1、基因工程的基本操作程序基因工程的基本操作程序善假于物也善假于物也原核細(xì)胞的基因結(jié)構(gòu)原核細(xì)胞的基因結(jié)構(gòu)原核細(xì)胞的基因結(jié)構(gòu)原核細(xì)胞的基因結(jié)構(gòu)編碼區(qū)編碼區(qū)原核細(xì)胞的基因結(jié)構(gòu)原核細(xì)胞的基因結(jié)構(gòu)非編碼區(qū)非編碼區(qū)非編碼區(qū)非編碼區(qū)編碼區(qū)編碼區(qū)原核細(xì)胞的基因結(jié)構(gòu)原核細(xì)胞的基因結(jié)構(gòu)非編碼區(qū)非編碼區(qū)非編碼區(qū)非編碼區(qū)編碼區(qū)編碼區(qū)編碼區(qū)上游編碼區(qū)上游 原核細(xì)胞的基因結(jié)構(gòu)原核細(xì)胞的基因結(jié)構(gòu)非編碼區(qū)非編碼區(qū)非編碼區(qū)非編碼區(qū)編碼區(qū)編碼區(qū)編碼區(qū)上游編碼區(qū)上游 編碼區(qū)下游編碼區(qū)下游 原核細(xì)胞的基因結(jié)構(gòu)原核細(xì)胞的基因結(jié)構(gòu)非編碼區(qū)非編碼區(qū)非編碼區(qū)非編碼區(qū)編碼區(qū)編碼區(qū)編碼區(qū)上游編碼區(qū)上游 編碼區(qū)下游編碼區(qū)下游 啟動(dòng)子啟動(dòng)子原核細(xì)胞的

2、基因結(jié)構(gòu)原核細(xì)胞的基因結(jié)構(gòu)非編碼區(qū)非編碼區(qū)非編碼區(qū)非編碼區(qū)編碼區(qū)編碼區(qū)編碼區(qū)上游編碼區(qū)上游 編碼區(qū)下游編碼區(qū)下游 與與RNARNA聚合酶結(jié)合位點(diǎn)聚合酶結(jié)合位點(diǎn)啟動(dòng)子啟動(dòng)子原核細(xì)胞的基因結(jié)構(gòu)原核細(xì)胞的基因結(jié)構(gòu)非編碼區(qū)非編碼區(qū)非編碼區(qū)非編碼區(qū)編碼區(qū)編碼區(qū)編碼區(qū)上游編碼區(qū)上游 編碼區(qū)下游編碼區(qū)下游 與與RNARNA聚合酶結(jié)合位點(diǎn)聚合酶結(jié)合位點(diǎn)啟動(dòng)子啟動(dòng)子終止子終止子原原核核細(xì)細(xì)胞胞的的 基基因因結(jié)結(jié)構(gòu)構(gòu)編碼區(qū)編碼區(qū)：原原核核細(xì)細(xì)胞胞的的 基基因因結(jié)結(jié)構(gòu)構(gòu)編碼區(qū)編碼區(qū)：非編非編碼區(qū)碼區(qū)原原核核細(xì)細(xì)胞胞的的 基基因因結(jié)結(jié)構(gòu)構(gòu)編碼蛋白質(zhì)，連續(xù)不間斷編碼蛋白質(zhì)，連續(xù)不間斷編碼區(qū)編碼區(qū)：非編非編碼區(qū)碼區(qū)原原核

3、核細(xì)細(xì)胞胞的的 基基因因結(jié)結(jié)構(gòu)構(gòu)不編碼蛋白質(zhì)。不編碼蛋白質(zhì)。編碼蛋白質(zhì)，連續(xù)不間斷編碼蛋白質(zhì)，連續(xù)不間斷編碼區(qū)編碼區(qū)：非編非編碼區(qū)碼區(qū)原原核核細(xì)細(xì)胞胞的的 基基因因結(jié)結(jié)構(gòu)構(gòu)不編碼蛋白質(zhì)。不編碼蛋白質(zhì)。編碼蛋白質(zhì)，連續(xù)不間斷編碼蛋白質(zhì)，連續(xù)不間斷編碼區(qū)編碼區(qū)：非編非編碼區(qū)碼區(qū)原原核核細(xì)細(xì)胞胞的的 基基因因結(jié)結(jié)構(gòu)構(gòu)調(diào)控遺傳信息表達(dá)調(diào)控遺傳信息表達(dá), ,上上游的游的RNARNA聚合酶結(jié)合位點(diǎn)聚合酶結(jié)合位點(diǎn)真核細(xì)胞的基因結(jié)構(gòu)真核細(xì)胞的基因結(jié)構(gòu)真核細(xì)胞的基因結(jié)構(gòu)真核細(xì)胞的基因結(jié)構(gòu)非編碼區(qū)非編碼區(qū)非編碼區(qū)非編碼區(qū)真核細(xì)胞的基因結(jié)構(gòu)真核細(xì)胞的基因結(jié)構(gòu)編碼區(qū)編碼區(qū)非編碼區(qū)非編碼區(qū)非編碼區(qū)非編碼區(qū)真核細(xì)胞的基因

4、結(jié)構(gòu)真核細(xì)胞的基因結(jié)構(gòu)編碼區(qū)編碼區(qū)非編碼區(qū)非編碼區(qū)非編碼區(qū)非編碼區(qū)編碼區(qū)上游編碼區(qū)上游 真核細(xì)胞的基因結(jié)構(gòu)真核細(xì)胞的基因結(jié)構(gòu)編碼區(qū)編碼區(qū)非編碼區(qū)非編碼區(qū)非編碼區(qū)非編碼區(qū)與與RNARNA聚合酶聚合酶結(jié)合位點(diǎn)結(jié)合位點(diǎn)啟動(dòng)子啟動(dòng)子編碼區(qū)上游編碼區(qū)上游 真核細(xì)胞的基因結(jié)構(gòu)真核細(xì)胞的基因結(jié)構(gòu)編碼區(qū)編碼區(qū)非編碼區(qū)非編碼區(qū)非編碼區(qū)非編碼區(qū)與與RNARNA聚合酶聚合酶結(jié)合位點(diǎn)結(jié)合位點(diǎn)啟動(dòng)子啟動(dòng)子編碼區(qū)上游編碼區(qū)上游 編碼區(qū)下游編碼區(qū)下游 真核細(xì)胞的基因結(jié)構(gòu)真核細(xì)胞的基因結(jié)構(gòu)編碼區(qū)編碼區(qū)非編碼區(qū)非編碼區(qū)非編碼區(qū)非編碼區(qū)與與RNARNA聚合酶聚合酶結(jié)合位點(diǎn)結(jié)合位點(diǎn)啟動(dòng)子啟動(dòng)子終止子終止子編碼區(qū)上游編碼區(qū)上游 編碼

