1、細胞凋亡與免疫細胞凋亡的發現及發展歷史 1842年，Vogt發現一種不同于細胞壞死的細胞死亡現象。1887年，Flemming將對這種細胞死亡做了形態描述。1972年，Kerr首次提出細胞凋亡的概念。1973年，首次在細胞凋亡中發現DNA的降解。今天，細胞凋亡進入分子階段的研究，近幾年已進入臨床應用階段。H. Robert Horvitz Sydney Brenner John E. Sulston The Nobel Prize in Physiology or Medicine 2002 課程內容凋亡的概念；凋亡的形態學特征和生化改變；凋亡的檢測；凋亡的分期；凋亡的誘導因素和抑制因素；凋亡

2、的生物學意義凋亡相關基因；免疫相關的凋亡信號轉導；凋亡與免疫生理；凋亡與免疫病理。Apoptosis and necrosis細胞凋亡是指細胞在一定的生理或病理條件下，遵循自身的程序，由基因調控的主動的死亡過程。它是一個主動的，高度有序的，基因控制的，一系列酶參與的過程。細胞壞死是由于某些外界的因素，如局部貧血、高熱以及物理、化學損傷和生物的侵襲等，造成細胞急速死亡而結束其生命。 壞死 凋亡 性質 病理性 生理性或病理性生化特點 被動過程，無新蛋白合成， 主動過程，有新蛋白會成， 不耗能 耗能細胞數量 成群細胞死亡，組織損傷 單個細胞丟失細胞形狀 破裂成碎片 形成凋亡小體形態變化 細胞腫脹、破

3、壞、細胞結構 細胞膜及細胞器相對完整， 全面溶解 細胞皺縮，核固縮 染色質 稀疏、分散、呈絮狀 致密、固縮、邊集或中集DNA電泳 隨機降解，電泳呈彌漫條帶 DNA片段化( 80-200bp)， 電泳呈梯狀條帶炎癥反應 溶酶體破裂，局部炎癥反應 溶酶體相對完整，局部無炎 癥反應基因調控 無 有 潛伏期 無 數小時細胞凋亡與壞死的比較細胞凋亡與壞死的形態變化細胞凋亡的形態學變化 細胞膜的變化：微絨毛、細胞突起和細胞表面皺褶消失；胞膜迅速發生空泡化，內質網不斷擴張并與胞膜融合，形成膜表面的芽狀突起，稱為出芽(budding)。細胞凋亡中細胞膜的變化細胞質的變化：胞質濃縮：由于胞質脫水而導致細胞皺縮、

4、致密及固縮(condensation)，是細胞凋亡形態學變化的一大特征；細胞器變化：線粒體變大，嵴增多，增殖并空泡化。內質網腔擴大、增殖并在凋亡細胞形成自噬體過程中提供包裹膜。其他多數細胞器完整存在，變得致密。細胞核的變化：染色質濃縮，形成染色質塊，并聚集在核膜的邊緣，呈新月形、馬蹄形或舟狀分布，稱為染色質邊聚(margination)；或聚集在核中央，稱為染色質中聚。隨著染色質進一步聚集，核纖層斷裂消失，核膜在核膜孔處斷裂，兩斷端向內包裹將聚集的染色質塊分割，形成若干個核殘塊。凋亡小體形成： 胞膜皺縮內陷，分割包裹胞質，內含DNA物質及細胞器，形成泡狀小體稱為凋亡小體(apoptosis b

5、ody)，這是凋亡細胞特征性的形態學改變。凋亡小體呈圓形、橢圓形或不規則狀，小體內的成份主要是胞質、細胞器和核碎片。吞噬： 凋亡小體形成后，鄰近巨噬細胞識別由細胞膜內側轉移到外側的磷脂酰絲氨酸(phosphatidylserine, PS)，并吞噬和消化凋亡小體。整個凋亡過程沒有細胞內容物的外漏，因而不伴有局部的炎癥反應。繼發性壞死(secondary necrosis)： 在體外誘導細胞凋亡時，由于沒有巨噬細胞吞噬凋亡小體，凋亡小體會發生繼發性壞死。體內也有發現，機制不明。細胞凋亡的生化改變 胞漿Ca2+升高，pH降低；內源性Ca2+/Mg2+依賴性核酸內切酶激活，Zn2+是其抑制劑；生物大

