1、消化系統腫瘤標志物 雷 旦 生2013 年 6 月 7 日 消化系統常見腫瘤良性腫瘤僅占約2%，主要為惡性腫瘤；癌占絕大部分，肉瘤較為少見；癌在食管、胃、肝膽和大腸較為多見，小腸極少發生癌。消化系統腫瘤的診斷消化系統腫瘤是嚴重威脅人類健康的一類惡性疾病，其防治有賴于早期發現及選擇合適的治療方案。消化系統腫瘤診斷金標準是病理學檢查，但這需要進行有創性的檢查手段，造成患者的痛苦，而影像學檢查、血清學檢查雖然是無創性檢查，但特異性不高，故只能作為輔助的檢查手段。尋找特異性腫瘤標志物對于早期發現及選擇合適的治療方案均有重要作用。隨著分子生物學的發展，發現一些腫瘤標志物的特異性很高，使得消化道腫瘤的診斷

2、有了一些進展。消化系統腫瘤相關標志物食道癌相關標記物：鱗狀細胞癌相關抗原（SCC）、癌胚抗原（CEA）、組織多肽抗原（TPA）、谷胱甘肽轉移酶（GSTS）、細胞角化素蛋白片段19(CYFRA21-1)、p53 基因和p53蛋白、EGFR、c-myc、hst-1。目前，尚未發現具有一定準確性的食道癌相關標記物。食道癌消化系統腫瘤相關標志物胃癌相關腫瘤標志物：胚胎抗原（CEA）、CA19-9、CA50、CA72-4、透明質酸(HA)、唾液酸、胃蛋白酶原（PGI和PGII）、P53基因、P16基因、nm23基因、c-myc基因、表皮生長因子受體（EGFR）、HER-2neu、轉化生長因子（TGF）、

3、金屬蛋白酶（MMPs）及其抑制劑（TIMP）胃癌的腫瘤標志物中缺乏敏感性高、特異性強的指標。胃癌消化系統腫瘤相關標志物胰腺癌相關的腫瘤標志物：癌胚抗原(CEA)、糖抗原(CA19-9、CA242、CA125、CA50)、胰腺腫瘤胎兒抗原(POA)、胰腺癌相關抗原(PCAA、Span-1)、胰腺特異抗原(PaA)及K-ras基因等，臨床常用的指標為CA19-9、CA242、CEA及K-ras。各種標志物對胰腺癌雖有一定的陽性率，但均不具備高特異性。 胰腺癌消化系統腫瘤相關標志物大腸癌相關的腫瘤標志物：癌胚抗原(CEA)、糖抗原(CA19-9、CA242、CA72-4、CA50)、結腸癌特異性抗原

4、(CCSA)、生存素(Survivin)、凝集素(Clusterin)、細胞型FLICE抑制蛋白(cFLIP)、唾液酸化的路易斯寡糖X抗原(SLex)、血管內皮生長因子(VEGF)、腫瘤特異性生長因子(TSGF)、大腸癌缺失基因(DCC)、P27基因等。目前臨床常用的大腸癌相關腫瘤標志物均不具備高特異性。 大腸癌消化系統腫瘤相關標志物甲胎蛋白(AFP)是最重要的肝癌標志物，正常的成年人的血清中只能檢測到微量的甲胎蛋白。當發生肝癌時甲胎蛋白就會大幅升高，因而檢查血中的甲胎蛋白就能診斷肝癌。其他的肝癌標志物尚有： a-巖藻糖苷酶、鐵蛋白、G-谷氨酰轉肽酶同工酶II、異常凝血酶原等，但這些肝癌標志物

5、的臨床意義不如甲胎蛋白那樣重要。 肝癌常用消化系統腫瘤標志物CEA與甲胎蛋白一樣，屬于胚胎抗原，1965年由Gold和Freedmen首先從結腸腺癌和胚胎期結腸黏膜組織中分離而得，故稱癌胚抗原。在臨床中常作為空腔臟器如大腸癌及其他消化道腫瘤的輔助診斷指標，其增高見于肝、結-直腸、胃、胰、膽囊、膽管癌腫及非消化道(肺、卵巢)癌。在臨床上，當CEA60ug/L時，可見于結腸癌、胰腺癌、直腸癌、胃癌等。癌胚抗原(CEA)常用消化系統腫瘤標志物糖類抗原存在于細胞表面，細胞表面糖蛋白或糖脂在細胞的信息傳遞、生化和分化中起著重要作用。細胞惡變時，由于糖基轉化酶的失活或某些胚胎時期活躍、成熟期趨于靜止的轉化