5、區(qū)下游編碼區(qū)下游 真核細(xì)胞的基因結(jié)構(gòu)真核細(xì)胞的基因結(jié)構(gòu)編碼區(qū)編碼區(qū)非編碼區(qū)非編碼區(qū)非編碼區(qū)非編碼區(qū)與與RNARNA聚合酶聚合酶結(jié)合位點(diǎn)結(jié)合位點(diǎn)啟動(dòng)子啟動(dòng)子終止子終止子編碼區(qū)上游編碼區(qū)上游 編碼區(qū)下游編碼區(qū)下游 外顯子外顯子 真核細(xì)胞的基因結(jié)構(gòu)真核細(xì)胞的基因結(jié)構(gòu)編碼區(qū)編碼區(qū)非編碼區(qū)非編碼區(qū)非編碼區(qū)非編碼區(qū)與與RNARNA聚合酶聚合酶結(jié)合位點(diǎn)結(jié)合位點(diǎn)啟動(dòng)子啟動(dòng)子終止子終止子編碼區(qū)上游編碼區(qū)上游 編碼區(qū)下游編碼區(qū)下游 內(nèi)含子內(nèi)含子 外顯子外顯子 真真核核細(xì)細(xì)胞胞的的 基基因因結(jié)結(jié)構(gòu)構(gòu)真真核核細(xì)細(xì)胞胞的的 基基因因結(jié)結(jié)構(gòu)構(gòu)編碼區(qū)編碼區(qū)真真核核細(xì)細(xì)胞胞的的 基基因因結(jié)結(jié)構(gòu)構(gòu)編碼區(qū)編碼區(qū)非編碼區(qū)：非編碼區(qū)

6、：真真核核細(xì)細(xì)胞胞的的 基基因因結(jié)結(jié)構(gòu)構(gòu)編碼區(qū)編碼區(qū)非編碼區(qū)：非編碼區(qū)：外顯子：能編碼蛋白質(zhì)的外顯子：能編碼蛋白質(zhì)的 序列序列內(nèi)含子：不能編碼蛋白質(zhì)內(nèi)含子：不能編碼蛋白質(zhì) 的序列的序列真真核核細(xì)細(xì)胞胞的的 基基因因結(jié)結(jié)構(gòu)構(gòu)編碼區(qū)編碼區(qū)非編碼區(qū)：非編碼區(qū)：外顯子：能編碼蛋白質(zhì)的外顯子：能編碼蛋白質(zhì)的 序列序列內(nèi)含子：不能編碼蛋白質(zhì)內(nèi)含子：不能編碼蛋白質(zhì) 的序列的序列有調(diào)控作用，上游有有調(diào)控作用，上游有RNARNA聚聚合酶結(jié)合位點(diǎn)合酶結(jié)合位點(diǎn)( (啟動(dòng)子啟動(dòng)子) )。真真核核細(xì)細(xì)胞胞的的 基基因因結(jié)結(jié)構(gòu)構(gòu)編碼區(qū)編碼區(qū)非編碼區(qū)：非編碼區(qū)：外顯子：能編碼蛋白質(zhì)的外顯子：能編碼蛋白質(zhì)的 序列序列內(nèi)含子：

7、不能編碼蛋白質(zhì)內(nèi)含子：不能編碼蛋白質(zhì) 的序列的序列有調(diào)控作用，上游有有調(diào)控作用，上游有RNARNA聚聚合酶結(jié)合位點(diǎn)合酶結(jié)合位點(diǎn)( (啟動(dòng)子啟動(dòng)子) )。非編碼序列：非編碼序列：真真核核細(xì)細(xì)胞胞的的 基基因因結(jié)結(jié)構(gòu)構(gòu)編碼區(qū)編碼區(qū)非編碼區(qū)：非編碼區(qū)：外顯子：能編碼蛋白質(zhì)的外顯子：能編碼蛋白質(zhì)的 序列序列內(nèi)含子：不能編碼蛋白質(zhì)內(nèi)含子：不能編碼蛋白質(zhì) 的序列的序列有調(diào)控作用，上游有有調(diào)控作用，上游有RNARNA聚聚合酶結(jié)合位點(diǎn)合酶結(jié)合位點(diǎn)( (啟動(dòng)子啟動(dòng)子) )。非編碼序列：非編碼序列： 包括非編碼區(qū)和內(nèi)含子包括非編碼區(qū)和內(nèi)含子非編碼區(qū)非編碼區(qū)非編碼區(qū)非編碼區(qū)編碼區(qū)編碼區(qū)RNA聚合酶聚合酶結(jié)合位點(diǎn)結(jié)合

8、位點(diǎn)外顯子外顯子內(nèi)含子內(nèi)含子終止子終止子啟動(dòng)子啟動(dòng)子原原核核真真核核基因的結(jié)構(gòu)基因的結(jié)構(gòu)1. 下列關(guān)于基因結(jié)構(gòu)的認(rèn)識(shí)中，正下列關(guān)于基因結(jié)構(gòu)的認(rèn)識(shí)中，正確的是確的是 （ ）A. 大豆基因中內(nèi)含子是能夠編碼蛋大豆基因中內(nèi)含子是能夠編碼蛋白質(zhì)的序列白質(zhì)的序列B. 乳酸菌與酵母菌基因結(jié)構(gòu)中都存乳酸菌與酵母菌基因結(jié)構(gòu)中都存在外顯子和內(nèi)含子在外顯子和內(nèi)含子C. 大腸桿菌基因與大腸桿菌基因與RNA聚合酶結(jié)合聚合酶結(jié)合位點(diǎn)位于編碼區(qū)的下游位點(diǎn)位于編碼區(qū)的下游D. 水稻細(xì)胞基因的編碼區(qū)中存在非水稻細(xì)胞基因的編碼區(qū)中存在非編碼序列編碼序列1. 下列關(guān)于基因結(jié)構(gòu)的認(rèn)識(shí)中，正下列關(guān)于基因結(jié)構(gòu)的認(rèn)識(shí)中，正確的是確的是

9、（ ）A. 大豆基因中內(nèi)含子是能夠編碼蛋大豆基因中內(nèi)含子是能夠編碼蛋白質(zhì)的序列白質(zhì)的序列B. 乳酸菌與酵母菌基因結(jié)構(gòu)中都存乳酸菌與酵母菌基因結(jié)構(gòu)中都存在外顯子和內(nèi)含子在外顯子和內(nèi)含子C. 大腸桿菌基因與大腸桿菌基因與RNA聚合酶結(jié)合聚合酶結(jié)合位點(diǎn)位于編碼區(qū)的下游位點(diǎn)位于編碼區(qū)的下游D. 水稻細(xì)胞基因的編碼區(qū)中存在非水稻細(xì)胞基因的編碼區(qū)中存在非編碼序列編碼序列2.(多選多選)原核細(xì)胞與真核細(xì)胞基因結(jié)原核細(xì)胞與真核細(xì)胞基因結(jié)構(gòu)的共同特點(diǎn)是構(gòu)的共同特點(diǎn)是 （ ）A. 編碼區(qū)都有能編碼蛋白質(zhì)的序列編碼區(qū)都有能編碼蛋白質(zhì)的序列B. 編碼區(qū)都是連續(xù)的編碼區(qū)都是連續(xù)的C. 非編碼區(qū)都能調(diào)控遺傳信息的表達(dá)非編

