1、培養基配方1營養肉湯成分：蛋白胨10g,牛肉膏3g，氯化鈉5g，蒸餾水lOOOmL,pH7.4。制法：按上述成分混合，溶解后校正pH,121X高壓滅菌15min。營養瓊脂培養基成分：蛋白胨10g，牛肉膏3g,氯化鈉5g,瓊脂17g,蒸餾水1000mL,pH7.2。制法：將除瓊脂外的各成分溶解于蒸餾水中，校正pH,加入瓊脂，分裝于燒瓶內，121C,15min高壓滅菌備用。MRS培養基成分：蛋白胨10g，牛肉膏10g,酵母粉5g,K2HPO42g,檸檬酸二銨2g,乙酸鈉5g,葡萄糖20g,吐溫801mL,MgSO4.7H2O0.58g,MnSO44H2O0.25g,（瓊脂1520g），蒸餾水100

2、0mL。制法：將以上成分加入到蒸餾水中，加熱使完全溶解，調dH至6.26.4,分裝于三角瓶中，121C,滅菌15min。脫脂乳培養基成分：牛奶，蒸餾水。制法：將適量的牛奶加熱煮沸2030min,過夜冷卻，脂肪即可上浮。除去上層乳脂即得脫脂乳。將脫脂乳盛在試管及三角瓶中，封口后置于滅菌鍋中在108C條件下蒸汽滅菌1015min,即得脫脂乳培養基。培養基A成分：蛋白胨10.0g，酵母提取物1.0g,葡萄糖10.0g,NaCL5.0g，瓊脂15.0g,水1000mL。制法：將以上成分加入到蒸餾水中，加熱使完全溶解，調dH至7.07.2，分裝于三角瓶中，121C，滅菌15min。PTYG培養基成分：胰

3、胨Tryptone（Oxoid）5g,大豆蛋白胨5g，酵母粉（Oxoid）10g，葡萄糖10g，吐溫8001mL,瓊脂1520g,L-半胱氨酸鹽酸鹽0.05g，鹽溶液4mL。制法：將以上成分加入到蒸餾水中，加熱使完全溶解，調dH至6.87.0,分裝于三角瓶中，115C滅菌30mino鹽溶液制備：無水氯化鈣0.2g,K2HPO41.0g,KH2PO41.0g,MgSO4。7H2O0.48g,NaCO310g,NaCL2g,蒸餾水1000mL,溶解后備用。豆芽汁液體培養基成分：豆芽汁10mL,磷酸氫二銨1g,KCL0.2g,MgSO4.7H2O0.2g瓊脂20g。制法：將以上成分加入到蒸餾水中，加

4、熱使完全溶解，調dH至6.26.4,分裝于三角瓶中,0.04%的溴甲酚紫酒精溶液（黃色5.26.8紫色）作為指示劑，115C滅菌20min豆芽汁制備：將黃豆芽或綠豆芽200g洗凈，在1000mL中煮沸30min,紗布過濾得豆芽汁、補足水分至1000mL。麥芽汁瓊脂培養基成分：優質大麥或小麥，蒸餾水，碘液。制法：取優質大麥或小麥若干，浸泡612h,置于深約2cm的木盤上攤平，上蓋紗布，每日早、中、晚各淋水一次，麥根伸長至麥粒兩倍時，停止發芽晾干或烘干。稱取300g麥芽磨碎，加1000mL水，38C保溫2h，再升溫至45C,30min,再提高到50C,30min,再升至60C，糖化11.5h。取糖

5、化液少許，加碘液12滴，如不為藍色，說明糖化完畢，用文火煮半小時，四層紗布過濾。如濾液不清，可用一個雞蛋清加水約20mL調勻，打至起沫，倒入糖化液中攪拌煮沸再過濾，即可得澄清麥芽汁。用波美計檢測糖化液濃度，加水稀釋至10倍，調pH56，用于酵母菌培養；稀釋至56倍，調pH7.2，可用于培養細菌，121C滅菌20min。查（察）氏培養基成分：NaNO32g，K2HPO41g，MgSO4.7H2O0.5gKCL0.5g，FeSO4.7H2O0.01g,蔗糖30g，瓊脂1520g，蒸餾水1000mL，pH值自然。制法：加熱溶解，分裝后121C滅菌20min。馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養基（PDA）成分：馬鈴

6、薯（去皮）200g，葡萄糖（或蔗糖）20g，瓊脂20g，水1000mL。制法：pH值自然。將馬鈴薯去皮、洗凈、切成小塊，稱取200g加入1000mL蒸餾水，煮沸20min，用紗布過濾，濾液補足水至1000mL，再加入糖和瓊脂，溶化后分裝，121C滅菌20min。另外，用少量乙醇溶解0.1g氯霉素，加入1000mL培養基中，分裝火菌后可用于食品中霉菌和酵母菌計數、分離。PY基礎培養基成分：蛋白胨0.5g，酵母提取物1.0g，胰酶解酪胨（Trypticase）0.5g,鹽溶液II4.0mL，蒸餾水1000mL。鹽溶液II成分：CaCL20.2g，MgSO4.7H2O0.48g，K2HPO41.0g

7、，KH2PO41.0g，NaHCO310.0g，NaCL2.0g，蒸餾水1000mL。制法：加熱溶解，分裝后121C滅菌20min。甘露醇瓊脂培養基（MSA）成分：牛肉浸膏1g，月示胨NO.3（Difco）10g，D-甘露醇10g，NaCL75g，瓊脂約13g，酚紅0.025g，水1000mL，pH7.27.6制法：按量將各成分（酚紅除外）混合，加熱使完全溶解，調pH至7.40.2。口1%的酚紅溶液2.5mL，混勻。121C高壓滅菌15min高氏一號（淀粉瓊脂）培養基（主用于放線菌、霉菌培養）可溶性淀粉20g，KNO31g，NaCL0.5g，K2HPO40.5g，MgSO4.7H2O0.5g,