6、分子的合成。但CTL、NK細胞釋放的顆粒酶誘導的靶凋亡無需新的RNA和蛋白的合成；線粒體內膜的跨膜電位降低、呼吸鏈受損、ATP生成減少、細胞活性氧(ROS)產生增多、線粒體通透性轉換孔(permeability transition pore, PTP)開放和線粒體膜通透性增高，導致線粒體內的細胞色素C、凋亡誘導因子(apoptosis inducing factor,AIF)、凋亡蛋白酶激活因子(apoptotic protease activating factor， Apaf)等凋亡啟動因子釋放入胞漿。從而誘導細胞凋亡。細胞凋亡的檢測 細胞凋亡的形態學檢測；磷脂酰絲氨酸外翻分析(Anne

7、xin V法)；流式細胞儀檢測細胞凋亡；DNA片斷化檢測；脫氧核糖核苷酸末端轉移酶介導的缺口末端標記法(terminal -deoxynucleotidyl transferase mediated nick end labeling, TUNEL)。HeLa細胞凋亡過程中核染色質的形態學變化Confocal觀察HeLa細胞凋亡過程中的FITC-Annexin V和PI染色流式細胞儀檢測細胞凋亡在凋亡發生的各個過程當中，都有相應的流式細胞儀的檢測方法，可以采用以下檢測方法： 1、線粒體功能 2、DNA Cycle 3、Caspases 4、Annexin V Assay 5、DNA Fragm

8、entation AssaysAnnexin V AssayDNA Cycle AssayDNA LadderDNA LadderTUNEL法細胞凋亡的分期誘導期：凋亡誘導因素作用于細胞后，細胞通過復雜信號轉導途徑將信號傳入胞內，由細胞決定生存或死亡；執行期：決定死亡的細胞將按預定程序啟動凋亡，激活凋亡所需的各種酶類及降解相關物質，形成凋亡小體；消亡期：凋亡的細胞被鄰近的巨噬細胞所吞噬并在巨噬細胞內降解。細胞凋亡的分期凋亡小體的吞噬巨噬細胞上的分子： ABC1 (the class A scavenger receptors); CD36 (the class B scavenger rece

9、ptors); CD14 (the class B scavenger receptors); v3-integrin (the vitronectin receptor).凋亡小體上的分子： anionic phospholipids; PS; ICAM3.細胞凋亡的誘導因素細胞的生存和死亡是對立統一的兩個方面。在進化過程中控制細胞生死的程序已經以基因的形式存儲于細胞中，正常情況下這兩類基因處于協調的對立統一狀態，以確保細胞生死有序。當細胞受到來自細胞內外的凋亡誘導因素作用時凋亡程序就會啟動。常見誘導因素有：激素和生長因子失衡；理化因素； 免疫性因素；微生物學因素；其他。1、激素和生長因子失

10、衡： 生理水平的激素和生長因子是細胞正常生長不可缺少的因素，一旦缺乏，細胞會發生凋亡；相反，某些激素或生長因子過多也可導致細胞凋亡，例如：強烈應激引起大量糖皮質激素分泌，后者誘導淋巴細胞凋亡，致使淋巴細胞數量減少。2、理化因素： 射線、高溫、強酸、強堿、乙醇、抗癌藥物等，均可導致細胞凋亡。例如：電離輻射可產生大量氧自由基，使細胞處于氧化應激狀態，DNA受損，引起細胞凋亡。3、免疫性因素： 在生長、分化及執行防御、自穩、監視功能中，免疫細胞可釋放某些分子導致免疫細胞本身或靶細胞的凋亡。例如： CTL細胞可分泌顆粒酶，引起靶細胞發生凋亡。4、微生物學因素： 細菌、病毒等致病微生物及其毒素可誘導細胞

11、凋亡。例如：HIV感染時，可致大量CD4+ T淋巴細胞凋亡。5、其他如缺血與缺氧，失去基質附著等因素都可引起細胞凋亡。在腫瘤治療中，單克隆抗體、反義寡核苷酸、抗癌藥物等均可誘導腫瘤細胞凋亡。 細胞凋亡的抑制因素細胞因子 IL2、神經生長因子等具有抑制凋亡的作用；某些激素如ACTH、睪丸酮、雌激素等對于防止靶細胞凋亡，維持其正常存活是必需的。例如：當腺垂體被摘除或功能低下時，腎上腺皮質細胞失去ACTH刺激，可發生細胞凋亡，引起腎上腺皮質萎縮。睪丸酮對前列腺細胞，雌激素對子宮平滑肌細胞都有類似的作用。某些二價金屬陽離子如Zn2+ ，藥物如苯巴比妥，病毒如EB病毒，以及中性氨基酸等也具有抑制細胞凋亡