10、碼區(qū)都能調(diào)控遺傳信息的表達(dá)D. 非編碼區(qū)都有非編碼區(qū)都有RNA聚合酶結(jié)合的聚合酶結(jié)合的位點(diǎn)位點(diǎn)2.(多選多選)原核細(xì)胞與真核細(xì)胞基因結(jié)原核細(xì)胞與真核細(xì)胞基因結(jié)構(gòu)的共同特點(diǎn)是構(gòu)的共同特點(diǎn)是 （ ）A. 編碼區(qū)都有能編碼蛋白質(zhì)的序列編碼區(qū)都有能編碼蛋白質(zhì)的序列B. 編碼區(qū)都是連續(xù)的編碼區(qū)都是連續(xù)的C. 非編碼區(qū)都能調(diào)控遺傳信息的表達(dá)非編碼區(qū)都能調(diào)控遺傳信息的表達(dá)D. 非編碼區(qū)都有非編碼區(qū)都有RNA聚合酶結(jié)合的聚合酶結(jié)合的位點(diǎn)位點(diǎn)基因工程的操作四個(gè)步驟：基因工程的操作四個(gè)步驟：1、提出目的基因、提出目的基因2、基因表達(dá)載體的構(gòu)建、基因表達(dá)載體的構(gòu)建3、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞4

11、、目的基因的檢測(cè)與鑒定、目的基因的檢測(cè)與鑒定一、提取目的基因一、提取目的基因1. 目的基因主要是指目的基因主要是指_2. 獲取目的基因的常用方法獲取目的基因的常用方法一、提取目的基因一、提取目的基因1. 目的基因主要是指目的基因主要是指_編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因2. 獲取目的基因的常用方法獲取目的基因的常用方法一、提取目的基因一、提取目的基因1. 目的基因主要是指目的基因主要是指_編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因2. 獲取目的基因的常用方法獲取目的基因的常用方法（1）從基因文庫(kù)中獲取）從基因文庫(kù)中獲取一、提取目的基因一、提取目的基因1. 目的基因主要是指目的基因主要是指

12、_編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因2. 獲取目的基因的常用方法獲取目的基因的常用方法（1）從基因文庫(kù)中獲取）從基因文庫(kù)中獲取（2）利用）利用PCR技術(shù)擴(kuò)增技術(shù)擴(kuò)增一、提取目的基因一、提取目的基因1. 目的基因主要是指目的基因主要是指_編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因2. 獲取目的基因的常用方法獲取目的基因的常用方法（1）從基因文庫(kù)中獲取）從基因文庫(kù)中獲取（2）利用）利用PCR技術(shù)擴(kuò)增技術(shù)擴(kuò)增（3）人工合成）人工合成1. 基因文庫(kù)基因文庫(kù)( (一一) )從基因文庫(kù)中獲取目的基因從基因文庫(kù)中獲取目的基因1. 基因文庫(kù)基因文庫(kù)( (一一) )從基因文庫(kù)中獲取目的基因從基因文庫(kù)中獲取目

13、的基因?qū)⒑心撤N生物不同基因的許多將含有某種生物不同基因的許多DNA片斷，導(dǎo)入到受體菌的群體中，各片斷，導(dǎo)入到受體菌的群體中，各個(gè)受體菌分別含有這種生物的不同基因，個(gè)受體菌分別含有這種生物的不同基因，稱為基因文庫(kù)稱為基因文庫(kù)基因文庫(kù)基因文庫(kù) 基因組文庫(kù)基因組文庫(kù)部分基因文庫(kù)部分基因文庫(kù)（如（如:cDNA文庫(kù)）文庫(kù)）1. 基因文庫(kù)基因文庫(kù)( (一一) )從基因文庫(kù)中獲取目的基因從基因文庫(kù)中獲取目的基因?qū)⒑心撤N生物不同基因的許多將含有某種生物不同基因的許多DNA片斷，導(dǎo)入到受體菌的群體中，各片斷，導(dǎo)入到受體菌的群體中，各個(gè)受體菌分別含有這種生物的不同基因，個(gè)受體菌分別含有這種生物的不同基因，稱為

14、基因文庫(kù)稱為基因文庫(kù)基因組基因組文庫(kù)與文庫(kù)與部分基部分基因文庫(kù)因文庫(kù)的關(guān)系的關(guān)系基因組基因組DNADNA文庫(kù)的構(gòu)建文庫(kù)的構(gòu)建鳥槍法：鳥槍法： ( (直接分離法直接分離法) )該法最大的缺點(diǎn)是帶有很大的該法最大的缺點(diǎn)是帶有很大的盲目性，工作量大，成功率低。且盲目性，工作量大，成功率低。且不能將真核生物的基因轉(zhuǎn)移到原核不能將真核生物的基因轉(zhuǎn)移到原核生物中去。生物中去。鳥槍法：鳥槍法： ( (直接分離法直接分離法) )鳥槍法：鳥槍法：( (直接分離法直接分離法) )2. 構(gòu)建基因文庫(kù)構(gòu)建基因文庫(kù)鳥槍法：鳥槍法：供體細(xì)胞中的供體細(xì)胞中的DNADNA( (直接分離法直接分離法) )2. 構(gòu)建基因文庫(kù)構(gòu)建

15、基因文庫(kù)鳥槍法：鳥槍法：供體細(xì)胞中的供體細(xì)胞中的DNADNA限制酶限制酶( (直接分離法直接分離法) )2. 構(gòu)建基因文庫(kù)構(gòu)建基因文庫(kù)鳥槍法：鳥槍法：供體細(xì)胞中的供體細(xì)胞中的DNADNA許多許多DNADNA片段片段限制酶限制酶( (直接分離法直接分離法) )2. 構(gòu)建基因文庫(kù)構(gòu)建基因文庫(kù)鳥槍法：鳥槍法：供體細(xì)胞中的供體細(xì)胞中的DNADNA許多許多DNADNA片段片段限制酶限制酶分別與運(yùn)分別與運(yùn) 載體連接載體連接( (直接分離法直接分離法) )2. 構(gòu)建基因文庫(kù)構(gòu)建基因文庫(kù)鳥槍法：鳥槍法：供體細(xì)胞中的供體細(xì)胞中的DNADNA許多許多DNADNA片段片段運(yùn)載體運(yùn)載體限制酶限制酶分別與運(yùn)分別與運(yùn) 載