8、FeSO4.7H2O0.01g，瓊脂20g，蒸餾水1000mL，pH7.27.4，121C滅菌20min。淀粉銨鹽培養基（主要用于霉菌、放線菌培養）可溶性淀粉10g，（NH4）2SO42gK2HPO4lgMgSO4.H2OlgNaCL1g,CaCO33g，蒸餾水1000mL，pH7.27.4，121C滅菌20min。若加入1520g瓊脂即成固體培養基。麥氏培養基（醋酸鈉瓊脂培養基）葡萄糖1.0g，KCL1.8g，酵母汁2.5g，醋酸鈉8.2g，瓊脂15g，蒸餾水1000mL，pH自然，0.7kg/cm2滅菌30min。高鹽察氏培養基（用于霉菌和酵母菌計數、分離用）硝酸鈉2g，磷酸二氫鉀1g,硫

9、酸鎂（MgSO47H2O）0.5g,氯化鉀0.5g,硫酸亞鐵O.OIg，氯化鈉60g，蔗糖30g，瓊脂20g,蒸餾水1000mL,115C滅菌30min。注：分離食品和飲料中的霉菌和酵母可選用馬鈴薯葡萄糖-瓊脂培養基和/或孟加拉紅培養基。分離糧食中的霉菌可用高鹽察氏培養基。17糖、醇類發酵基礎培養基（1）一般細菌常以休和利夫森二氏培養基蛋白胨5g,NaCL5g,K2HPO40.2g,糖醇（葡萄糖或其它糖、醇）10g,瓊脂56g,1%溴甲酚紫（溴百里香草酚藍）3mL,蒸餾水1000mL,pH7.07.2,分裝試管，培養基高度約4.5cm,115C滅菌20min。（2）芽孢菌培養基（NH4）2HP

10、O41.0g,KCL0.2g,MgSO4.7H2O0.2g，酵母膏0.2g，瓊脂56g，糖或醇類10.0g，蒸餾水1000mL,溴甲酚紫（0.04%）15mL,pH7.07.2，分裝試管，培養基高度約45cm,112C滅菌30min。（3）乳酸菌培養基蛋白胨5g，牛肉膏5g，酵母膏5g，吐溫80（Tween80）0.5mL，糖或醇10g,瓊脂56g,蒸餾水（自來水）1000mL，加入1.6%溴甲酚紫溶液約1.4mL。以上調pH6.87.0,分裝試管，112C滅菌30min。硝酸鹽培養基（硝酸鹽還原試驗用）蛋白胨5.0g,KNO30.2g,蒸餾水1000mL,pH7.4,每管分裝45mL,121

11、C滅菌1520min。吲哚實驗培養基：1%胰蛋白胨，調pH7.27.6，分裝1/31/4試管，115C滅菌30min。硫化氫試驗（紙條法）培養基蛋白胨10g,NaCL5g,牛肉膏10g,半胱氨酸0.5g,蒸餾水1000mL,pH7.07.4,分裝試管，每管液層高度45cm,112C滅菌2030min。另外將普通濾紙剪成0.51cm寬的紙條，長度根據試管與培養基高度而定。用5%10%的醋酸鉛將紙條浸透，然后用烘箱烘干，放于培養皿中滅菌備用。尿素培養基（尿酶試驗）成分：蛋白胨1.0g,葡萄糖1.0g,NaCL5.0g,KH2PO42.0g,0.4%酚紅3.0mL,瓊脂20.0g,20%尿素100.

12、0mL,pH7.17.4。制法：將除尿素和瓊脂以外的成分配好，并校正pH值，加入瓊脂，加熱熔化并分裝于三角瓶，121C滅菌15min,冷卻至5055C,加入過濾除菌的尿素溶液，分裝于滅菌試管內，擺成瓊脂斜面備用。氮源利用基礎培養基KH2PO41.36g,NaH2PO42.13g,MgSO47H2O0.2g,FeSO4.7H2O0.2g,CaCL20.5g,葡萄糖10.0g，蒸餾水1000mL。將需要測定的氨基酸、氨態氮（如磷酸氫二氨）、硝態氮（如硝酸鉀）加入到上述基礎培養基中，使其終濃度為0.050.1%,如測定菌不能利用葡萄糖為碳源，可用其它碳源代替（終濃度為0.20.5%）,另做一份不加氮

13、源的空白對照，調pH7.07.2,分裝于試管，每管45mL,112C滅菌2030min,制備出的培養基要求無沉淀。甲基紅培養基（M.R及V-P試驗用）蛋白胨7.0g,葡萄糖5.0g,K2HPO4（或NaCL）5g,水1000mL,pH7.07.2，每管分裝45mL,115C滅菌30min。動力、靛基質、尿素（MIU）綜合培養基（用于檢驗細菌運動性、吲哚、尿素酶用）蛋白胨（含色氨酸）30g,KH2PO42g、NaCL5g、瓊脂3g、0.2%酚紅酒精溶液2mL、尿素20g、蒸餾水1000mL。分裝于小試管，112C滅菌15min,滅菌后液體應呈淡黃色。半固體培養基（用于細菌的動力試驗）牛肉膏5.0