12、的作用。細胞凋亡的生物學意義發育生物學意義；生理學意義：參與了正常成年組織細胞更新、生理器官的內分泌調控(如子宮產后復原，月經期子宮內膜的脫落)以及對受損不能修復的細胞或突變細胞的清除等重要生理過程，維持機體內環境穩定。免疫學意義：當機體受到病原微生物感染時，宿主細胞發生主動凋亡，導致被感染細胞的死亡和微生物的清除。這是一種積極的防御功能。淋巴細胞的陰、陽性選擇，活化誘導的T細胞死亡以及淋巴細胞對靶細胞的攻擊都是通過凋亡完成的。 發育中的細胞凋亡蝌蚪尾的消失發育過程中手和足的成形過程CTL細胞使腫瘤細胞凋亡在生物進化過程中，多細胞生物獲得了細胞凋亡的能力，可以使單個細胞的死亡對周圍微環境的負面

13、影響降至最小。這對于多細胞生物而言是十分重要的。細胞壞死也不是完全沒有生物意義。例如：植物經常用死亡的組織作為其結構成分。另外，在凋亡通路被敲除的小鼠中，其前肢發育過程中的細胞丟失是通過細胞壞死來完成的。凋亡相關基因凋亡的啟動者：TNF家族、細胞色素C 凋亡的執行者：Caspase家族凋亡的調節者： 抑制凋亡基因：如IAP、Bcl-2等； 促進凋亡基因：如Apaf-1、Bax、p53等； 雙向調控基因：如c-myc、Bcl-x等。Genes and molecules that regulate apoptosis(1) Gene/molecule EffectsBcl-2 subfamily

14、 (Ced9 in C elegans) Bcl-2 Promotes survival Bcl-xl Promotes survival Bcl-w Promotes survival Bcl-xs Promotes deathBax family Bax Promotes death Bak Promotes death Bok Promotes deathBH3 subfamily Bad Promotes death Bik Promotes death Bid Promotes death Blk Promotes death HRK Promotes death BimL Prom

15、otes death Egl (C elegans) Promotes deathGenes and molecules that regulate apoptosis(2) Gene/molecule EffectsCaspases 113(Ced3 in C elegans) These interleukin 1 converting enzyme (ICE) like cysteine protein- ases form a central part of the apop- totic cascade.Apaf-1 (Ced4 in C elegans) These adaptor

16、 molecules link caspase (Ced3) activation and Bcl-2 (Ced9) expression. Their functions in promoting death or survival remain to be defined.p53 family p53 is necessary for apoptosis induced by agents that cause DNA damage. p53 can also affect the expression of bcl-2 and bax directly.Nitric oxide This

17、 molecule prevents apoptosis by altering bcl-2 expression and by nitrosylation of caspasesCytochrome c This molecule induces apoptosis via caspase activation凋亡蛋白酶(cysteinecontaining asparte-specific protease, caspase)都是含有半胱氨酸的蛋白酶，作用部位都在天冬氨酸殘基的羧基與下一個氨基酸的氨基形成的肽鍵；以酶原的形式存在，并且在體內低水平組成性表達。以級聯放大的方式活化。活化的Ca

18、spase分子催化裂解眾多的效應分子，誘發細胞凋亡。 都是由兩大、兩小亞基組成的異四聚體，大、小亞基由同一基因編碼，前體被切割后產生兩個活性亞基。Caspase的異四聚體Caspase的分類ICE亞族，參與炎癥反應；CED-3家族，參與細胞凋亡，又分為兩類：initiator caspase：caspase-2、8、9、10； caspase-2、8、10參與死亡受體通路，caspase9參與線粒體通路。Executioner or effector caspase ：caspase-3、6、7。Caspase分子的Pro-domain起始Caspase分子的Pro-domain長度大于100

19、個氨基酸，往往含有明顯的功能域，如DED(death effector domain)，CARD(Caspase recruitment domain) 等。這些功能域參與Caspase分子之間的相互作用及Pro-caspase活化及Caspase分子的亞細胞定位等。效應Caspase分子的Pro-domain長度則小于30個氨基酸，其功能可能是抑制Caspase被募集和活化。在Pro-caspase活化的過程中，Pro-domain會被剪切下來，可以抑制活化的Caspase分子的進一步剪切，這可能是一種反饋機制。caspase-2、8、10的Pro-domainCaspase的效應機制 滅活