6、酶被激活，從而引起細胞表面糖類結構發生變化，抗原性質改變，此類抗原從不同組織的原發或轉移癌中分離出來，通過血清可測出。常見的消化系統腫瘤相關糖類抗原有：CA19-9、CA72-4、CA242、CA50等。糖類抗原（CA）常用消化系統腫瘤標志物CA19-9是胰腺癌，胃癌，結、直腸癌、膽囊癌的相關標志物，大量研究證明CA19-9濃度與這些腫瘤大小有關。在胰腺癌患者中的陽性檢出率較高，逐步在臨床認為是對胰腺癌的敏感性和特異性優于除CA242以外的其他血清標志物的一個重要指標。胃癌、結直腸癌、膽囊癌、膽管癌、肝癌的CA19-9陽性率也會很高，故不能單獨作為診斷胰腺癌的指標。若同時檢測CEA或AFP等相

7、關腫瘤標志物可進一步提高這些腫瘤的陽性檢出率。胃腸道和肝的多種良性和炎癥病變，如胰腺炎、輕微的膽汁郁積和黃疸，CA19-9濃度也可增高，但往往呈“一過性”，而且其濃度多低于120U/ml，必須加以鑒別。糖類抗原19-9(CA19-9)常用消化系統腫瘤標志物CA72-4是目前診斷胃癌的最佳腫瘤標志物之一，對胃癌具有較高的特異性，其敏感性可達2880%，若與CEA、 CA19-9聯合檢測可以監測70以上的胃癌。CA72-4水平與胃癌的分期有明顯的相關性，一般在胃癌的-期增高；對伴有轉移的胃癌病人，CA72-4的陽性率更遠遠高于非轉移者。CA72-4水平在術后可迅速下降至正常。在70%的復發病例中，

8、CA72-4濃度首先升高。與其它標志物相比，CA72-4最主要的優勢是其對良性病變的鑒別診斷有極高的特異性，在眾多的良性胃病患者中，其檢出率僅0.7。CA72-4對其他胃腸道癌、乳腺癌、肺癌、卵巢癌也有不同程度的檢出率。糖類抗原72-4(CA72-4)常用消化系統腫瘤標志物CA242是消化系統的腫瘤標志物，對胰腺癌、結直腸癌有較高的敏感性與特異性，對肺癌、乳腺癌也有一定的陽性檢出率。對胰腺癌的診斷意義上優于CA19-9，敏感性可達66100，可用于胰腺癌和良性肝膽疾病的鑒別診斷及預后，也用于結直腸癌病人術前預后及復發鑒別。CEA與CA242無相關性，具有獨立的診斷價值，且二者之間具有互補性；C

9、EA與CA242聯合檢測可提高胰腺癌、結直腸癌檢出的敏感性。 還有助于肝癌、胃癌和食管癌的診斷。糖類抗原242(CA242)常用消化系統腫瘤標志物CA50是胰腺和結、直腸癌的腫瘤標志物，因其廣泛存在胰腺、膽囊、肝、胃、結直腸、膀胱、子宮，它的腫瘤識別譜比CA19-9廣，因此它又是一種廣譜腫瘤標志相關抗原。CA50對胰腺癌和膽囊癌的陽性檢出率較高，可用于胰腺癌、膽囊癌等腫瘤的早期診斷，對肝癌、胃癌、結直腸癌及卵巢腫瘤診斷亦有較高價值。值得指出的是CA50在80的AFP陰性的肝細胞癌中呈陽性結果，作為手術治療徹底與否的指標也有較大的臨床意義。另外，CA50對惡性胸水有很高的陽性檢出率，而良性胸水尚