14、g，蛋白胨10.0g,瓊脂35g，蒸餾水1000mL,pH7.27.4,熔化后分裝試管（8mL）121C滅菌15min,取出直立試管待凝固。M17瓊脂培養基（分離、培養乳球菌等的選擇培養基）植物蛋白胨5g，酵母粉5g，聚蛋白胨5g，抗壞血酸0.5g，牛肉膏2.5g,MgSO47H2O0.01g,-甘油磷酸二鈉19g,蒸餾水1000mL,121C滅菌15min。蛋白胨水溶液（靛基質試驗用）蛋白胨20.0g,NaCL5.0g，蒸餾水1000mL,pH7.4,121C滅菌15min。精氨酸雙水解酶實驗培養基成分：蛋白胨1g，氯化鈉5g,K2HPO40.3g,L-精氨酸10g，瓊脂10g，酚紅0.01

15、g，蒸餾水1000mL。制法：除酚紅外，將以上各成分溶解，調節pH7.07.2，加入指示劑，分裝試管，培養基高約45cm,121C滅菌20min備用。葡萄糖氧化發酵培養基成分：蛋白胨2g,氯化鈉5g,1%溴百里酚藍水溶液3mL，瓊脂56g,K2HPO40.2g，葡萄糖1%,蒸餾水1000mL。制法：除溴百里酚藍外，溶解以上各成分，調節pH值為6.87.0,分裝試管，用115C滅菌20min備用。假單胞菌選擇培養基（PSA）基礎成分：多價胨16g，水解酪蛋白10g,硫酸鉀10g，氯化鎂1.4g,瓊脂11g,甘油10mL，蒸餾水1000mL,pH7.10.2。CFC選擇添加物：溴化十六烷基三甲胺1

16、0mg/L,梭鏈孢酸鈉10mg/L,頭孢菌素50mg/L。制法：先將基礎成分加熱煮沸使之完全溶解，121C,15min條件下滅菌。冷卻到50C備用。當基礎培養基冷卻到50C后加入溶解后過濾除菌的CFC補充物，完全混合后倒平板備用。乳糖膽鹽發酵培養基成分：蛋白胨20g,豬膽鹽（或牛、羊膽鹽）5g，乳糖10g,0.04%溴甲酚紫水溶液25mL,蒸餾水1000mL,pH7.4。制法：將蛋白胨、膽鹽及乳糖溶于水中，校正pH,加入指示劑，分裝每管10mL,并放入一個小倒管，115C,15min高壓滅菌.注：雙料乳糖膽鹽培養基除蒸餾水外，其他成分加倍。伊紅美蘭瓊脂培養基成分：蛋白胨20g，乳糖10g，磷酸

17、氫二鉀2g,瓊脂17g,2%伊紅丫溶液20mL,0.65%美蘭溶液10mL,蒸餾水1000mL,pH7.1。制法：將蛋白胨、磷酸氫二鉀和瓊脂溶解于蒸餾水中，校正pH,分裝于燒瓶內，高壓滅菌121C,15min備用。臨用時，加入乳糖，并加熱溶化瓊脂，冷至5055C,加入伊紅和美蘭溶液，搖勻，傾注平板。乳糖發酵培養基成分：蛋白胨20g，乳糖10g,0.04%溴甲酚紫水溶液25mL,蒸餾水1000mL,pH7.4。制法：將蛋白胨、乳糖溶于水中，校正pH,加入指示劑，按檢驗要求分裝30mL、10mL或3mL，并放入一個小倒管，115C,15min高壓滅菌。胰酪胨大豆肉湯成分：胰酪胨（或胰蛋白胨）17g

18、,植物蛋白胨（或大豆蛋白胨）3g,氯化鈉100g，磷酸氫二鉀2.5g，葡萄糖2.5g，蒸餾水1000mL。制法：將上述成分混合，加熱并輕輕攪拌溶液，分裝后121C15min高壓滅菌。最終pH7.30.2。7.5%氯化鈉肉湯成分：蛋白胨10g,牛肉膏3g,氯化鈉75g,蒸餾水1000mL,pH7.4。制法：將上述成分加熱溶解，校正pH,分裝試管，121C15min高壓滅菌。豆粉瓊脂成分：牛心消化湯1000mL，瓊脂20g,黃豆粉浸液50mL,pH7.47.6。制法：將瓊脂加在牛心消化湯中，加熱溶解，過濾。加入黃豆粉浸液，分裝每瓶100mL,121C15min高壓滅菌。血瓊脂平板成分：豆粉瓊脂10

19、0mL,脫纖維羊血（或兔血）510mL。制法：加熱融化瓊脂，冷至50C,以無菌操作加入脫纖維羊血或兔血，搖勻，傾注平板。或分裝滅菌試管，擺成斜面。aird-Parker氏瓊脂平板成分：胰蛋白胨10g，牛肉膏5g,酵母膏1g,丙酮酸鈉10g,甘氨酸12g,氯化鋰（LiCLH2O）5g,瓊脂20g,蒸餾水950mL,pH7.5。增菌劑的配法：3050%卵黃鹽水50mL與除菌過濾的1%亞碲酸鉀溶液10mL混合，保存在冰箱內。制法：將各成分加到蒸餾水中，加熱煮沸至完全溶解。冷至25C,矯正pH。分裝每瓶95mL,121C高壓滅菌15min。臨用時，加熱融化瓊脂，冷至50C,每95mL加入預熱至50C的

20、卵黃-亞碲酸鉀增菌劑5mL，搖勻后傾注平板。培養基應是致密不透明的。使用前在冰箱儲存不得超過48h。肉浸液成分：絞碎牛肉500g，氯化鈉5g，蛋白胨10g,磷酸氫二鉀2g,蒸餾水1000mL,pH7.47.6。制法：將絞碎之去筋膜無油脂牛肉500g,混合后放冰箱24h,除去液面之浮油，隔水煮沸半小時，使肉渣完全凝結成塊，用絨布過濾，并擠壓收集全部濾液，加水補足原量。加入蛋白胨、氯化鈉和磷酸鹽，溶解后矯正pH7.47.6煮沸并過濾，分裝燒瓶，121OC,30min高壓滅菌。兔血漿成分：檸檬酸鈉0.106mol/L.3gNa3C6H5O72H2O溶于1L蒸餾水中）制法：一份加兔血9份混合后離心20