16、體連接載體連接( (直接分離法直接分離法) )2. 構(gòu)建基因文庫(kù)構(gòu)建基因文庫(kù)鳥槍法：鳥槍法：供體細(xì)胞中的供體細(xì)胞中的DNADNA許多許多DNADNA片段片段運(yùn)載體運(yùn)載體限制酶限制酶分別與運(yùn)分別與運(yùn) 載體連接載體連接分別分別 導(dǎo)入導(dǎo)入( (直接分離法直接分離法) )2. 構(gòu)建基因文庫(kù)構(gòu)建基因文庫(kù)鳥槍法：鳥槍法：供體細(xì)胞中的供體細(xì)胞中的DNADNA許多許多DNADNA片段片段運(yùn)載體運(yùn)載體限制酶限制酶分別與運(yùn)分別與運(yùn) 載體連接載體連接受體細(xì)胞受體細(xì)胞分別分別 導(dǎo)入導(dǎo)入( (直接分離法直接分離法) )2. 構(gòu)建基因文庫(kù)構(gòu)建基因文庫(kù)鳥槍法：鳥槍法：供體細(xì)胞中的供體細(xì)胞中的DNADNA許多許多DNADNA

17、片段片段運(yùn)載體運(yùn)載體限制酶限制酶分別與運(yùn)分別與運(yùn) 載體連接載體連接受體細(xì)胞受體細(xì)胞分別分別 導(dǎo)入導(dǎo)入外源外源DNADNA擴(kuò)增擴(kuò)增( (直接分離法直接分離法) )2. 構(gòu)建基因文庫(kù)構(gòu)建基因文庫(kù)鳥槍法：鳥槍法：供體細(xì)胞中的供體細(xì)胞中的DNADNA許多許多DNADNA片段片段運(yùn)載體運(yùn)載體限制酶限制酶分別與運(yùn)分別與運(yùn) 載體連接載體連接受體細(xì)胞受體細(xì)胞產(chǎn)生特定性狀產(chǎn)生特定性狀分別分別 導(dǎo)入導(dǎo)入外源外源DNADNA擴(kuò)增擴(kuò)增( (直接分離法直接分離法) )2. 構(gòu)建基因文庫(kù)構(gòu)建基因文庫(kù)鳥槍法：鳥槍法：供體細(xì)胞中的供體細(xì)胞中的DNADNA許多許多DNADNA片段片段運(yùn)載體運(yùn)載體限制酶限制酶分別與運(yùn)分別與運(yùn) 載

18、體連接載體連接受體細(xì)胞受體細(xì)胞產(chǎn)生特定性狀產(chǎn)生特定性狀分別分別 導(dǎo)入導(dǎo)入外源外源DNADNA擴(kuò)增擴(kuò)增分離分離( (直接分離法直接分離法) )2. 構(gòu)建基因文庫(kù)構(gòu)建基因文庫(kù)鳥槍法：鳥槍法：供體細(xì)胞中的供體細(xì)胞中的DNADNA許多許多DNADNA片段片段運(yùn)載體運(yùn)載體限制酶限制酶分別與運(yùn)分別與運(yùn) 載體連接載體連接受體細(xì)胞受體細(xì)胞產(chǎn)生特定性狀產(chǎn)生特定性狀分別分別 導(dǎo)入導(dǎo)入外源外源DNADNA擴(kuò)增擴(kuò)增目的基因目的基因分離分離( (直接分離法直接分離法) )2. 構(gòu)建基因文庫(kù)構(gòu)建基因文庫(kù)反轉(zhuǎn)錄法：反轉(zhuǎn)錄法：2. 構(gòu)建基因文庫(kù)構(gòu)建基因文庫(kù)反轉(zhuǎn)錄法：反轉(zhuǎn)錄法：基因重組基因重組反轉(zhuǎn)錄酶反轉(zhuǎn)錄酶mRNAcDNA2

19、. 構(gòu)建基因文庫(kù)構(gòu)建基因文庫(kù)mRNA 反轉(zhuǎn)錄反轉(zhuǎn)錄cDNA(互補(bǔ)互補(bǔ)DNA） DNA聚合酶聚合酶雙鏈雙鏈DNA反轉(zhuǎn)錄法：反轉(zhuǎn)錄法：基因重組基因重組反轉(zhuǎn)錄酶反轉(zhuǎn)錄酶mRNAcDNA2. 構(gòu)建基因文庫(kù)構(gòu)建基因文庫(kù)基因組基因組DNADNA文庫(kù)文庫(kù)cDNAcDNA文庫(kù)文庫(kù)基因組基因組DNA文庫(kù)與文庫(kù)與cDNA文庫(kù)的比較文庫(kù)的比較根據(jù)已知的氨基酸序列合成根據(jù)已知的氨基酸序列合成DNA法：法：根據(jù)已知的氨基酸序列合成根據(jù)已知的氨基酸序列合成DNA法：法：根據(jù)已知蛋白質(zhì)根據(jù)已知蛋白質(zhì)的氨基酸序列，推測(cè)的氨基酸序列，推測(cè)出相應(yīng)的信使出相應(yīng)的信使RNA序序列，然后按照堿基互列，然后按照堿基互補(bǔ)配對(duì)原則，推測(cè)出補(bǔ)

20、配對(duì)原則，推測(cè)出它的結(jié)構(gòu)基因的核苷它的結(jié)構(gòu)基因的核苷酸序列，再通過(guò)化學(xué)酸序列，再通過(guò)化學(xué)方法，以單核苷酸為方法，以單核苷酸為原料合成目的基因。原料合成目的基因。根據(jù)已知的氨基酸序列合成根據(jù)已知的氨基酸序列合成DNA法：法：根據(jù)已知蛋白質(zhì)根據(jù)已知蛋白質(zhì)的氨基酸序列，推測(cè)的氨基酸序列，推測(cè)出相應(yīng)的信使出相應(yīng)的信使RNA序序列，然后按照堿基互列，然后按照堿基互補(bǔ)配對(duì)原則，推測(cè)出補(bǔ)配對(duì)原則，推測(cè)出它的結(jié)構(gòu)基因的核苷它的結(jié)構(gòu)基因的核苷酸序列，再通過(guò)化學(xué)酸序列，再通過(guò)化學(xué)方法，以單核苷酸為方法，以單核苷酸為原料合成目的基因。原料合成目的基因。蛋白質(zhì)的氨基酸序列蛋白質(zhì)的氨基酸序列根據(jù)已知的氨基酸序列合成根據(jù)

21、已知的氨基酸序列合成DNA法：法：根據(jù)已知蛋白質(zhì)根據(jù)已知蛋白質(zhì)的氨基酸序列，推測(cè)的氨基酸序列，推測(cè)出相應(yīng)的信使出相應(yīng)的信使RNA序序列，然后按照堿基互列，然后按照堿基互補(bǔ)配對(duì)原則，推測(cè)出補(bǔ)配對(duì)原則，推測(cè)出它的結(jié)構(gòu)基因的核苷它的結(jié)構(gòu)基因的核苷酸序列，再通過(guò)化學(xué)酸序列，再通過(guò)化學(xué)方法，以單核苷酸為方法，以單核苷酸為原料合成目的基因。原料合成目的基因。蛋白質(zhì)的氨基酸序列蛋白質(zhì)的氨基酸序列推測(cè)推測(cè)根據(jù)已知的氨基酸序列合成根據(jù)已知的氨基酸序列合成DNA法：法：根據(jù)已知蛋白質(zhì)根據(jù)已知蛋白質(zhì)的氨基酸序列，推測(cè)的氨基酸序列，推測(cè)出相應(yīng)的信使出相應(yīng)的信使RNA序序列，然后按照堿基互列，然后按照堿基互補(bǔ)配對(duì)原則，