20、DNA酶抑制物；直接破壞細胞結構；滅活細胞凋亡的抑制物(如 Bcl-2)，不僅消除了Bcl-2蛋白的抗凋亡作用，而且Bcl-2水解片段也有促細胞凋亡的作用； 滅活或下調與DNA修復有關的酶；基因表達調控。滅活DNA酶抑制物正常活細胞因為核酸酶處于無活性狀態，這是由于核酸酶和抑制物結合在一起，如果抑制物被破壞，核酸酶即可激活，引起DNA片段化。現知caspase可以裂解這種抑制物而激活核酸酶，因而把這種酶稱為Caspase激活的脫氧核糖核酸酶(caspase-activated deoxyribonulease CAD)，而把它的抑制物稱為ICAD。在正常情況下，CAD不顯示活性是因為CAD-I

21、CAD以一種無活性的復合物形式存在。ICAD一旦被Caspase水解，即賦予CAD以核酸酶活性，DNA片段化即產生。有意義的是CAD只在ICAD存在時才能合成并顯示活性，提示CAD-ICAD以一種共轉錄方式存在，因而ICAD對CAD的活化與抑制都是必需的。 CAD(caspase-activated Dnase)的激活死亡底物-PARPPARP (poly (ADP-ribose) polymerase, 多聚(ADP-核糖)聚合酶)，為存在于多數真核細胞中的一種修飾酶，與DNA修復、基因完整性監護有關。活化的caspase-3能切割116kd的PARP成為85kd的片段，這是細胞凋亡過程的特

22、征性標志，因此，85kd的片段又叫凋亡片段。結果使受PARP負調控影響的Ca2+/Mg2+依賴性核酸內切酶的活性增高，裂解核小體間的DNA，引起細胞凋亡。大多數情況下，116kd的PARP被蛋白酶切割以后，細胞便進入凋亡途徑，最終導致細胞凋亡，所以PARP也被稱為死亡底物。 凋亡酶激活因子-1(apoptotic protease activating factor-1, Apaf-1)Apaf-1在線蟲中的同源物為ced-4，在線粒體參與的凋亡途徑中具有重要作用。Apaf-1含有3個不同的結構域：CARD結構域，能召集caspase-9；NBD 結構域，能結合ATP/dATP；C端的WD40

23、結構域，含有色氨酸/天冬氨酸重復序列，當細胞色素c的結合到這一區域后，能引起Apaf-1多聚化而激活。Apaf-1具有激活Caspase-3的作用，而這一過程又需要細胞色素c(Apaf-2)和caspase-9(Apaf-3)參與。Apaf-1/細胞色素c復合體與ATP/dATP結合后，Apaf-1就可以通過其CARD結構域召集caspase-9，形成凋亡體(apoptosome)，激活caspase-3，啟動caspase級聯反應。凋亡體(apoptosome)凋亡體的組裝分子警察P53一種抑癌基因，野生型p53蛋白是一種DNA結合蛋白，在G期監視DNA的完整性，具有轉錄激活作用。Bax基因

24、首先被發現可由p53誘導，其它被p53誘導參與細胞凋亡的基因有fas、Apaf-1等。突變型p53(mtp53)基因編碼的P53蛋白對細胞凋亡有抑制作用。人類腫瘤一半以上具有p53基因突變和缺失。 p53導致細胞凋亡的三個步驟：誘發氧化還原相關基因的表達；制造活性氧因子；氧化破壞線粒體的細胞膜，使細胞死亡。Bcl-2家族 Bcl-2家族的作用機制Bcl-2家族的結構和能形成離子通道的一些毒素非常相似，可以插入膜結構中形成較大的通道，允許細胞色素c等蛋白質通過線粒體膜，從而導致凋亡；Bcl-2家族蛋白對于PTP 孔(permeability transition pore)的開放和關閉起關鍵的調

25、節作用。PTP孔主要由位于內膜的腺苷轉位因子(Adenine nucleotide translocator, ANT)和位于外膜的電壓依賴性陰離子通道(Voltage dependent anion channel，VDAC)等蛋白所組成，PT孔開放會引起線粒體跨膜電位下降和細胞色素c釋放。促凋亡蛋白Bax等可以通過與ANT或VDAC的結合介導PTP孔的開放，而抗凋亡類蛋白如Bcl-2、Bcl-xL等則可通過與Bax競爭性地與ANT結合，或者直接阻止Bax與ANT、VDAC的結合來發揮其抗凋亡效應。現在普遍認為，Bcl-2家族中抑制凋亡因子與促進凋亡因子的比例決定細胞的命運。主要分布在線粒體