10、無陽性報道，故CA50的檢測對鑒別良、惡性胸水亦有較大的應用價值。另有報導萎縮性胃炎患者胃液CA50的濃度與正常人比較有顯著改變。通常認為萎縮性胃炎是癌前高危期，因此CA50可作為癌前診斷指標之一。在胰腺炎、結腸炎和肺炎發病時，CA50也會升高，但隨炎癥消除而下降。糖類抗原50(CA50)常用消化系統腫瘤標志物AFP是早期診斷原發性肝癌最敏感、最特異的指標，適用于大規模普查，如果成人血AFP值升高，則表示有患肝癌或慢性肝炎的可能。 AFP含量顯著升高一般提示原發性肝細胞癌，越是晚期，AFP含量越高，但陰性并不能排除原發性肝癌。在轉移性肝癌中，AFP值一般低于350-400ng/ml。胃癌、胰腺

11、癌等疾病時，AFP值也會偏高。甲胎蛋白(AFP)常用消化系統腫瘤標志物胃蛋白酶原I、II（PGI、PGII）是由胃主細胞合成和分泌并轉化成有分解蛋白能力的胃蛋白酶。幽門螺桿菌(HP)感染和萎縮性胃炎是與胃癌密切相關的兩種病變，胃蛋白酶原(PG)的變化已成為前面三種病變的良好診斷指標,以及治療和預防干預過程中的監測指標。測定PG，特別是PGIPGII比值和PGI水平，對于診斷慢性萎縮性胃炎和腸化生有很高的價值，血清PG的變化可被認為是胃癌高危的亞臨床指標。PGI/PGII值降低是胃癌和胃腺瘤的高危信號，血清PG的測定是普查中篩選胃癌和胃腺瘤的良好指標。胃蛋白酶原I、II（PGI、PGII）常用消

12、化系統腫瘤標志物胰胚胎抗原（POA）：POA是胰腺癌的又一新型、敏感、特異的新標志物，胰腺癌的POA的陽性率 95%，其血清含量一般會20 U/ml；當肝癌、大腸癌、胃癌等惡性腫瘤時也會使POA升高，但陽性率較低。角蛋白18-3A9（CK18）：CK18-3A9片段是一種分化特異的蛋白質，廣泛存在于上皮細胞，濃度與腫瘤病程進展、轉移密切相關，臨床上主要用于胃癌的輔助診斷。研究表明腸癌、肺癌也可使血清中CK18-3A9片段濃度升高。其他常用消化系統腫瘤標志物的臨床應用AFP為肝癌的特異性診斷指標，200ng/ml為可疑，500ng/ml可確診，可用于肝癌普查、療效觀察及預后的判斷。97健康成人血

13、清CEA濃度在2.5ug/L以下；在所有胃腸道惡性腫瘤患者血清中CEA均可增高；CEA20ug/L時高度提示結腸癌。CA19-9，37000U/ml的臨界值可準確區分胰腺癌和胰腺良性疾病，靈敏度和特異度分別為77和87。在早期胰腺癌患者血清中，CA19-9的陽性率并不高，對于直徑3 cm的胰腺腫瘤CA19-9的診斷靈敏度顯著降低(55)，因此尚不能用于早期診斷。高危人群的篩查及診斷常用消化系統腫瘤標志物的臨床應用大多數TM與腫瘤分期有關，且濃度與腫瘤大小或分期之問通常存在著關聯。CEA與進展期低分化腺癌相關，亦與腫瘤大小、漿膜面浸潤相關；在判斷癌患者臨床分期方面，CA19-9是比CEA更為敏感

14、的指標，CA19-9與腫瘤大小及浸潤深度相關；CA72-4水平與腫瘤大小，分期、漿膜受累有關。AFP水平在一定程度上反應腫瘤的大小，其動態變化與病情有一定的關系，也是顯示治療效果和預后判斷的一項敏感指標。 腫瘤分期、部位、大小、浸潤深度常用消化系統腫瘤標志物的臨床應用檢測血清CA19-9等的含量，可以預測胃癌的肝、腹膜及淋巴結的轉移；高水平的CA19-9是提示淋巴結轉移的獨立因子。胃癌患者AFP的高表達提示有肝轉移的可能；CEA能介導腫瘤細胞與肝實質接觸而提示肝轉移。CA72-4水平與腫瘤大小有關，可用于檢測術后是否有腫瘤細胞殘存，且與淋巴結受累有關。CA72-4在胃癌的監測中敏感性高于CA1

