1、PAGE PAGE 8動(dòng)物(dngw)細(xì)胞融合與單克隆抗體制備(zhbi) 長(zhǎng)清一中 劉菲菲【教學(xué)(jio xu)目標(biāo)】1、動(dòng)物細(xì)胞融合的過(guò)程2、單克隆抗體制備的過(guò)程【教學(xué)重點(diǎn)和難點(diǎn)】1、教學(xué)重點(diǎn)（1）動(dòng)物細(xì)胞融合（2）單克隆抗體的制備過(guò)程2、教學(xué)難點(diǎn) 單克隆抗體的制備過(guò)程【課時(shí)】1課時(shí)一、 動(dòng)物細(xì)胞的融合【導(dǎo)入新課】設(shè)計(jì)思路及意圖：已有知識(shí)是學(xué)生學(xué)習(xí)新課的前提。學(xué)生的學(xué)習(xí)一定是建立在已有經(jīng)驗(yàn)的基礎(chǔ)上建構(gòu)性學(xué)習(xí)。學(xué)生基于植物體細(xì)胞雜交遷移的基礎(chǔ)上猜想動(dòng)物細(xì)胞融合的實(shí)現(xiàn)，并猜想融合后的效果。即融合細(xì)胞具有產(chǎn)生抗體和無(wú)限增殖的雙重特點(diǎn)。由于前面有細(xì)胞融合的學(xué)習(xí)基礎(chǔ)，可以弱化處理。可以簡(jiǎn)單的通過(guò)圖片

2、和動(dòng)畫組織動(dòng)物細(xì)胞融合的學(xué)習(xí)。通過(guò)動(dòng)物細(xì)胞融合和植物體細(xì)胞雜交的比較實(shí)現(xiàn)有關(guān)的學(xué)習(xí)。組織學(xué)生進(jìn)行細(xì)胞融合對(duì)象、作用和意義的自我習(xí)得。復(fù)習(xí)導(dǎo)入：復(fù)習(xí)克隆的概念并舉出在分子、細(xì)胞、個(gè)體水平克隆的實(shí)例，同時(shí)找學(xué)生板圖或默寫植物體細(xì)胞雜交的過(guò)程，并標(biāo)注涉及的原理、技術(shù)手段。動(dòng)物細(xì)胞能否進(jìn)行融合呢？和植物體細(xì)胞雜交技術(shù)相比有什么相同點(diǎn)和不同點(diǎn)呢？動(dòng)物細(xì)胞融合過(guò)程是怎樣的呢？有什么樣的用途呢？請(qǐng)同學(xué)們自主學(xué)習(xí)【自主學(xué)習(xí)】（閱讀課本30頁(yè)完成相關(guān)內(nèi)容）（1）概念：指一個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過(guò)程，也稱為細(xì)胞雜交。（2）原理(yunl): _細(xì)胞膜的流動(dòng)性_ (3) 誘導(dǎo)(yudo)動(dòng)物(dngw)

3、細(xì)胞融合的方法有三種：生物方法（滅活的病毒）、化學(xué)方法（ PEG）、物理方法（ 電激等 ）。從細(xì)胞融合的方式中，請(qǐng)同學(xué)們思考： A、B兩兩細(xì)胞融合的種類有_3_種,分別是_AA、BB、AB_變?cè)囉?xùn)練:ABC三種細(xì)胞兩兩融合的種類有_6_種（4）意義：細(xì)胞融合技術(shù)突破了有性雜交方法的局限，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能（5）應(yīng)用：細(xì)胞融合技術(shù)已經(jīng)成為研究 細(xì)胞遺傳、腫瘤和生物新品種培育等的重要手段，而雜交瘤技術(shù)，為制備單克隆抗體開辟了新途徑。下面我們一起探討細(xì)胞融合的過(guò)程，（強(qiáng)調(diào)融合完成的標(biāo)志：雜交細(xì)胞進(jìn)行有絲分裂），請(qǐng)同學(xué)們討論動(dòng)物細(xì)胞融合和植物體細(xì)胞雜交的比較思考與討論: 動(dòng)物細(xì)胞融合和植物體細(xì)胞雜交的