21、00rpm,10min吸取上清液即為兔血漿。腸毒素產毒培養基成分：蛋白胨20g，胰消化酪蛋白200mg，氯化鈉5g，磷酸二氫鉀1g，氯化鈣0.1g，硫酸鎂0.2g,菸酸0.01g，蒸餾水1000mL,瓊脂1012g（固體透析培養用），pH7.27.4。葡萄糖肉浸液肉湯成分：絞碎牛肉500g，氯化鈉5g,蛋白胨10g，磷酸氫二鉀2g，葡萄糖10g，蒸餾水1000mL,pH7.47.6。制法：將絞碎之去筋膜無油脂牛肉500g,混合后放冰箱24h，除去液面之浮油，隔水煮沸半小時，使肉渣完全凝結成塊，用絨布過濾，并擠壓收集全部濾液，加水補足原量。加入蛋白胨、葡萄，氯化鈉和磷酸鹽，溶解后校正pH,煮沸并

22、過濾、分裝，121C30min高壓滅菌。牛心浸液成分：絞碎牛心500g,氯化鈉5g,蛋白胨10g,磷酸氫二鉀2g，蒸餾水1000mL,pH7.47.6。制法：將絞碎牛心500g,混合后放冰箱24h,除去液面之浮油，隔水煮沸半小時，使肉渣完全凝結成塊，用絨布過濾，并擠壓收集全部濾液，加水補足原量。加入蛋白胨、氯化鈉和磷酸鹽，溶解后校正pH,煮沸并過濾、分裝，121C,30min高壓滅菌。匹克氏肉湯成分：含1%胰蛋白胨的牛心浸液200mL,1：25000結晶紫鹽水溶液10mL,1：800三氮化鈉溶液10mL,脫纖維兔血（羊血）10mL。制法：將上述已滅菌的各種成分，無菌依次混合，分裝于無菌試管內，

23、每管2mL,保存冰箱內備用。胰蛋白胨大豆胨瓊脂（TSA）成分：胰蛋白胨15g,大豆胨5g，氯化鈉5g，瓊脂約13g，蒸餾水1000mL,pH7.17.5。制法：按量將各成分溶解，加熱使完全溶解，調dH值，121C,15min滅菌。緩沖蛋白胨水（BP）培養基成分：蛋白胨l0g,NaCL5g,Na2HPO4.12H209g,H2PO41.5g,蒸餾水1000mL,pH7.2o制法：121C滅菌15min,沙門氏菌前增菌使用。氯化鎂孔雀綠（MM）增菌液成分：甲液：胰蛋白胨5g,NaCL8g,KH2P041.6g，蒸餾水1000m1乙液：MgCL240g,蒸餾水100mL丙液：0.4%孔雀綠水溶液制法

24、：分別按上述成分配好后，121C滅菌15min備用。臨用時取甲液90mL、乙液9mL、丙液0.9mL以無菌操作混合即成。四硫磺酸鈉煌綠(TTB)增菌液成分：多胨或胨1g,CaCO310g,Na2S20330g,蒸餾水1000m1。制法：將各成分加入蒸餾水中，加熱溶解，分裝每瓶100m1。分裝時應隨時振蕩，使其中的CaCO3混勻。121C滅菌15min備用。臨用時每100m1培養基中加入碘溶液2m1、0.1%煌綠1m1。亞硒酸鹽胱氨酸(SC)增菌液成分：蛋白胨5g,乳糖4g,亞硒酸氫鈉4g,Na2HPO45.5g,KH2PO44.5g,L胱氨酸0.01g，蒸餾水1000m1,pH7.0。制法：將

25、除亞硒酸氫鈉和胱氨酸以外的各種成分溶解于900mL蒸餾水中，加熱煮沸，冷卻備用。另將亞硒酸氫鈉溶解于100mL蒸餾水中，加熱煮沸，冷卻，以無菌操作與上液混合。再加入1%L-胱氨酸一氫氧化鈉溶液1m1。分裝于滅菌瓶中，每瓶00mL。亞硫酸鉍瓊脂(BS)培養基成分：蛋白胨10g，牛肉膏5g，葡萄糖5g,FeSO40.3g,Na2HPO44g,煌綠0.025g，檸檬酸鉍銨2g,Na2SO46g,瓊脂20g,蒸餾水1000mL,pH7.5。制法：將前5種成分溶解于300mL蒸餾水中，再將檸檬酸鉍銨和亞硫酸鈉另用50m1蒸餾水溶解。將瓊脂于600mL蒸餾水中煮沸溶解，冷至80C左右。將以上三液合并，補充

26、蒸餾水至1000m1,校正pH，加0.5%煌綠水溶液5mL;搖勻。冷卻至5055C，傾注平板。注：此培養基不需高壓滅菌。制備過程中不宜過分加熱，以免降低其選擇性。應在臨用前一天制備，貯存于室溫暗處。超過48h不宜使用。DHL瓊脂培養基成份：蛋白胨20g，牛肉膏3g,乳糖10g,蔗糖10g,去氧膽酸鈉1g,Na2S2032.3g,檸檬酸鈉1g,檸檬酸鐵銨1g,中性紅0.03g，瓊脂20g，蒸餾水1000mL,pH7.3。制法：除中性紅和瓊脂外，將其他成分溶解于400m1蒸餾水中，校正pH值。再將瓊脂溶于600mL蒸餾水中，兩液合并，力口0.5%中性紅水溶液6mL,待冷至5055C,傾注平板。HE

