1、第十一章抗生素類藥物的分析進入返回主目錄藥物分析A抗生素類藥物分析思考與練習第一節 概 述第二節 內酰胺類抗生素 第三節 氨基糖苷類抗生素第四節 四環素類抗生素第五節 抗生素類藥物中高分 子雜質的檢查基本要求藥物分析A抗生素類藥物分析基本要求一、掌握抗生素類藥物的結構特點與分析方法之間的關系。二、掌握抗生素類藥物的鑒別原理與方法。三、掌握抗生素類藥物法定含量測定方法的原理、測定方法與計算。四、熟悉抗生素類藥物雜質檢查的方法。五、了解抗生素類藥物中高分子聚合物檢查。返 回藥物分析A抗生素類藥物分析第一節 概述1. 抗生素藥物的特點化學純度較低活性組分易發生變異穩定性差藥物分析A抗生素類藥物分析2

2、. 微生物學法與理化法的比較微生物檢定法理化法以抗生素對微生物的殺傷或抑制程度為指標衡量抗生素的生物效價 根據抗生素結構特點，利用其特有的理化性質測定其含量已知或新發現的抗生素、精致品或粗制品均能測定 測定化學結構已知、已提純的抗生素靈敏度高、樣品需用量小、反映抗生素的醫療價值，但操作步驟多、費時、誤差大 迅速、準確、專屬性高、樣品需用量小、操作簡單、省時藥物分析A抗生素類藥物分析3.抗生素的活性以效價單位來表示： 每ml或每mg中含有某種抗生素的有效成分的多少，用單位（u）或g 表示。 1mg青霉素G鈉鹽定為1667單位 1mg青霉素G鉀鹽的單位（u） =1667356.4/372.5=15

3、95u/mg藥物分析A抗生素類藥物分析分類（按結構與性質）： 內酰胺類、氨基糖苷類、 四環素類、大環內酯類、 氯霉素類、多肽類、抗腫瘤類 林可霉素類、其他抗生素類返 回藥物分析A抗生素類藥物分析第二節 內酰胺類抗生素 青霉素類NSCH3CH3COOHOHN1234567RCO母核（6-氨基青霉烷酸）AB藥物分析A抗生素類藥物分析頭孢菌素類AB藥物分析A抗生素類藥物分析青霉素（青霉素鉀、鈉）藥物分析A抗生素類藥物分析氨芐西林（氨芐青霉素）藥物分析A抗生素類藥物分析阿莫西林（羥氨芐青霉素）藥物分析A抗生素類藥物分析普魯卡因青霉素藥物分析A抗生素類藥物分析頭孢氨芐藥物分析A抗生素類藥物分析頭孢拉啶藥

4、物分析A抗生素類藥物分析頭孢羥氨芐藥物分析A抗生素類藥物分析頭孢噻吩鈉藥物分析A抗生素類藥物分析酸性結構特點與性質一、Na與堿金屬(Na+、K+)成鹽 （一）羧基 易溶于水 藥物分析A抗生素類藥物分析與有機堿(普魯卡因)成鹽 難溶于水普魯卡因青霉素藥物分析A抗生素類藥物分析（二）手性C 頭孢菌素類 C6 C7青霉素類 C3 C5 C6 旋光性藥物分析A抗生素類藥物分析 （三）共軛體系 頭孢菌素類 母核有共軛體系 青霉素類 母核無明顯UV 多數有苯環取代基 UV藥物分析A抗生素類藥物分析（四）內酰胺環 水溶液 不穩定 干燥純凈 穩定 不穩定性因素四元環張力大 酰胺鍵易水解 藥物分析A抗生素類藥物

5、分析青霉素類 某些氧化劑酸、堿、青霉素酶（某些金屬離子） （溫度）降解失效藥物分析A抗生素類藥物分析例青霉素的降解反應青霉素青霉噻唑酸H2O/OH青霉素酶青霉酸H2OpH2100青霉噻唑酰基羥胺酸NH2OH青霉烯酸pH4青霉胺CO2青霉醛HgCl2藥物分析A抗生素類藥物分析頭孢菌素類酸、堿、胺類-內酰胺酶降解失效藥物分析A抗生素類藥物分析（一）呈色反應1. 羥肟酸鐵反應-內酰胺類呈色羥肟酸衍生物Fe3+/3H+鑒別試驗 二、NaOH2HClNOHH-b內酰胺類藥物分析A抗生素類藥物分析H+Fe3+/3 （紅、棕、褐）藥物分析A抗生素類藥物分析2. 茚三酮反應 -氨基-氨基茚三酮藍紫色藥物分析A