26、膜、內質網膜、核膜等處，是膜整合蛋白。其高表達能阻抑多種凋亡誘導因素(如糖皮質激素、射線照射、佛波酯等)所引發的細胞凋亡。其抗凋亡機制有：阻止線粒體膜電位的下降和通透性的增強，抑制線粒體釋放促凋亡因子，從而防止細胞凋亡；阻止內質網Ca2+流的釋放，使胞漿中Ca2+水平維持穩定；能結合Apaf-1和caspase-9，并維持其非活化狀態，阻止caspase級聯反應，防止細胞凋亡；抑制促凋亡的Bax，Bak細胞毒作用；直接的抗氧化作用。Bcl-2Bax (Bcl-2 associated X protein, Bcl-2相關X蛋白) Bax首先因與Bcl-2形成異源二聚體而被發現。Bax具有孔形成

27、能力，并能誘導細胞色素c的釋放，激活caspase-9，啟動凋亡級聯反應。Bcl-2可以與Bax形成異源二聚體，能抑制Bax誘導細胞色素c的釋放的作用，從而阻止細胞凋亡。但是Bax不但可以與Bcl-2形成異源二聚體，也可以自身形成同源二聚體。這些多聚體的形成是通過Bcl-2家族的同源區BH1和BH2實現的。當Bax在細胞內超表達，并形成同源二聚體時，細胞對死亡信號的反應增強。所以Bcl-2與Bax的比例，即Bcl-2/Bax異源二聚體與Bax/Bax同源二聚體的比例，決定了細胞對凋亡信號的反應。Bcl-2與Bax的比例決定細胞凋亡與否 Bid死亡受體通路和線粒體通路的聯系者Bid蛋白是Bcl

28、-2家族中促凋亡類的蛋白，是Fas細胞凋亡信號通路中的一種特異性底物。被死亡受體如Fas，TNF激活的caspase-8可切割Bid，使其變為有活性的tBid(truncated Bid)。tBid導致Bax轉位和構象變化，使Bax得以插入線粒體膜，誘導細胞色素c從線粒體泄漏到胞漿，導致細胞凋亡。 Bax轉位和插入依賴于Bid。Bid經caspase-8 切割可以放大Fas/TNF細胞凋亡信號，經修剪后的tBid,能將細胞凋亡信號自胞質傳遞至線粒體使之釋放細胞色素c，引發第二條通路。提示上述兩條通路有交叉。凋亡抑制蛋白(IAPs, inhibitors of Apoptosis protien

29、)家族是一組可以抑制細胞凋亡的蛋白， IAP既通過BIR結構域抑制抑制caspase-3，7，9等的活性，也通過RING結構域催化caspase泛素化降解，從而阻止多種因素誘導的細胞凋亡。Smac/DIABLO Smac/DIABLO在溶液中以同源二聚體存在，可以結合在IAP上，拮抗其作用，對caspase3的成熟及成熟后的活性進行調控，促進凋亡。Smac/DIABLO的N端的7個保守氨基酸對其功能是必須的。Caspase-8激活的Caspase-3活性能被凋亡蛋白抑制IAP阻斷，然而Caspase-8 可以激活Bid , tBid能促使線粒體協同釋放Cytc和Smac，Smac捕獲IAP而重

30、新激活Caspase-3。這個過程可被Bcl-2或者Bcl-xL阻斷。機理是Bcl-2或者Bcl-xL可阻止線粒體內容物的釋放。凋亡誘導因子(apoptosis-inducing factor，AIF) AIF是由X染色體上單拷貝基因編碼的保守的黃素蛋白，先在胞漿中合成其前體，然后移位至線粒體的內外膜間隙，與FAD結合形成成熟的AIF，具有雙重功能。正常時AIF作為線粒體氧化還原酶，能催化細胞色素c和NAD之間的電子傳遞。在各種凋亡誘導因子的作用下，AIF從線粒體釋放至胞漿，然后進入細胞核，與Endo G一起引起細胞染色體的凝聚和斷裂成50kD的大片斷等凋亡的特征性改變。釋放入胞漿的AIF通過