27、瓊脂培養基成份：月示胨12g，牛肉膏3g，乳糖12g,蔗糖2g,水楊素2g,膽鹽20g,NaCL5g,瓊脂20g,蒸餾水1000m1,0.4%溴麝香草酚藍溶液16mL,Andrade指示劑20mL,甲液20mL,乙液20m1。制法：將前七種成分溶解于400mL蒸餾水中。作為基礎液，加入甲液和乙液，校正pH值為7.5,再加入指示劑；將瓊脂溶于600m1蒸餾水中。二者合并，待冷至5055C,傾注平板。注：此培養基不可高壓滅菌；Andrade指示劑：酸性復紅0.5g,1MNaOH溶液16m1,蒸餾水100mL。制法為：將復紅溶解于蒸餾水中，加入氫氧化鈉溶液。數小時后如果復紅退色不全，再加氫氧化鈉溶液

28、12mLo甲液：Na2S20334g,檸檬酸鐵銨4g,蒸餾水100m1。乙液：去氧膽酸鈉10g，蒸餾水100mL。S.S.瓊脂基礎培養基成分：牛肉膏5g,月示胨5g，三號膽鹽3.5g，瓊脂17g,蒸餾水1000mL。制法：將牛肉膏、月示胨和膽鹽溶解于400mL蒸餾水中，將瓊脂溶于500m1蒸餾水中，二液混合，121C滅菌15min備用。完全培養成分：基礎培養基1000mL,乳糖10g，檸檬酸鈉8.5g,Na2S2038.5g,10%檸檬酸鐵溶液10m1,1%中性紅溶液2.5m1,0.1%煌綠溶液0.33m1。制法：加熱熔化基礎培養基，按比例加入上述染料以外的各成分，充分混合均勻，校正)H值為7

29、.0,加入中性紅和煌綠溶液，傾注平板。注：制好的培養基宜當日使用，或保存于冰箱內于48h內使用；煌綠溶液配好后應在10d以內使用。靛基質試驗培養基成分：蛋白胨10g，氯化鈉5g，水1000mL,pH7.37.5。制法：稱取各成分，加入水中加熱溶化。用1mol/LNaOH調至pH7.47.5。分裝小試管，每管約3mL,116C,15min高壓滅菌后410C保存備用。三糖鐵瓊脂(TSI)成分：蛋白胨20g，硫代硫酸鈉0.2g,乳糖10g，蒸餾水1000mL,硫酸亞鐵銨0.2g,蔗糖10g,酚紅0.025g,氯化鈉5g，牛肉膏5g,瓊脂12g，葡萄糖1g,pH7.4。制法：將除瓊脂和酚紅以外的各種成

30、分溶解于蒸餾水中，校正dH。加入瓊脂，加熱煮沸以溶化瓊脂。加入0.2%酚紅水溶液12.5mL，搖勻。分裝試管，裝量宜多些，以便得到較高的底層。121C咼壓火菌15min后放置咼層斜面備用。尿素瓊脂成分：蛋白胨1g，葡萄糖1g,0.4%酚紅溶液3mL，蒸餾水1000mL，氯化鈉5g,磷酸氫二鉀2g,瓊脂20g,20%尿素溶液100mL,pH7.20.1制法：將除尿素和瓊脂以外的成分配好，并校正pH,加入瓊脂，加熱溶化并分裝燒瓶。121C高壓滅菌15min,冷至5055C,加入經除菌過濾的尿素溶液。尿素的最終濃度為2%。最終pH為7.20.1。分裝于滅菌試管內，放成斜面備用。ONPG培養基成分：鄰

31、硝基酚BD-半乳糖昔(ONitropHenylBDgalactopyranoside)(ONPG)60mg,0.01mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5)10mL,1%蛋白胨水(pH7.5)30mL制法：將ONPG溶于緩沖液內，加入蛋白胨水，以過濾法除菌，分裝于10mmx75mm試管，每管0.5mL,用橡皮塞塞緊。氨基酸脫羧酶試驗培養基(賴氨酸培養基)成分：蛋白胨5g,酵母浸膏3g,葡萄糖1g,蒸餾水1000mL,1.6%滇甲酚紫一乙醇溶液1mL,L一氨基酸或DL一氨基酸0.5或1g/100mL,pH6.8。制法：除氨基酸以外的成分加熱溶解后，分裝每瓶100mL，分別加入賴氨酸、精氨酸和鳥氨酸等

32、各種氨基酸。L氨基酸按0.5%加入，DL氨基酸按1%加入。再行校正pH至6.8。對照培養基不加氨基酸。分裝于滅菌的小試管內，每管0.5mL,上面滴加一層液體石蠟，115C高壓滅菌10min。氰化鉀(KCN)培養基成分：蛋白胨10g,氯化鈉5g,磷酸二氫鉀0.225g,磷酸氫二鈉5.64g，蒸餾水1000mL,0.5%氰化鉀溶液20mL,pH7.6。制法：將除氰化鉀以外的成分配好后分裝燒瓶，121C高壓滅菌15min。放在冰箱內使其充分冷卻。每100mL培養基加入0.5%氰化鉀溶液2.0mL(最后濃度為1：10000),分裝于12mmx100mm滅菌試管，每管約4mL,立刻用滅菌橡皮塞塞緊，放在

33、4C冰箱內，至少可保存兩個月。同時，將不加氰化鉀的培養基作為對照培養基，分裝試管備用。丙二酸鈉培養基成分：酵母浸膏1g,硫酸銨2g，磷酸氫二鉀0.6g，磷酸二氫鉀0.4g，氯化鈉2g,丙二酸鈉3g,0.2%溴麝香草酚藍溶液12mL,蒸餾水1000mL,pH6.8。制法：先將酵母浸膏和鹽類溶解于水，校正pH后再加入指示劑，分裝試管，121C高壓滅菌15min。氧化酶試驗試劑1%鹽酸二甲基對苯二胺溶液：少量新鮮配制，干冰箱內避光保存。1%四甲基對苯二胺溶液：將四甲基對苯二胺1.0g溶于100.0mL蒸餾水即可。通常使用新鮮配制的試劑，如放置于冷藏庫，可在配制后7天內使用。1%a-萘酚乙醇溶液。亞硒