22、推測(cè)出補(bǔ)配對(duì)原則，推測(cè)出它的結(jié)構(gòu)基因的核苷它的結(jié)構(gòu)基因的核苷酸序列，再通過(guò)化學(xué)酸序列，再通過(guò)化學(xué)方法，以單核苷酸為方法，以單核苷酸為原料合成目的基因。原料合成目的基因。蛋白質(zhì)的氨基酸序列蛋白質(zhì)的氨基酸序列mRNA的核苷酸序列的核苷酸序列推測(cè)推測(cè)根據(jù)已知的氨基酸序列合成根據(jù)已知的氨基酸序列合成DNA法：法：根據(jù)已知蛋白質(zhì)根據(jù)已知蛋白質(zhì)的氨基酸序列，推測(cè)的氨基酸序列，推測(cè)出相應(yīng)的信使出相應(yīng)的信使RNA序序列，然后按照堿基互列，然后按照堿基互補(bǔ)配對(duì)原則，推測(cè)出補(bǔ)配對(duì)原則，推測(cè)出它的結(jié)構(gòu)基因的核苷它的結(jié)構(gòu)基因的核苷酸序列，再通過(guò)化學(xué)酸序列，再通過(guò)化學(xué)方法，以單核苷酸為方法，以單核苷酸為原料合成目的基因

23、。原料合成目的基因。蛋白質(zhì)的氨基酸序列蛋白質(zhì)的氨基酸序列mRNA的核苷酸序列的核苷酸序列推測(cè)推測(cè)推測(cè)推測(cè)根據(jù)已知的氨基酸序列合成根據(jù)已知的氨基酸序列合成DNA法：法：根據(jù)已知蛋白質(zhì)根據(jù)已知蛋白質(zhì)的氨基酸序列，推測(cè)的氨基酸序列，推測(cè)出相應(yīng)的信使出相應(yīng)的信使RNA序序列，然后按照堿基互列，然后按照堿基互補(bǔ)配對(duì)原則，推測(cè)出補(bǔ)配對(duì)原則，推測(cè)出它的結(jié)構(gòu)基因的核苷它的結(jié)構(gòu)基因的核苷酸序列，再通過(guò)化學(xué)酸序列，再通過(guò)化學(xué)方法，以單核苷酸為方法，以單核苷酸為原料合成目的基因。原料合成目的基因。蛋白質(zhì)的氨基酸序列蛋白質(zhì)的氨基酸序列mRNA的核苷酸序列的核苷酸序列結(jié)構(gòu)基因的核苷酸序列結(jié)構(gòu)基因的核苷酸序列推測(cè)推測(cè)推測(cè)

24、推測(cè)根據(jù)已知的氨基酸序列合成根據(jù)已知的氨基酸序列合成DNA法：法：根據(jù)已知蛋白質(zhì)根據(jù)已知蛋白質(zhì)的氨基酸序列，推測(cè)的氨基酸序列，推測(cè)出相應(yīng)的信使出相應(yīng)的信使RNA序序列，然后按照堿基互列，然后按照堿基互補(bǔ)配對(duì)原則，推測(cè)出補(bǔ)配對(duì)原則，推測(cè)出它的結(jié)構(gòu)基因的核苷它的結(jié)構(gòu)基因的核苷酸序列，再通過(guò)化學(xué)酸序列，再通過(guò)化學(xué)方法，以單核苷酸為方法，以單核苷酸為原料合成目的基因。原料合成目的基因。蛋白質(zhì)的氨基酸序列蛋白質(zhì)的氨基酸序列mRNA的核苷酸序列的核苷酸序列結(jié)構(gòu)基因的核苷酸序列結(jié)構(gòu)基因的核苷酸序列推測(cè)推測(cè)推測(cè)推測(cè)化學(xué)合成化學(xué)合成根據(jù)已知的氨基酸序列合成根據(jù)已知的氨基酸序列合成DNA法：法：根據(jù)已知蛋白質(zhì)根據(jù)

25、已知蛋白質(zhì)的氨基酸序列，推測(cè)的氨基酸序列，推測(cè)出相應(yīng)的信使出相應(yīng)的信使RNA序序列，然后按照堿基互列，然后按照堿基互補(bǔ)配對(duì)原則，推測(cè)出補(bǔ)配對(duì)原則，推測(cè)出它的結(jié)構(gòu)基因的核苷它的結(jié)構(gòu)基因的核苷酸序列，再通過(guò)化學(xué)酸序列，再通過(guò)化學(xué)方法，以單核苷酸為方法，以單核苷酸為原料合成目的基因。原料合成目的基因。蛋白質(zhì)的氨基酸序列蛋白質(zhì)的氨基酸序列mRNA的核苷酸序列的核苷酸序列結(jié)構(gòu)基因的核苷酸序列結(jié)構(gòu)基因的核苷酸序列推測(cè)推測(cè)推測(cè)推測(cè)目的基因目的基因化學(xué)合成化學(xué)合成上述三種目的基因提取的方法有何上述三種目的基因提取的方法有何優(yōu)缺點(diǎn)優(yōu)缺點(diǎn)？?jī)?yōu)點(diǎn)優(yōu)點(diǎn)缺點(diǎn)缺點(diǎn)鳥槍法鳥槍法反轉(zhuǎn)錄法反轉(zhuǎn)錄法根據(jù)已知氨基根據(jù)已知氨基酸合成

26、酸合成DNADNA法法上述三種目的基因提取的方法有何上述三種目的基因提取的方法有何優(yōu)缺點(diǎn)優(yōu)缺點(diǎn)？?jī)?yōu)點(diǎn)優(yōu)點(diǎn)缺點(diǎn)缺點(diǎn)鳥槍法鳥槍法反轉(zhuǎn)錄法反轉(zhuǎn)錄法根據(jù)已知氨基根據(jù)已知氨基酸合成酸合成DNADNA法法操作簡(jiǎn)便操作簡(jiǎn)便廣泛使用廣泛使用上述三種目的基因提取的方法有何上述三種目的基因提取的方法有何優(yōu)缺點(diǎn)優(yōu)缺點(diǎn)？?jī)?yōu)點(diǎn)優(yōu)點(diǎn)缺點(diǎn)缺點(diǎn)鳥槍法鳥槍法反轉(zhuǎn)錄法反轉(zhuǎn)錄法根據(jù)已知氨基根據(jù)已知氨基酸合成酸合成DNADNA法法操作簡(jiǎn)便操作簡(jiǎn)便廣泛使用廣泛使用工作量大，盲目，工作量大，盲目，分離出來(lái)的有時(shí)并分離出來(lái)的有時(shí)并非一個(gè)基因非一個(gè)基因上述三種目的基因提取的方法有何上述三種目的基因提取的方法有何優(yōu)缺點(diǎn)優(yōu)缺點(diǎn)？?jī)?yōu)點(diǎn)優(yōu)點(diǎn)缺點(diǎn)缺點(diǎn)