6、抗生素類藥物分析3. 雙縮脲反應似肽鍵（開環分解）- 內酰胺類堿性酒石酸銅紫藥物分析A抗生素類藥物分析4. 與重氮苯磺酸反應橙黃色重氮苯磺酸-56OHHC（偶合）酚羥基頭孢哌酮藥物分析A抗生素類藥物分析5. 與變色酸-硫酸反應活潑“-CH2-”青霉素阿莫西林氨芐西林（分解）變色酸顯色藥物分析A抗生素類藥物分析1. K+、Na+的火焰反應（二）各種鹽的反應 焰色鮮黃色 + 醋酸氧鈾鋅黃 Na+ 焰色紫色 + 0.1%四苯硼鈉 + Ac白 K+藥物分析A抗生素類藥物分析2. 沉淀反應（青霉素鹽）遇酸在過量HCl或有機溶劑中溶解白青霉素青霉素鈉青霉素鉀緘+H藥物分析A抗生素類藥物分析3. 重氮化 -

7、 偶合反應 重氮化-偶合反應芳伯氨基藥物分析A抗生素類藥物分析4. 與三硝基苯酚反應 二芐基乙二胺藥物分析A抗生素類藥物分析mp三硝基苯酚藥物分析A抗生素類藥物分析光譜法（三）1、UV法樣品、分解產物Cu2+頭孢氨芐 max = 262nm青霉素V鈉 A280nm/A264nm = 1.301.50藥物分析A抗生素類藥物分析pH3.8分子重排藥物分析A抗生素類藥物分析藥物分析A抗生素類藥物分析2、IR法3180cm-1N-H內酰胺 C=O1780cm-13470cm-1O-H1690cm-1仲酰胺C=O1250cm-1C-O以阿莫西林為例藥物分析A抗生素類藥物分析色譜法（四）1、TLC法對照品

8、對照法2、HPLC法藥物分析A抗生素類藥物分析三、雜質檢查 藥物 檢查項目 檢查方法 頭孢他啶 聚合物 HPLC法 頭孢曲松鈉 頭孢哌酮鈉 頭孢噻肟鈉 頭孢呋辛酯 有關物質和異構體 HPLC法 頭孢氨芐 有關物質 反相TLC法 青霉素鉀（鈉） 吸收度 紫外分光光度法 藥物分析A抗生素類藥物分析 1.頭孢他啶聚合物的測定 固定相：葡聚糖凝膠G-10（ 40120m ） 流動相A：3.5%硫酸銨的0.01mol/L磷酸鹽緩沖液 流動相B：0.01%十二烷基硫酸鈉 對照品溶液：頭孢他啶對照品 100g/ml藥物分析A抗生素類藥物分析1）系統適用性試驗：理論塔板數和拖尾因子用1mg/ml藍色葡聚糖20

9、00、流動相A測定；重復性用對照品溶液、流動相B測定。 N不低于900，拖尾因子0.751.5，峰面積的RSD應小于5.0%。2）測定方法 進樣供試液，用流動相A；進樣對照液，用流動相B。以外標法計算，含頭孢他啶聚合物以頭孢他啶計不得超過0.3%。藥物分析A抗生素類藥物分析2.頭孢呋辛酯中有關物質和異構體的檢查 固定相：ODS 流動相：0.2mol/L磷酸二氫銨-甲醇（62:38） 1）頭孢呋辛酯2-異構體的制備：頭孢呋辛酯對 照品+流動相 頭孢呋辛酯2-異構體。2）系統適用性試驗：各異構體之間的R1.5，以 頭孢呋辛酯A異構體計算n1500。藥物分析A抗生素類藥物分析 3）異構體： tR1 相對保留時間 r12=- 1-被測物 tR2 2-標準物異構體 相對保留時間 判斷B異構體 0.85 供試液譜圖中A異構體的峰面積A異構體 1.0 與A、B異構體峰面積和之比應 為0.480.55。 藥物分析A抗生素類藥物分析3.頭孢氨芐中有關物質的檢查-反相TLC法 固定相：活化后的硅膠G板置5%（V/V）正十四 烷的正己烷溶液中，展至頂部，涼干 展開劑：0.1mol/L枸櫞酸-0.2mol/L磷酸氫二 鈉-丙酮（120：80：3） 供試液：本品 50mg/ml 對照液（1）：本品 0.5 mg/ml 對照液（2）：-苯甘氨酸 0.