34、酸鹽煌綠增菌液成分：蛋白胨5g，酵母膏5g,甘露醇5g，牛磺膽酸鈉1g,20%亞硒酸氫鈉溶液20m1,0.25mol/L磷酸鹽緩沖液(pH7.0)100mL,2%煌綠水溶液0.25mL,蒸餾水900m1。制法：將前三種成分溶于水中，調節pH值為7.0,加入牛磺膽酸鈉，加熱溶解調pH值(其中干雞蛋白樣品pH8.2土0.1;其它干蛋品pH7.2土0.1,冰蛋品pH7.0土0.1)(具體數值如下)121C滅菌15min,放冷備用，此為甲液；稱取4g亞硒酸氫鈉，溶于19mL蒸餾水中，即為20%亞硒酸氫鈉溶液20mL,12lC滅菌15min,放冷備用，此為乙液；精確稱取2HPO4(無水)2.18g,KH

35、2PO4(無水)1.71g，溶解于蒸餾水中，定容至100mL。12lC滅菌15min,放冷備甩此為丙液；稱取煌綠(燦爛綠)0.2g溶于10mL蒸餾水中，即為2%煌綠水溶液，此為丁液。用前將乙液和丙液依次加入甲液中，復查混合液的pH值，加入煌綠溶液。無菌操作分裝于無菌燒瓶或試管內，每瓶150m1。培養基應在15d內使用。GN增菌液成分：胰蛋白胨20g,葡萄糖1g，甘露醇2g，檸檬酸鈉5g,去氧膽酸鈉0.5g,磷酸氫二鉀4g,磷酸二氫鉀1.5g，氯化鈉5g,蒸餾水1000mL,pH7.0。制法：按上述成分配好，加熱使溶解，校正pH。分裝每瓶225mL,115C高壓滅菌15min。苯丙氨酸培養基成分

36、：酵母浸膏3g,DI苯丙氨酸(或L苯丙氨酸1g)2g,磷酸氫二鈉1g，氯化鈉5g,瓊脂12g,蒸餾水1000mL,制法：加熱溶解后分裝試管，121C高壓滅菌15min,使成斜面。西蒙氏檸檬酸鹽培養基成分：氯化鈉5g,硫酸鎂(MgSO47H2O)0.2g，磷酸二氫銨1g，磷酸氫二鉀1g,檸檬酸鈉5g,瓊脂20g,蒸餾水1000mL,0.2%溴麝香草酚藍溶液40mL,pH6.8。制法：先將鹽類溶解于水內，校正pH,再加瓊脂加熱溶化。然后加入指示劑，混合均勻后分裝試管，121C高壓滅菌15min后放成斜面。葡萄糖銨培養基成分：氯化鈉5g,硫酸鎂(MgSO47H2O)0.2g，磷酸二氫銨1g，磷酸氫二

37、鉀1g,葡萄糖2g,瓊脂20g，蒸餾水1000mL,0.2%溴麝香草酚藍溶液40mL,pH6.8。制法：先將鹽類和糖溶解于水內，校正pH,再加瓊脂加熱溶化，然后加入指示劑，混合均勻后分裝試管，121C高壓滅菌15min后放成斜面。麥康凱瓊脂成份：蛋白胨17g,月示胨3g，豬件、羊)膽鹽5g,NaCL5g”瓊脂17g,蒸餾水1000m1,乳糖10g，0.01%結晶紫水溶液10m1,0.5%中性紅水溶液5m1。制法：將蛋白胨、月示胨、膽鹽和氯化鈉溶于400mL蒸餾水內，校正pH值至7.2。將瓊脂于600mL蒸餾水中煮沸溶解。合并兩液，分裝于燒瓶內，121C滅菌15min備用。臨用時加熱溶化上述瓊脂

38、，趁熱加入乳糖。冷至5055C時加入結晶紫和中性紅水溶液，搖勻后傾注平板。注：結晶紫和中性紅水溶液配好后須經高壓滅菌。腸道菌增菌肉湯(EE肉湯)成分：蛋白胨10g,葡萄糖5g，牛膽鹽20g,磷酸氫二鈉8g,磷酸二氫鉀2g,煌綠0.015g，蒸餾水1000mL,pH7.2。制法：按上述成分配好，加熱使溶解，校正pH。分裝每瓶30mL,115C高壓滅菌15min。注意必須使用純凈的牛膽鹽和煌綠，減少對受損且數量極少的腸桿菌的生長抑制。克氏雙糖鐵瓊脂(KI)上層培養基成分：血消化湯(pH7.6)500mL,瓊脂6.5g，硫代硫酸鈉0.1g,硫酸亞鐵銨0.1g,乳糖5g,0.2%酚紅溶液5mL。下層培

39、養基成分：血消化湯(pH7.6)500mL,瓊脂2g,葡萄糖1g,0.2%酚紅溶液5mL。制法：取血消化湯按上層和下層的瓊脂用量，分別加入瓊脂，加熱溶解。分別加入其他各種成分。將上層培養基分裝于燒瓶內；將下層培養基分裝于滅菌的12mmx100mm試管內，每管約2mL。115C高壓滅菌10min。將上層培養基放在56C水浴箱內保溫；將下層培養基直立放在室溫內，使其凝固。等下層培養基凝固后，以無菌操作將上層培養基分裝于下層培養基的上面，每管約1.5mL并放成斜面。Elek氏培養基(毒素測定用)成分：胨20g，麥芽糖3g,乳糖0.7g，氯化鈉5g，瓊脂15g,40%氫氧化鈉溶液1.5mL，蒸餾水10