4、比較動(dòng)物細(xì)胞融合植物體細(xì)胞雜交原理細(xì)胞膜的流動(dòng)性細(xì)胞膜的流動(dòng)性植物細(xì)胞全能性融合前使細(xì)胞分散后進(jìn)行融合去除細(xì)胞壁誘導(dǎo)融合物理法，化學(xué)法，生物法物理法,化學(xué)法用途制備單克隆抗體解決遠(yuǎn)緣雜交不親和的問(wèn)題獲得雜種植株二、單克隆抗體【設(shè)計(jì)思路及意圖】：創(chuàng)設(shè)情境組織教學(xué)是基于建構(gòu)主義的教學(xué)觀。我利用癌癥的治療作為情境導(dǎo)入新課，基于學(xué)生的生活經(jīng)驗(yàn)，詢問(wèn)學(xué)生會(huì)出現(xiàn)何種不良反應(yīng)。學(xué)生能夠提出自己的觀點(diǎn)進(jìn)行共享。然后任務(wù)驅(qū)動(dòng)學(xué)生如何解決？讓學(xué)生聯(lián)系已經(jīng)學(xué)過(guò)的知識(shí)來(lái)解決問(wèn)題。學(xué)生聯(lián)系到抗體。在學(xué)生想到抗體的基礎(chǔ)上自然回憶抗體的產(chǎn)生細(xì)胞及細(xì)胞特點(diǎn)（如一種實(shí)質(zhì)為漿細(xì)胞的免疫過(guò)的B淋巴細(xì)胞只產(chǎn)生一種抗體）、相關(guān)結(jié)構(gòu)、作

5、用和作用特點(diǎn)，以及傳統(tǒng)手段生產(chǎn)抗體的不足。在認(rèn)知沖突后猜想問(wèn)題解決。學(xué)生基于植物體細(xì)胞雜交遷移的基礎(chǔ)上猜想動(dòng)物細(xì)胞融合的實(shí)現(xiàn)，并猜想融合后的效果。即融合細(xì)胞有產(chǎn)生抗體和無(wú)限增殖的雙重特點(diǎn)。因此在設(shè)計(jì)這堂課時(shí)，安排學(xué)生課前預(yù)習(xí)，閱讀(yud)本節(jié)課的相關(guān)內(nèi)容，以問(wèn)題的形式找出本節(jié)的核心知識(shí)點(diǎn)，訓(xùn)練學(xué)生的自主探究能力及分析解決問(wèn)題的能力。在課堂教學(xué)過(guò)程中，首先安排5分鐘時(shí)間，讓學(xué)生交流在預(yù)習(xí)課文的過(guò)程中已經(jīng)掌握的知識(shí)以及自己還不能解決的問(wèn)題。這些核心問(wèn)題可以是小組已經(jīng)解決的問(wèn)題，也可以是還未能找到答案的問(wèn)題。通過(guò)小組內(nèi)的各成員之間交流預(yù)習(xí)的成果，實(shí)現(xiàn)生生互動(dòng)，把一些簡(jiǎn)單的問(wèn)題，通過(guò)小組內(nèi)的討論加以

6、解決。然后安排20-25分鐘時(shí)間，進(jìn)行小組間核心問(wèn)題的交流，通過(guò)這一過(guò)程訓(xùn)練學(xué)生的思辨能力及語(yǔ)言表達(dá)能力。在這個(gè)環(huán)節(jié)中，教師是課堂的“主持人”，組織學(xué)生完成交流和表達(dá)，并時(shí)刻關(guān)注學(xué)生，使學(xué)生的關(guān)注點(diǎn)放到主干知識(shí)上，適時(shí)引導(dǎo)、幫助學(xué)生解決難度較大的問(wèn)題。最后，安排10分鐘左右時(shí)間當(dāng)堂練習(xí)，及時(shí)鞏固、檢測(cè)學(xué)習(xí)效果。【創(chuàng)設(shè)(chungsh)情境】現(xiàn)在(xinzi)的環(huán)境污染及食品質(zhì)量等問(wèn)題導(dǎo)致癌癥的發(fā)病率逐年升高。癌癥治療常用的治療方法是放療或化療。在臨床放射治療過(guò)程中，放射線對(duì)人體正常組織必然會(huì)產(chǎn)生一定的影響，從而造成一定的放射反應(yīng)與損傷會(huì)出現(xiàn)一些不良反應(yīng)。如何能使藥物不傷害人體正常組織而只定向作

7、用于癌細(xì)胞呢？【探究學(xué)習(xí)】1、單克隆抗體的概念：（1）抗體由何種細(xì)胞產(chǎn)生？ （2）一種抗原上面含有幾種抗原決定簇？能刺激幾種B細(xì)胞增殖分化？（3） 抗體與抗原的作用方式及數(shù)量對(duì)應(yīng)關(guān)系？（4）抗體主要分布在哪里？教師補(bǔ)充用傳統(tǒng)獲得抗體的方法并引導(dǎo)學(xué)生總結(jié)出多克隆抗體的缺點(diǎn)。如何克服傳統(tǒng)多克隆抗體的缺點(diǎn)呢？由此引出單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)及概念。概念(ginin)：由單個(gè)B淋巴細(xì)胞經(jīng)過(guò)無(wú)性繁殖（克隆），形成(xngchng)基因型相同的細(xì)胞群，這一細(xì)胞群所產(chǎn)生的化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體稱為單克隆抗體。 2、探究(tnji)單克隆抗體的生產(chǎn)過(guò)程：結(jié)合課本32頁(yè)的圖，逐步思考：（1）產(chǎn)生特定抗體的B淋巴細(xì)

