身體，戒除在操作中用手摸口、鼻、眼睛和頭發(fā)的習(xí)慣，手更不得接觸暴露部位。嚴(yán)格執(zhí)行人流、物流、動物流單向流動的原則。（3）、動物進(jìn)入屏障動物實驗室的步驟：動物到達(dá)后在屏障外檢查運輸盒是否完好，有無破損情況。按照動物運輸箱上的標(biāo)簽，核對動物的出生日、周齡或體重、品系名、性別、數(shù)量、供應(yīng)單位名稱、動物的微生物控制等級等與要求是否相符。運輸盒表面用消毒液噴霧或擦拭消毒。確認(rèn)傳遞窗兩側(cè)門關(guān)閉后，再打開外側(cè)門，將運輸盒放入。打

10、開傳遞窗紫外燈，15min照射。打開內(nèi)側(cè)門，將運輸盒搬入屏障清潔區(qū)。打開運輸盒蓋，將動物移入飼養(yǎng)盒內(nèi)，動物飼養(yǎng)盒上掛上標(biāo)簽，記錄必要的背景資料。取出動物后的運輸盒，盡快從傳遞窗或傳遞室傳出。（4）、物品進(jìn)入屏障動物實驗室的注意事項：進(jìn)入實驗動物屏障設(shè)施內(nèi)的物品品種多、數(shù)量大、無菌技術(shù)要求嚴(yán)格。必須嚴(yán)格執(zhí)行凈化操作規(guī)程。屏障動物實驗室內(nèi)常用的物品概括起來有以下幾類。玻璃類注射器、試管、燒杯、量筒、培養(yǎng)皿等。金屬類各類器械、針頭和各種小型儀器設(shè)備、籠架、籠盒、容器等。塑膠類各類實驗用膠管、連接管、塑料動物籠盒及容器等。棉布、紗布類棉球、工作服、帽、鞋、創(chuàng)巾、創(chuàng)布等。液體實驗用水、衛(wèi)生用水、動物飲用

11、水、試劑、培養(yǎng)基等。飼料顆粒飼料、粉狀飼料及特殊飼料。墊料刨花、紙屑等。紙張各種記錄用紙、資料等。以上各種物品能進(jìn)行高壓蒸汽滅菌的盡量使用高壓蒸汽滅菌，不能高壓蒸汽滅菌的可根據(jù)其具體情況選擇消毒液表面滅菌后經(jīng)傳遞窗加入飼料與飲水瓶。在60Co輻照滅菌。紫外燈輻射30min后傳入屏障實驗室。飼料應(yīng)使用（5）、進(jìn)入屏障動物實驗室后的準(zhǔn)備工作：計劃好當(dāng)日工作內(nèi)容，在潔庫配好消毒液，取足當(dāng)天所需物品、實驗器材、動物飲水、飼料等，一次移入實驗室，遵循人員物品單向流動的原則。（在準(zhǔn)備進(jìn)入實驗室前返回內(nèi)更衣室關(guān)閉紫外燈開關(guān)）（6）、屏障動物實驗室內(nèi)工作的注意事項：打開實驗室工作燈，進(jìn)入實驗室確認(rèn)實驗室有無異

12、常。包括室內(nèi)溫度、濕度（一般屏障動物實驗室要求溫度在16D26之間，相對濕度在40D70DODD、水瓶有無漏水、有無動物逃逸、室內(nèi)有無其他異常等。如有異常要及時與實驗室管理人員溝通。檢查每盒動物的飲水及攝食狀況，若飲水及攝食正常則繼續(xù)一天的工作。若飲水及攝食不正常的動物籠，先檢查是否飲水瓶阻塞，再觀察動物是否有疾病征兆。若有，告知實驗室管理人員。發(fā)現(xiàn)動物死亡，要調(diào)查死亡原因，判斷事故死亡還是異常死亡，不能確定原因的要將整盒動物送出屏障待查，并立即告知實驗室管理人員，不得隱瞞。動物飼喂及給水：滅菌飼料必須使用料鏟添加，不能直接用手- #- -飲水要保證連續(xù)不斷，為避免微生物污染水瓶，拿取。飼料用

13、料斗給食，落在地上的不能使用。必須擰緊瓶塞，防止瓶塞漏水造成動物溺死。還應(yīng)常檢查動物在吸水過程中，口內(nèi)食物顆粒和唾液可倒流入水瓶。水瓶滅菌后僅限一次性使用。嚴(yán)禁未經(jīng)消毒的水瓶繼續(xù)使用。完成當(dāng)日實驗離開實驗室前應(yīng)再次檢查水瓶和飼料。如工作需要從一個實驗室到另一個實驗室內(nèi)，雙手應(yīng)放在消毒液中消毒，并脫去該實驗室的拖鞋，進(jìn)入另一實驗室后換上新的拖鞋。使用屏障動物實驗室內(nèi)儀器設(shè)備要及時登記，如有異常要及時告知實驗室管理人員。（7）、離開屏障動物實驗室的注意事項：整理實驗室中物品、器械。登記實驗室溫濕度、壓力記錄。將污物移至污染走廊（污物中如有實驗處死動物必須保證動物死亡才能移出實驗室）。打掃實驗室內(nèi)衛(wèi)

14、生。飼育架、操作臺等要用配好的消毒液擦拭，地面上的污物、墊料、飼料殘渣要以從清潔走廊到污染走廊的方向先清掃干凈，再用拖布沾消毒液擦拭干凈。關(guān)閉實驗室工作燈、對講機并斷開一切電源，確認(rèn)無異常后離開。將污物及污水由緩沖間帶出清潔區(qū)。登記離開屏障動物實驗室的時間。將換下的隔離服放入洗刷間洗衣機旁的整理箱內(nèi)。實驗結(jié)束后實驗單位如需帶走實驗動物須事先告知實驗室管理人員。在實驗室管理人員在場的情況下方可進(jìn)行。外單位運輸實驗動物的籠具必須遠(yuǎn)離屏障設(shè)施，由我中心綜合辦公室代為發(fā)放。4、屏障動物實驗室常見突發(fā)事件的應(yīng)急處理在屏障動物實驗室發(fā)生任何突發(fā)事件請在第一時間通知我科室工作人員。（1）、意外斷電意外斷電時

15、，已進(jìn)入屏障動物實驗室的實驗人員在所處的位臵原地待命，禁止開啟各實驗室的門，以減少空氣的流動。同時借助應(yīng)急燈關(guān)閉正在操作的設(shè)備，待恢復(fù)供電后再逐個啟動。未進(jìn)入屏障動物實驗室的實驗人員在休息室等待，待電力供應(yīng)正常后再進(jìn)入屏障系統(tǒng)。如緊急備用發(fā)電系統(tǒng)無法立即啟動，或為長時間停電，實驗人員應(yīng)借助應(yīng)急燈迅速離開屏障動物實驗室。以免實驗人員進(jìn)出屏障設(shè)施而引起的溫度升高、室內(nèi)外空氣的對流等而影響動物的健康和質(zhì)量。恢復(fù)正常供電時，應(yīng)逐個啟動相關(guān)設(shè)備，以免瞬間的高啟動電流引起的設(shè)備故障。恢復(fù)供電后觀察實驗室的動物情況（死亡、出汗、行動狀況等）及設(shè)備的運行等情況。（2）、動物咬傷向?qū)嶒炇夜芾砣藛T報告。如傷口不大，可當(dāng)場進(jìn)行適當(dāng)處理，我中心常備緊急救濟所需要的基本物品，如棉花、紗布、膠布、消毒水、70酒精、碘伏、雙氧水、抗生素等。如感身體不適，應(yīng)在