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文檔簡介
1、實驗十、醋酸纖維薄膜電泳 血清蛋白分析和 人體動脈血壓的測定精選ppt一、目的和要求 、了解電泳的原理,掌握醋酸 纖維薄膜電泳的操作 、學習動脈血壓的原理,測定 收縮壓與舒張壓精選ppt二、實驗原理 (一)電泳 在外界電場的作用下,生物大分子從電極一側向另一側移動的現象 1、蛋白質 由氨基酸通過肽鍵連接而成精選ppt精選ppt2、等電點 (isoelectric point, pI) 在一定的pH條件下,當其正、負電荷數相等時,整體便失去了所有電荷,這時的pH稱為等電點(pI)。 氨基酸在等電點時電泳移動速度為零 在堿性環境中,蛋白分子 負電 陽極 在酸性環境中,蛋白分子 正電 陰極精選ppt
2、3、醋酸纖維素薄膜 (Cellulose Acetate Membranes) 采用醋酸纖維素為支持物的電泳方法叫醋酸纖維薄膜電泳,具有很高的流速和熱穩定性以及非常低的吸附,將其溶于丙酮等有機溶劑中,即可涂布成均一細密的微孔薄膜精選ppt精選ppt4、血清蛋白電泳 將抽取的血液置入不加抗凝劑的試管中,使血凝固后,析出的上清液就是血清。 血清中主要含白蛋白、球蛋白。精選ppt 血清蛋白電泳是一種臨床化驗檢查項目。 由于蛋白的絕大部分均由肝臟合成,所以,各種蛋白質的質與量的變化,除與免疫性疾病等有關外,主要反映肝臟的生理、病理情況精選ppt 血清中各種蛋白質的等電點均低于pH 7.0,在pH 8.
3、6的緩沖液中帶負電,向正極移動,分子小且帶電荷多者,則 移動速度較快精選pptpI %球蛋白 6.867.3 1220球蛋白 5.12 6.512 2球蛋白 5.06 49 1球蛋白 5.06 25清蛋白 4.645772精選ppt(二)血壓測定 1、血壓 是指血管內的血液對于單位面積血管壁的側壓,目前采用千帕(KPa)為單位。以前采用 mmHg 表示。 收縮壓:收縮期動脈血壓的最高值 (高壓) 舒張壓:舒張期動脈血壓的最低值 (低壓) 精選ppt2、血壓測定方法 此次實驗采用Korotkoff氏聽診法 正常的收縮壓/舒張壓 (mmHg) 收縮壓: 130 mmHg 舒張壓: 85 mmHg精選ppt無光澤面座位號1.50.5三、實驗方法(一)電泳 1、薄膜的使用 在毛(無光澤)面劃線,并寫上座位號(如右圖) 2、浸潤精選ppt3、點樣 (毛細管,一根,放回)4、電泳 點樣面朝下 點樣端置于負極5、染色 染色10min6、漂洗 脫色各5min(、) 最后,水洗精選ppt(二)側血壓 1、血壓計的構造:減壓計、袖帶、 氣球 2、安靜時收縮壓/舒張壓 (120/80mmHg) 3、運動后的收縮壓/舒張壓精選ppt精選ppt四、實驗
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