27、鳥槍法鳥槍法反轉(zhuǎn)錄法反轉(zhuǎn)錄法根據(jù)已知氨基根據(jù)已知氨基酸合成酸合成DNADNA法法操作簡(jiǎn)便操作簡(jiǎn)便廣泛使用廣泛使用工作量大，盲目，工作量大，盲目，分離出來(lái)的有時(shí)并分離出來(lái)的有時(shí)并非一個(gè)基因非一個(gè)基因?qū)Ｒ恍詮?qiáng)專一性強(qiáng)上述三種目的基因提取的方法有何上述三種目的基因提取的方法有何優(yōu)缺點(diǎn)優(yōu)缺點(diǎn)？?jī)?yōu)點(diǎn)優(yōu)點(diǎn)缺點(diǎn)缺點(diǎn)鳥槍法鳥槍法反轉(zhuǎn)錄法反轉(zhuǎn)錄法根據(jù)已知氨基根據(jù)已知氨基酸合成酸合成DNADNA法法操作簡(jiǎn)便操作簡(jiǎn)便廣泛使用廣泛使用工作量大，盲目，工作量大，盲目，分離出來(lái)的有時(shí)并分離出來(lái)的有時(shí)并非一個(gè)基因非一個(gè)基因?qū)Ｒ恍詮?qiáng)專一性強(qiáng)操作過(guò)程麻煩，操作過(guò)程麻煩，mRNA很不穩(wěn)定，要很不穩(wěn)定，要求的技術(shù)條件較高求的技術(shù)條

28、件較高上述三種目的基因提取的方法有何上述三種目的基因提取的方法有何優(yōu)缺點(diǎn)優(yōu)缺點(diǎn)？?jī)?yōu)點(diǎn)優(yōu)點(diǎn)缺點(diǎn)缺點(diǎn)鳥槍法鳥槍法反轉(zhuǎn)錄法反轉(zhuǎn)錄法根據(jù)已知氨基根據(jù)已知氨基酸合成酸合成DNADNA法法操作簡(jiǎn)便操作簡(jiǎn)便廣泛使用廣泛使用工作量大，盲目，工作量大，盲目，分離出來(lái)的有時(shí)并分離出來(lái)的有時(shí)并非一個(gè)基因非一個(gè)基因?qū)Ｒ恍詮?qiáng)專一性強(qiáng)操作過(guò)程麻煩，操作過(guò)程麻煩，mRNA很不穩(wěn)定，要很不穩(wěn)定，要求的技術(shù)條件較高求的技術(shù)條件較高專一性最強(qiáng)專一性最強(qiáng)上述三種目的基因提取的方法有何上述三種目的基因提取的方法有何優(yōu)缺點(diǎn)優(yōu)缺點(diǎn)？?jī)?yōu)點(diǎn)優(yōu)點(diǎn)缺點(diǎn)缺點(diǎn)鳥槍法鳥槍法反轉(zhuǎn)錄法反轉(zhuǎn)錄法根據(jù)已知氨基根據(jù)已知氨基酸合成酸合成DNADNA法法操作簡(jiǎn)便操

29、作簡(jiǎn)便廣泛使用廣泛使用工作量大，盲目，工作量大，盲目，分離出來(lái)的有時(shí)并分離出來(lái)的有時(shí)并非一個(gè)基因非一個(gè)基因?qū)Ｒ恍詮?qiáng)專一性強(qiáng)操作過(guò)程麻煩，操作過(guò)程麻煩，mRNA很不穩(wěn)定，要很不穩(wěn)定，要求的技術(shù)條件較高求的技術(shù)條件較高專一性最強(qiáng)專一性最強(qiáng)僅限于合成核苷酸僅限于合成核苷酸對(duì)較少的簡(jiǎn)單基因?qū)^少的簡(jiǎn)單基因(3)如何從基因文庫(kù)中得到所需要的基因？如何從基因文庫(kù)中得到所需要的基因？(3)如何從基因文庫(kù)中得到所需要的基因？如何從基因文庫(kù)中得到所需要的基因？依據(jù)：目的基因的有關(guān)信息。依據(jù)：目的基因的有關(guān)信息。(3)如何從基因文庫(kù)中得到所需要的基因？如何從基因文庫(kù)中得到所需要的基因？依據(jù)：目的基因的有關(guān)信息。依

30、據(jù)：目的基因的有關(guān)信息。如：根據(jù)如：根據(jù)基因的核苷酸序列基因的核苷酸序列基因的功能基因在染色體上的位置基因的功能基因在染色體上的位置基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物mRNAmRNA基因翻譯產(chǎn)物蛋白質(zhì)基因翻譯產(chǎn)物蛋白質(zhì) 等特性。等特性。1. 構(gòu)建基因組構(gòu)建基因組DNA文庫(kù)時(shí)，首先應(yīng)分文庫(kù)時(shí)，首先應(yīng)分離細(xì)胞的離細(xì)胞的( )A. 染色體染色體DNA B. 線粒體線粒體DNAC. 總總mRNA D. tRNA 1. 構(gòu)建基因組構(gòu)建基因組DNA文庫(kù)時(shí)，首先應(yīng)分文庫(kù)時(shí)，首先應(yīng)分離細(xì)胞的離細(xì)胞的( )A. 染色體染色體DNA B. 線粒體線粒體DNAC. 總總mRNA D. tRNA 2. 目的基因可從基因文庫(kù)

31、中獲得，目的基因可從基因文庫(kù)中獲得，下列有關(guān)基因文庫(kù)的描述正確的是下列有關(guān)基因文庫(kù)的描述正確的是A. 某生物的全套基因就是一個(gè)基因某生物的全套基因就是一個(gè)基因文庫(kù)文庫(kù)B. 將含有某種生物不同的許多將含有某種生物不同的許多DNA片段，導(dǎo)入某個(gè)生物片段，導(dǎo)入某個(gè)生物 體內(nèi)，則這個(gè)生物體內(nèi)，則這個(gè)生物就是一個(gè)基因文庫(kù)就是一個(gè)基因文庫(kù)C. 含有一種生物所有基因的基因文含有一種生物所有基因的基因文庫(kù)叫做基因組文庫(kù)庫(kù)叫做基因組文庫(kù)D. 含有一種生物的一部分基因的基含有一種生物的一部分基因的基因文庫(kù)叫因文庫(kù)叫cDNA文庫(kù)文庫(kù)2. 目的基因可從基因文庫(kù)中獲得，目的基因可從基因文庫(kù)中獲得，下列有關(guān)基因文庫(kù)的描述