8、胞，我們?cè)鯓硬拍艿玫侥兀浚?）在體外培養(yǎng)的條件下，一個(gè)B淋巴細(xì)胞有沒有可能無(wú)限增殖？（3）我們學(xué)過(guò)的什么細(xì)胞具有這樣的能力？（4）有什么辦法讓B淋巴細(xì)胞也具有這樣的能力？（5）（只考慮兩兩融合）融合細(xì)胞有幾種？（6）制備過(guò)程中的兩次篩選的結(jié)果是什么？（7）單克隆抗體制備過(guò)程中應(yīng)用哪些細(xì)胞工程技術(shù)手段？原理是什么？3、總結(jié)制備過(guò)程：未融合的 細(xì)胞從 脾中分離出B淋巴細(xì)胞給小鼠注射特定的抗原蛋白質(zhì)滅活的病毒培養(yǎng)的骨髓瘤細(xì)胞選擇培養(yǎng)基融合的具有同核 細(xì)胞 雜交 瘤細(xì)胞融合的雜種 細(xì)胞 克隆化培養(yǎng)專一抗體檢驗(yàn)陽(yáng)性小鼠體內(nèi)培養(yǎng)能產(chǎn)生抗體的雜交瘤細(xì)胞單克隆抗體體外培養(yǎng)通過(guò)細(xì)胞融合技術(shù)生產(chǎn)的單克隆抗體有什么

9、樣的優(yōu)點(diǎn)呢？請(qǐng)同學(xué)們結(jié)合課本比較單克隆抗體和常規(guī)抗體的不同點(diǎn)4、單克隆抗體和常規(guī)抗體的比較單克隆抗體常規(guī)抗體分泌雜交瘤細(xì)胞各B淋巴細(xì)胞特點(diǎn)特異性強(qiáng)，靈敏度高特異性差，靈敏度低生產(chǎn)產(chǎn)量高，易分離產(chǎn)量低,分離困難5、單克隆抗體(kngt)的應(yīng)用（）可用于作為診斷試劑：有準(zhǔn)確，高效(o xio)，快速的優(yōu)點(diǎn)（）可用于疾病(jbng)治療（）可用于運(yùn)載藥物“生物導(dǎo)彈”單克隆抗體藥物6、小結(jié)：（1）動(dòng)物細(xì)胞融合過(guò)程（2）單克隆抗體制備過(guò)程 細(xì)胞融合（原理及方法）兩次篩選（目的及方法） 細(xì)胞培養(yǎng)（體內(nèi)或體外）分離提純單克隆抗體 （3）單克隆抗體的應(yīng)用鞏固練習(xí)：1、 關(guān)于滅活病毒的表述中正確的是 （A ）A

10、. 保留抗原性，可誘導(dǎo)細(xì)胞融合B. 不能感染細(xì)胞，免疫系統(tǒng)不能再識(shí)別C. 可用DNA探針檢測(cè)病毒是否被滅活D. 因不再具備完整的基因結(jié)構(gòu)，不能再?gòu)?fù)制2、用動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)獲取單克隆抗體，下列實(shí)驗(yàn)步驟中錯(cuò)誤的是 （ B ）A將抗原注入小鼠體內(nèi)，獲得能產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞B用纖維素酶處理B淋巴細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞C用聚乙二醇作誘導(dǎo)劑，促使能產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合D篩選雜交瘤細(xì)胞，并從中選出能產(chǎn)生所需抗體的細(xì)胞群，培養(yǎng)后提取單克隆抗體3、下面是單克隆抗體的制備示意圖，請(qǐng)分析回答： 小白鼠 細(xì)胞A+瘤細(xì)胞B 雜交瘤細(xì)胞 單克隆抗體 （1）細(xì)胞融合在生物工程中屬于 動(dòng)物細(xì)胞 工程的范圍，用這種方法(fngf)所得的雜交瘤細(xì)胞具有的主要特征是 能產(chǎn)生(chnshng)特定的抗體 ； 能無(wú)限(wxin)增殖 。 （2）雜交瘤細(xì)胞通過(guò) 細(xì)胞融合 、 細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程合成大量的單克隆抗體。 （3）過(guò)程進(jìn)行的誘導(dǎo)方式，與植物原生質(zhì)體的融合相比特有的方法是（ A ） A滅活的仙臺(tái)病毒 B骨髓瘤細(xì)胞 C離心 D聚乙二醇 （4）在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，要不停的使用的一種工具酶是 胰蛋白酶 ，目的是使細(xì)胞分散開。 （5）瘤細(xì)胞B具有癌變的特點(diǎn)，細(xì)胞A確切