40、00mL,pH7.8。制法：用500mL蒸餾水溶解瓊脂以外的成分，煮沸并用濾紙過濾。用1mo1/L氫氧化鈉校正pH。用另外500mL蒸餾水加熱溶解瓊脂。將兩液混合，分裝試管10mL或20mL。121C高壓滅菌15min。臨用時加熱溶化瓊脂傾注平板。EC增菌液(36)成分：胰蛋白胨20g，膽鹽1.5g，乳糖5g,NaCL5g,無水KH2PO41.5g,無水K2HPO44g,蒸餾水1000mL,pH7.0。制法：將各成分溶于水中，調pH值，依據實驗需求分裝三角瓶或試管。121C滅菌15min備用。之后，如果通過滅菌細菌濾器添加1%。的20mg/L新生霉素，即為改良EC增菌液。改良山梨醇麥康凱瓊脂(

41、TC-SMAC)成分：蛋白胨7g,眎胨3g，豬膽鹽5g,山梨醇10g,NaCL5g，瓊脂18g,0.5%中性紅水溶液5mL,0.01%結晶紫水溶液10mL,亞碲酸鉀2.5mg,頭孢肟0.05g，蒸餾水1000mL,pH7.2。制法：除山梨醇、指示劑和抑菌劑外，其余成分溶于水中，溶解后調pH值。115C滅菌20min。臨用時溶化培養基，冷至50C,加入山梨醇、滅菌的結晶紫和中性紅；加入過濾除菌的1%亞碲酸鉀250L和50g/L頭孢肟1mL,混勻，傾注倒平板。LST肉湯成分：胰蛋白胨或胰酪胨(Tryticase)20g,NaCL5.0g，乳糖5.0g,K2HPO42.75g,KH2PO42.75g

42、,月桂基硫酸鈉0.1g，蒸餾水1000mL。制法：將各成分溶解于蒸餾水中。分裝到有倒立發酵管的20mmx150mm試管中，每管10mL。121C高壓滅菌15min。最終pH6.80.2。MUG-LSTLST肉湯中添加4-甲基傘形酮-B-D-葡萄糖醛酸苷（MUG），使終濃度為0.1g/L。甘露醇卵黃多粘菌素瓊脂成分：蛋白胨10g，牛肉膏1g,甘露醇10g,氯化鈉10g,瓊脂15g,蒸餾水1000mL,0.2%酚紅溶液13mL,50%卵黃液50mL，多粘菌素B100國際單位/mL,pH7.4o制法：將前面五種成分加入于蒸餾水中，加熱溶解，校正pH,加入酚紅溶液。分裝燒瓶，每瓶100mL,121C高

43、壓滅菌15min。臨用時加熱溶化瓊脂，冷至50C,每瓶加入50%卵黃液5mL及多粘菌素B10000國際單位，混勻后傾注平板。酪蛋白瓊脂成分：酪蛋白10g，牛肉膏3g，磷酸氫二鈉2g,氯化鈉5g，瓊脂15g,蒸餾水1000mL,0.4%溴麝香草酚藍溶液12.5mL,pH7.4o制法：將除指示劑外的各成分混合，加熱溶解（但酪蛋白不溶解），校正pH。加入指示劑，分裝燒瓶，121C高壓滅菌15min。臨用時加熱溶化瓊脂，冷至50C,傾注平板。注：將菌株劃線接種于平板上，如沿菌落周圍有透明圈形成，即為能水解酪蛋白。木糖明膠培養基成分：胰胨10g,酵母膏10g,木糖10g，磷酸氫二鈉5g,明膠120g，蒸

44、餾水1000mL,0.2%酚紅溶液25mL,pH7.6o制法：將除酚紅以外的各成分混合，加熱溶解，校正pH。加入酚紅溶液，分裝試管，121C高壓滅菌15min,迅速冷卻。動力-硝酸鹽培養基（A法）成分：蛋白胨5g，牛肉膏3g，硝酸鉀1g，瓊脂3g，蒸餾水1000mL,pH7.0。制法：加熱溶解，校正pHo分裝試管，每管10mL,121C高壓滅菌15min。甲萘胺-醋酸溶液、對氨基苯磺-醋酸溶液（硝酸鹽培養基）成分：硝酸鹽0.2g,蛋白胨5g,蒸餾水1000mL,pH7.4。制法：溶解，校正pH，分裝試管，每管約5mL,121C高壓滅菌15min。硝酸鹽還原試劑：甲萘胺一醋酸溶液：將甲萘胺0.5

45、g溶解于5mol/L乙酸溶液100mL中。（2）對氨基苯磺醋酸溶液：將對氨基苯磺酸0.8g溶解于5mol/L乙酸溶液100mL中。氯化鈉結晶紫增菌液成分：蛋白胨20g，氯化鈉40g,0.01%結晶紫溶液5mL,蒸餾水1000mL,pH9.0。制法：除結晶紫外其他按上述成分配好，加熱溶解，約加3%氫氧化鉀溶液4.5mL,校正pH,加熱煮沸，過濾，再加入結晶紫溶液，混合分裝試管，121C高壓滅菌15min備用。3.5%氯化鈉三糖鐵瓊脂成分：蛋白胨20g，牛肉膏5g，乳糖10g,蔗糖10g，葡萄糖1g,氯化鈉35g,硫酸亞鐵銨0.2g，硫代硫酸鈉0.2g，瓊脂12g,酚紅0.025g，蒸餾水1000