32、正確的是下列有關(guān)基因文庫(kù)的描述正確的是A. 某生物的全套基因就是一個(gè)基因某生物的全套基因就是一個(gè)基因文庫(kù)文庫(kù)B. 將含有某種生物不同的許多將含有某種生物不同的許多DNA片段，導(dǎo)入某個(gè)生物片段，導(dǎo)入某個(gè)生物 體內(nèi)，則這個(gè)生物體內(nèi)，則這個(gè)生物就是一個(gè)基因文庫(kù)就是一個(gè)基因文庫(kù)C. 含有一種生物所有基因的基因文含有一種生物所有基因的基因文庫(kù)叫做基因組文庫(kù)庫(kù)叫做基因組文庫(kù)D. 含有一種生物的一部分基因的基含有一種生物的一部分基因的基因文庫(kù)叫因文庫(kù)叫cDNA文庫(kù)文庫(kù) 概念：概念：PCR全稱為全稱為_，是一項(xiàng)在生物是一項(xiàng)在生物_復(fù)制復(fù)制_的核酸合成技術(shù)。的核酸合成技術(shù)。 條件：條件：_(前提條件前提條件)_

33、、 _ 、_. 原理：原理：_( (二二) )利用利用PCRPCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因技術(shù)擴(kuò)增目的基因 概念：概念：PCR全稱為全稱為_，是一項(xiàng)在生物是一項(xiàng)在生物_復(fù)制復(fù)制_的核酸合成技術(shù)。的核酸合成技術(shù)。 條件：條件：_(前提條件前提條件)_、 _ 、_. 原理：原理：_聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)( (二二) )利用利用PCRPCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因技術(shù)擴(kuò)增目的基因 概念：概念：PCR全稱為全稱為_，是一項(xiàng)在生物是一項(xiàng)在生物_復(fù)制復(fù)制_的核酸合成技術(shù)。的核酸合成技術(shù)。 條件：條件：_(前提條件前提條件)_、 _ 、_. 原理：原理：_聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)體外體外( (二二) )利用利用P

34、CRPCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因技術(shù)擴(kuò)增目的基因 概念：概念：PCR全稱為全稱為_，是一項(xiàng)在生物是一項(xiàng)在生物_復(fù)制復(fù)制_的核酸合成技術(shù)。的核酸合成技術(shù)。 條件：條件：_(前提條件前提條件)_、 _ 、_. 原理：原理：_聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)體外體外特定特定DNA片段片段( (二二) )利用利用PCRPCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因技術(shù)擴(kuò)增目的基因 概念：概念：PCR全稱為全稱為_，是一項(xiàng)在生物是一項(xiàng)在生物_復(fù)制復(fù)制_的核酸合成技術(shù)。的核酸合成技術(shù)。 條件：條件：_(前提條件前提條件)_、 _ 、_. 原理：原理：_聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)體外體外特定特定DNA片段片段DNA復(fù)制復(fù)制( (二二) )

35、利用利用PCRPCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因技術(shù)擴(kuò)增目的基因 概念：概念：PCR全稱為全稱為_，是一項(xiàng)在生物是一項(xiàng)在生物_復(fù)制復(fù)制_的核酸合成技術(shù)。的核酸合成技術(shù)。 條件：條件：_(前提條件前提條件)_、 _ 、_. 原理：原理：_聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)體外體外特定特定DNA片段片段DNA復(fù)制復(fù)制一段已知目的基因的核苷酸序列一段已知目的基因的核苷酸序列( (二二) )利用利用PCRPCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因技術(shù)擴(kuò)增目的基因 概念：概念：PCR全稱為全稱為_，是一項(xiàng)在生物是一項(xiàng)在生物_復(fù)制復(fù)制_的核酸合成技術(shù)。的核酸合成技術(shù)。 條件：條件：_(前提條件前提條件)_、 _ 、_. 原理：原理：_聚合酶鏈

36、式反應(yīng)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)體外體外特定特定DNA片段片段DNA復(fù)制復(fù)制一段已知目的基因的核苷酸序列一段已知目的基因的核苷酸序列四種脫氧核苷酸四種脫氧核苷酸( (二二) )利用利用PCRPCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因技術(shù)擴(kuò)增目的基因 概念：概念：PCR全稱為全稱為_，是一項(xiàng)在生物是一項(xiàng)在生物_復(fù)制復(fù)制_的核酸合成技術(shù)。的核酸合成技術(shù)。 條件：條件：_(前提條件前提條件)_、 _ 、_. 原理：原理：_聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)體外體外特定特定DNA片段片段DNA復(fù)制復(fù)制一段已知目的基因的核苷酸序列一段已知目的基因的核苷酸序列四種脫氧核苷酸四種脫氧核苷酸一對(duì)引物一對(duì)引物( (二二) )利用利用PCRPCR技術(shù)

37、擴(kuò)增目的基因技術(shù)擴(kuò)增目的基因 概念：概念：PCR全稱為全稱為_，是一項(xiàng)在生物是一項(xiàng)在生物_復(fù)制復(fù)制_的核酸合成技術(shù)。的核酸合成技術(shù)。 條件：條件：_(前提條件前提條件)_、 _ 、_. 原理：原理：_聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)體外體外特定特定DNA片段片段DNA復(fù)制復(fù)制一段已知目的基因的核苷酸序列一段已知目的基因的核苷酸序列四種脫氧核苷酸四種脫氧核苷酸一對(duì)引物一對(duì)引物熱穩(wěn)定熱穩(wěn)定DNA聚合酶聚合酶(Taq酶酶)( (二二) )利用利用PCRPCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因技術(shù)擴(kuò)增目的基因方式：以方式：以_方式擴(kuò)增，即方式擴(kuò)增，即_（n為擴(kuò)增循環(huán)的次數(shù)）為擴(kuò)增循環(huán)的次數(shù)）結(jié)果：結(jié)果：過(guò)程：過(guò)程：方式：以

38、方式：以_方式擴(kuò)增，即方式擴(kuò)增，即_（n為擴(kuò)增循環(huán)的次數(shù)）為擴(kuò)增循環(huán)的次數(shù)）結(jié)果：結(jié)果：指數(shù)指數(shù)過(guò)程：過(guò)程：方式：以方式：以_方式擴(kuò)增，即方式擴(kuò)增，即_（n為擴(kuò)增循環(huán)的次數(shù)）為擴(kuò)增循環(huán)的次數(shù)）結(jié)果：結(jié)果：指數(shù)指數(shù)2n過(guò)程：過(guò)程：方式：以方式：以_方式擴(kuò)增，即方式擴(kuò)增，即_（n為擴(kuò)增循環(huán)的次數(shù)）為擴(kuò)增循環(huán)的次數(shù)）結(jié)果：結(jié)果：指數(shù)指數(shù)2n使目的基因的片段在短時(shí)間內(nèi)成百使目的基因的片段在短時(shí)間內(nèi)成百萬(wàn)倍地?cái)U(kuò)增萬(wàn)倍地?cái)U(kuò)增過(guò)程：過(guò)程：方式：以方式：以_方式擴(kuò)增，即方式擴(kuò)增，即_（n為擴(kuò)增循環(huán)的次數(shù)）為擴(kuò)增循環(huán)的次數(shù)）結(jié)果：結(jié)果：指數(shù)指數(shù)2n使目的基因的片段在短時(shí)間內(nèi)成百使目的基因的片段在短時(shí)間內(nèi)成百萬(wàn)倍

