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1、(1 1)BradfordBradford顯色法顯色法 考馬斯亮藍考馬斯亮藍G250G250(CoomassieCoomassie brilliant blue brilliant blue)與蛋與蛋白質中的堿性氨基酸和芳香族氨基酸殘基結合,使溶液呈白質中的堿性氨基酸和芳香族氨基酸殘基結合,使溶液呈藍色藍色。此時此時蛋白質蛋白質-色素結合物在色素結合物在595nm波長波長下有最大光吸收。下有最大光吸收。此法靈敏度比酚試此法靈敏度比酚試劑法高劑法高4 4倍,常用于快速定量分析。倍,常用于快速定量分析。 考馬斯亮藍考馬斯亮藍G-250(3 3)酚試劑呈色反應()酚試劑呈色反應(LowryLowry
2、法)法)蛋白質濃度降低蛋白質濃度降低如營養(yǎng)不良、肝臟疾患如營養(yǎng)不良、肝臟疾患 蛋白質濃度增高蛋白質濃度增高腎病綜合癥、嚴重脫水情況下腎病綜合癥、嚴重脫水情況下管管 號號0 01 12 23 34 4考馬斯亮藍考馬斯亮藍G-250 G-250 3ml 3ml 3ml 3ml 3ml 3ml 3ml 3ml 3ml 3ml 0.9% NaCl0.9% NaCl 100l 100l 對應加入倍比對應加入倍比稀釋的稀釋的蛋白標準液蛋白標準液 100l 100l 100l 100l 100l 100l 100l 100l 蛋白質終濃度蛋白質終濃度(gg) 0 012.512.525255050100100A A595nm595nm 取樣后充分混合,取樣后充分混合,放置放置2min2min后后, ,記錄記錄A A595nm595nm,并通過標準曲線,并通過標準曲
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