15、9-9，與CEA相當，在有淋巴結轉移的情況下CA72-4明顯升高，胃癌患者術前血漿CA72-4表達水平與胃癌的分期有相關性。CA72-4、CA19-9水平與腫瘤大小、淋巴結轉移及浸潤深度有關，可用于檢測術后是否有腫瘤細胞殘存。當CA19-9小于1000U/ml時，有一定的手術意義，腫瘤切除后CA19-9濃度會下降，如再上升，則可表示復發。對胰腺癌轉移的診斷也有較高的陽性率，當血清CA19-9水平高于10000Uml時，幾乎均存在外周轉移復發與轉移的監測常用消化系統腫瘤標志物的臨床應用用單獨檢測某一腫瘤標志的方法診斷腫瘤存在陽性率不高、特異性不強等問題。多采用兩種或幾種腫瘤標志物聯合檢測，有利于

16、提高腫瘤的早期診斷率，增進療效、判斷預后和檢出復發。將M2-PK與CEA、CA19-9、CA72-4對胃癌、胰腺癌及結直腸癌患者進行聯合檢測，敏感性和特異性會得到很好的提升。應用CEA，CA72-4二者聯合，檢測結直腸癌是比較合理的選擇。CEA，CA72-4應用于結直腸癌患者檢測，可以早期診斷，提高診斷的檢出率，并能進行療效判斷以及預后判斷。對于高危人群可以應用血清CEA，CA72-4進行篩查。聯合檢測胃黏膜內CEA、A72-4、CA19-9，對胃癌的輔助診斷具有一定價值，對早期胃癌的診斷也可能有意義。多腫瘤標志物聯合應用常用消化系統腫瘤標志物的臨床應用食道：SCCA、CEA胃：CA72-4、

17、CEA、CA19-9、CA242、PGI、PGII、CA50、CK18(TPS)；腸、膽道：CEA、CA19-9、CA72-4、CA242、CA50；胰腺：CA242、CA19-9、CEA肝：AFP 、CEA 、AFU 、FERRITIN、CA50、CA72-4、CA19-9多腫瘤標志物聯合應用展望隨著分子生物學技術不斷進展，腫瘤標志物的研究已進入分子水平，腫瘤標志物的概念、內容及應用都在不斷地擴展，這必將會促進消化系統癌的早期診斷、監測腫瘤發生及預后的判斷。胃腸道惡性腫瘤中的腫瘤標志物基因表達檢測方法：RT-PCR 胃腸道癌患者外周血CEA mRNA的陽性表達與局部淋巴結轉移關系密切，而正常

18、人及良性胃腸病患者罕見陽性。結腸癌患者手術術后外周血CEA mRNA顯著高于術前，且CEA mRNA水平高者生存期顯著縮短。CEA mRNA檢測是一個檢測腫瘤轉移、預測其復發的良好指標。CEA mRNA胃腸道惡性腫瘤中的腫瘤標志物基因表達檢測方法：RT-PCR CK20有嚴格的上皮特異性分布，包括胃黏膜及幽門腺體內分泌細胞、十二指腸黏膜及沿絨毛排列的上皮細胞、泌尿道傘狀細胞、表皮Merkel細胞、舌味蕾細胞。臨床上較重要且較難診斷的具腺體形態的腫瘤中，CK20陽性可提示腫瘤可能起源于結腸、胃、膽道系統、胰腺或卵巢的黏液腺癌，排除起源于子官內膜腺癌、卵巢非黏液腺癌、胸腺腺癌、唾液腺癌及間皮瘤可能