31、促進線粒體釋放細胞色素c而增強凋亡信號。AIF引起的細胞凋亡不依賴于caspase的活性，但AIF和Cyt c/caspase/CAD誘導的凋亡通路之間并不是完全獨立的，胞漿中的AIF可以使線粒體釋放更多的Cyt-c，而活化的caspase也能使線粒體釋放AIF因子。c-myc重要的轉錄調節因子；既可激活介導細胞增殖的基因，也可激活介導細胞凋亡的基因，具有雙向調節作用；在c-myc基因表達后，如果沒有足夠的生長因子持續作用，細胞就發生凋亡；反之，細胞就處于增殖狀態。 免疫相關的凋亡信號轉導死亡受體途徑線粒體途徑顆粒酶B途徑死亡受體與配體FLIP(FLICE-like inhibitory pr

32、otein)caspase8 也稱為FLICE(FADD homologous ICE like proteinase)。 FLIP在結構與序列上與caspase-8有很多相似之處，能抑制caspase-8 結合到死亡誘導信號復合物(DISC)上從而阻斷Fas 介導的細胞凋亡信號傳導。死亡受體途徑Fas/FasL信號通路在免疫系統中的作用參與免疫調節，活化成熟的外周T細胞主要通過Fas/FasL系統介導的細胞凋亡清除與自身抗原有交叉反應的克隆和由自身抗原激活的細胞克隆，以限制T細胞克隆的無限增殖，防止對自身組織的損傷，即產生外周免疫耐受。淋巴細胞凋亡異常導致的免疫耐受失控，是自身免疫性疾病的主

33、要病因；其二是CTL可以通過FasL誘導靶細胞凋亡；某些腫瘤細胞也可以通過這一途徑誘導淋巴細胞凋亡，從而逃脫免疫監控。線粒體途徑死亡受體途徑與線粒體途徑的整合對Fas應答的細胞：type I型細胞：如胸腺細胞； 其caspase-8有足夠的活性，被Fas活化后導致細胞凋亡，在這類細胞中高表達Bcl-2不能抑制Fas誘導的細胞凋亡。type II型細胞：如肝細胞。 Fas介導的caspase-8活化不能達到足夠的水平，因此這類細胞中的凋亡信號需要借助凋亡的線粒體途徑來放大。死亡受體途徑與線粒體途徑的整合.Mitochondrial PathwayDeath Receptor PathwayFas

34、LCaspase 3DDDDFas/Apo1/CD95FADDProcaspase 8Caspase 8BIDoxidantsceramideothersBcl-2DCytochrome cdATPProcaspase 9Apaf -1dATPApaf -1Caspase 9Procaspase 3apoptosomeDNA damageCellular targets線粒體的雙重功能線粒體既是細胞的能量工廠，也是細胞的凋亡控制中心。顆粒酶B途徑顆粒酶中B是最主要的效應分子。GraB可以在細胞質、線粒體和細胞核三個層次作用于不同的分子誘導細胞凋亡。最早發現它能激活CASPASE-3，從而使細胞

35、走向凋亡。另外，GraB也可能作用于CASPASE家族的其他成員，如CASPASE 8。GraB還作用于線粒體的內膜，破壞線粒體的結構，而且不依賴于CASPASE的活性。據報道，GraB可以直接酶解Bid等，啟動細胞色素C的釋放，而且這種途徑勿需激活CASPASE 。免疫相關的凋亡信號轉導細胞凋亡和免疫生理T細胞在胸腺中的發育分化與凋亡；B細胞在骨髓中的發育分化與凋亡；外周免疫自穩與細胞凋亡；CTL與NK細胞的致凋亡效應。T細胞在胸腺中的發育分化與凋亡前體T細胞在IL-7作用下，高表達Bcl-2或缺失Bax，存活；TCR基因重排后，不表達功能性TCR的前T細胞通過死亡受體途徑凋亡；陽性選擇中， Bcl-2起關鍵性作用；陰性選擇可能涉及Fas死亡受體途徑，另外Bim可能起重要作用。B細胞在骨髓中的發育分化與凋亡BCR基因重排中，Bax/Bak可以誘導未成功重排的前B細胞凋亡；陰性選擇中，Bcl-2起關鍵性作用。外周免疫自穩與細胞凋亡活化的T細胞的凋亡：活化誘導的細胞死亡(AICD)：主要通過死亡受體途徑；死亡忽視途徑：由于細胞因子撤離所致，可能主要通過線粒體途徑。正信號的撤除，不是負信號成熟B細胞的凋亡：主要通過Fas死亡受體途徑。 活化誘導的T細胞死亡正常的T淋巴細胞在受到入侵的抗原刺激后，T淋巴細胞被激活，并誘導出一系列的免疫應答反應。機體為了防止過高的免疫應答，或防止這