46、mL,pH7.4。制法：將除瓊脂和酚紅以外的各成分溶解于蒸餾水中，校正dH,加入瓊脂，加熱煮沸使瓊脂溶化，加入0.2%酚紅溶液12.5mL，搖勻，分裝試管，121弋高壓滅菌15min,放置高層斜面備用。TCBS瓊脂(配方1)成分：酵母膏5g,蛋白胨10g，蔗糖20g,硫代硫酸鈉10g,檸檬酸鈉10g,牛膽酸鈉3g,牛膽汁粉5g,氯化鈉10g,檸檬酸鐵1g,溴麝香草酚藍(2%溶液)20mL,草酚藍(1%溶液)4mL，瓊脂15g,pH8.6。制法：將上述成分加蒸餾水至1000mL，混合，使全部溶解，校正pH為8.6,加熱煮沸，不需高壓滅菌，傾注平皿1520mL。注：不分解蔗糖的副溶血性弧菌，在此培

47、養基上生長呈綠色菌落，分解蔗糖的細菌呈黃色菌落。TCBS瓊脂(配方2)成分：酵母浸膏5g，蛋白胨10g,硫代硫酸鈉10g,枸櫞酸鈉10g,牛膽粉8g,蔗糖20g，氯化鈉10g，檸檬酸鐵1g,溴麝香草酚蘭0.04g,麝香草酚藍0.04,瓊脂約13g，水1000mL,pH8.58.7o制法：除指示劑外，將剩余成分混合于1000mL水中，煮沸溶解。調至pH8.58.7,加入指示劑，混勻。再次煮沸12min。無需高壓滅菌。改良CampBAP培養基成分：胰蛋白胨10g,蛋白胨10g,葡萄糖1g,酵母浸膏2g,氯化鈉5g,焦亞硫酸鈉0.1g，瓊脂15g，蒸餾水1000mL,硫乙醇酸鈉1.5g,萬古霉素10

48、mg,多粘菌素B2500國際單位，兩性霉素B(AmpHotericinB)2mg,頭孢霉素(CepHalosporin)15mg,亦可用Ceporan)脫纖維羊血50mL,pH7.0土0.2。制法：除抗生素和羊血外，將其他成分混合，加熱溶解，校正dH到7.0土0.2。裝瓶，每瓶100mLo121X高壓滅菌15min備用。此為布氏瓊脂基礎培養基；臨用前，加熱溶解基礎瓊脂，冷至60C。每100mL基礎瓊脂中，加入脫纖維羊血5mL、抗生素混合液0.5mL及兩性霉素B,頭孢霉素混合液0.5mL,搖勻，傾注平板。注：兩性霉素B,頭孢霉素混合液配法：稱兩性霉素B2mg和頭孢霉素15mg,加5mL蒸餾水混合

49、即成。甘氨酸培養基成分：布氏肉湯1000mL，瓊脂粉1.6g,甘氨酸(glycine)10g。制法：將以上成分混合，加熱溶解，校正pH7.0,分裝試管，每管4mL,121X高壓滅菌15min,備用。Skirrow氏培養基成分：蛋白胨15g,胰蛋白胨(typtone)2.5g,酵母浸膏5g,氯化鈉5g，瓊脂15g,蒸餾水l000mL,甲氧芐氨嘧啶(trimethoprin,TMP)5mg,萬古霉素(vancomycin)10mg,多粘菌素B(po1ymyxin)2500國際單位，凍溶馬血70.0mL,pH7.4。制法：除甲氧芐氨嘧啶、抗生素和凍溶馬血外，其他成分混合溶解。校正dH7.4,裝瓶10

50、0mL。121C咼壓火菌15min,備用。此即血瓊脂基礎培養基。臨用前，加熱溶解基礎培養基，冷至60Xo每100mL基礎培養基中，加入凍溶二次的馬血及TMP、抗生素混合液0.5mL,搖勻，傾注平板。庖肉培養基成分：牛肉浸液1000mL,蛋白胨30g，酵母浸膏5g，磷酸二氫鈉5g，葡萄糖3g,可溶性淀粉2g,碎肉渣適量，pH7.8。制法：稱取新鮮除脂肪和筋膜的牛肉500g,加蒸餾水1000mL和1mol/L氫氧化鈉溶液25mL,攪拌煮沸15min,充分冷卻，除去表層脂肪，澄清，過濾，加水補足至1000mL。加入除碎肉渣外的各種成分，校正pH。卵黃瓊脂培養基成分：基礎培養基為肉浸液1000mL，蛋

51、白胨15g，氯化鈉5g，瓊脂2530g,pH7.5。50%葡萄糖水溶液。50%卵黃鹽水溶液。制法：基礎培養基分裝每瓶100mLo121X高壓滅菌15min。臨用時加熱溶化，冷至50C,每瓶內加50%葡萄糖水溶液2mL和50%卵黃鹽水懸液1015mL,搖勻，傾注平板。EB增菌液.成分：胰胨17g，多價胨3g，酵母膏6g，氯化鈉5g,磷酸二氫鉀2.5g,葡萄糖2.5g,蒸餾水1000mL,pH7.27.4o制法：121X高壓滅菌15min,使用前加吖啶黃溶液15mg/L、萘啶酮酸溶液40mg/L和放線菌酮50mg/L,此三種成分要過濾除菌或無菌配制。胰酪胨大豆瓊脂(TSAYE)成分：胰胨17g，多價胨3g，酵母膏6g，氯化鈉5g，磷酸氫二鉀2.5g，葡萄糖2.5g，瓊脂15g,蒸餾水l000mL,pH7.27.4o制法：加熱溶解，調pH值，分裝，121X高壓滅菌15min備用。硫酸鐵銨半固體(SIM)成分：胰胨20g，多價胨6g，硫酸鐵銨0.2g,硫代硫酸鈉0.2g,瓊脂3.5g，蒸餾水1