19、，而肺癌、乳腺癌的可能性較小。胞角蛋白20(CK20)極其mRNA(CK20 mRNA)胃腸道惡性腫瘤中的腫瘤標志物基因表達檢測由于CK20表達具有高度組織特異性，在正常骨髓、血液、淋巴結中均無表達，而幾乎全部胃腸道腫瘤中均有較多表達，且在侵襲、轉移、擴散到其他組織器官時始終保持穩定。外周血循環中CK20 mRNA高表達提示進展期腸癌患者有高復發的危險。國內研究表明，CK20 mRNA陽性率和腫瘤分級及腫瘤大小呈顯著正相關，而與腫瘤病理分化沒有相關性。有研究顯示：在非腫瘤患者的血液和骨髓液中也有CK20表達，因此設定一個閾值十分必要。可見，CK20對惡性腫瘤特別是胃腸道惡性腫瘤的預后判斷有一定

20、幫助，但還需迸一步研究證實其與腫瘤分期、大小和惡性程度的確切關系及其在非腫瘤組織中的表達狀況。胞角蛋白20(CK20)極其mRNA(CK20 mRNA)胃腸道惡性腫瘤中的腫瘤標志物基因表達檢測MMP-2和TIMP-2可作為胃腸道腫瘤惡性程度、侵襲能力判斷的重要參考指標，但對胃腸道惡性腫瘤的特異性不強。MMP-2和TIMP-2在胃腸癌中表達陽性率與淋巴結轉移、浸潤深度顯著相關。MMP-2和TIMP-2在結腸癌伴肝臟轉移患者中的表達顯著高于未轉移者。MMP-2可作為癌癥進展的監測指標和判斷預后和手術后化療方案制訂的參考依據。MMP-2是腫瘤轉移和預后判斷較理想的指標，且MMP-2/TIMP-2比值

21、較單個指標表達的陽性率對評價腫瘤轉移和預后情況更有價值。基質金屬蛋白酶(MMPs)及其抑制物(TIMPs）胃腸道惡性腫瘤中的腫瘤標志物基因表達檢測生存素已陸續被證明可在大多數腫瘤組織及多種轉化細胞中表達，其表達與病程進展和不良組織學程度成正相關，可作為患者預后不良的標志之一，一種新的凋亡抑制因子。絕大多數胃癌患者生存素表達陽性，而有淋巴結轉移者生存素表達更是顯著增高。胃癌組織中生存素表達顯著高于癌旁黏膜，提示生存素表達水平與腫瘤形成有關。結腸癌的生存素mRNA，僅在癌組織中表達陽性，且陽性表達患者的5年生存率顯著低于陰性者，故其被認為是一種獨立、提示預后差的因子。生存素基因的陽性表達還被認為與

22、癌組織的化療耐藥有關，是腫瘤反義基因治療的理想靶基因可見生存素在腫瘤發生及其轉移預測方面的價值已得到初步證明，在胃腸道腫瘤中的作用也得到了很好的證實，有望成為臨床上新的腫瘤標志物。生存素(Survivin ) mRNA蛋白指紋技術（蛋白組學）研究進展蛋白質是基因功能的執行者，疾病相關基因組(包括癌基因等)的活化就會表達特異的蛋白質，隨著蛋白質組學的興起，業已證明蛋白指紋圖譜分析是有效的早期診斷惡性腫瘤的具有劃時代的診斷新模式。蛋白指紋技術（蛋白組學）研究進展蛋白指紋圖譜技術不同于只能單一指標分析的傳統腫瘤標志物，通過對蛋白質動態、全景的分析，將病人疾病早期最微小基因表達產物(蛋白質或多肽)系統地分析，獲得待檢標本中各種蛋白的含量和蛋白質分子量等信息，繪制成蛋白指紋圖譜(EPG)，通過計算機軟件與正常人、亞健康狀態人群、良性疾病和癌癥病人的指紋圖譜庫對照，比較分析差異，就能快速、敏感和特異地發現和捕獲新的與疾病相關的蛋白。原理蛋白指紋技術（蛋白組學）研究進展表面加強激光解析-電離飛行時間質譜技術： SELDI-TOF-MS（surface-enhancedlaserdesorption/inionation-timeofflight-m