39、地?cái)U(kuò)增萬(wàn)倍地?cái)U(kuò)增過(guò)程：過(guò)程：變性、退火、延伸三步曲變性、退火、延伸三步曲退火：退火：冷卻至冷卻至5560部分引物與模部分引物與模板的單鏈板的單鏈DNA的特的特定互補(bǔ)部位相配對(duì)定互補(bǔ)部位相配對(duì)和結(jié)合和結(jié)合延伸：延伸：加熱至加熱至7075以目的基因?yàn)橐阅康幕驗(yàn)槟０澹铣苫パa(bǔ)的模板，合成互補(bǔ)的新新DNA鏈鏈變性變性退火退火延伸延伸變性：變性：加熱至加熱至9095雙鏈雙鏈DNA解鏈成為解鏈成為單鏈單鏈DNA1. 在已知序列信息的情況下，獲取在已知序列信息的情況下，獲取目的基因的最方便方法是目的基因的最方便方法是A. 化學(xué)合成法化學(xué)合成法B. 基因組文庫(kù)法基因組文庫(kù)法C. cDNA文庫(kù)法文庫(kù)法D. 聚

40、合酶鏈反應(yīng)聚合酶鏈反應(yīng)1. 在已知序列信息的情況下，獲取在已知序列信息的情況下，獲取目的基因的最方便方法是目的基因的最方便方法是A. 化學(xué)合成法化學(xué)合成法B. 基因組文庫(kù)法基因組文庫(kù)法C. cDNA文庫(kù)法文庫(kù)法D. 聚合酶鏈反應(yīng)聚合酶鏈反應(yīng)二、基因表達(dá)載體的構(gòu)建二、基因表達(dá)載體的構(gòu)建核心核心(1)用一定的用一定的_切割質(zhì)粒，使其出切割質(zhì)粒，使其出現(xiàn)一個(gè)切口，露出現(xiàn)一個(gè)切口，露出_。(2)用用_切斷目的基因，使其切斷目的基因，使其產(chǎn)生產(chǎn)生_。(3)將切下的目的基因片段插入質(zhì)粒的將切下的目的基因片段插入質(zhì)粒的_處，再加入適量處，再加入適量_，形，形成了一個(gè)重組成了一個(gè)重組 DNA分子（重組質(zhì)粒）分

41、子（重組質(zhì)粒）1.過(guò)程過(guò)程:二、基因表達(dá)載體的構(gòu)建二、基因表達(dá)載體的構(gòu)建核心核心(1)用一定的用一定的_切割質(zhì)粒，使其出切割質(zhì)粒，使其出現(xiàn)一個(gè)切口，露出現(xiàn)一個(gè)切口，露出_。(2)用用_切斷目的基因，使其切斷目的基因，使其產(chǎn)生產(chǎn)生_。(3)將切下的目的基因片段插入質(zhì)粒的將切下的目的基因片段插入質(zhì)粒的_處，再加入適量處，再加入適量_，形，形成了一個(gè)重組成了一個(gè)重組 DNA分子（重組質(zhì)粒）分子（重組質(zhì)粒）限制酶限制酶1.過(guò)程過(guò)程:二、基因表達(dá)載體的構(gòu)建二、基因表達(dá)載體的構(gòu)建核心核心(1)用一定的用一定的_切割質(zhì)粒，使其出切割質(zhì)粒，使其出現(xiàn)一個(gè)切口，露出現(xiàn)一個(gè)切口，露出_。(2)用用_切斷目的基因，使

42、其切斷目的基因，使其產(chǎn)生產(chǎn)生_。(3)將切下的目的基因片段插入質(zhì)粒的將切下的目的基因片段插入質(zhì)粒的_處，再加入適量處，再加入適量_，形，形成了一個(gè)重組成了一個(gè)重組 DNA分子（重組質(zhì)粒）分子（重組質(zhì)粒）限制酶限制酶黏性末端黏性末端1.過(guò)程過(guò)程:二、基因表達(dá)載體的構(gòu)建二、基因表達(dá)載體的構(gòu)建核心核心(1)用一定的用一定的_切割質(zhì)粒，使其出切割質(zhì)粒，使其出現(xiàn)一個(gè)切口，露出現(xiàn)一個(gè)切口，露出_。(2)用用_切斷目的基因，使其切斷目的基因，使其產(chǎn)生產(chǎn)生_。(3)將切下的目的基因片段插入質(zhì)粒的將切下的目的基因片段插入質(zhì)粒的_處，再加入適量處，再加入適量_，形，形成了一個(gè)重組成了一個(gè)重組 DNA分子（重組質(zhì)粒

43、）分子（重組質(zhì)粒）限制酶限制酶黏性末端黏性末端同一種限制酶同一種限制酶1.過(guò)程過(guò)程:二、基因表達(dá)載體的構(gòu)建二、基因表達(dá)載體的構(gòu)建核心核心(1)用一定的用一定的_切割質(zhì)粒，使其出切割質(zhì)粒，使其出現(xiàn)一個(gè)切口，露出現(xiàn)一個(gè)切口，露出_。(2)用用_切斷目的基因，使其切斷目的基因，使其產(chǎn)生產(chǎn)生_。(3)將切下的目的基因片段插入質(zhì)粒的將切下的目的基因片段插入質(zhì)粒的_處，再加入適量處，再加入適量_，形，形成了一個(gè)重組成了一個(gè)重組 DNA分子（重組質(zhì)粒）分子（重組質(zhì)粒）限制酶限制酶黏性末端黏性末端同一種限制酶同一種限制酶相同的黏性末端相同的黏性末端1.過(guò)程過(guò)程:二、基因表達(dá)載體的構(gòu)建二、基因表達(dá)載體的構(gòu)建核心

44、核心(1)用一定的用一定的_切割質(zhì)粒，使其出切割質(zhì)粒，使其出現(xiàn)一個(gè)切口，露出現(xiàn)一個(gè)切口，露出_。(2)用用_切斷目的基因，使其切斷目的基因，使其產(chǎn)生產(chǎn)生_。(3)將切下的目的基因片段插入質(zhì)粒的將切下的目的基因片段插入質(zhì)粒的_處，再加入適量處，再加入適量_，形，形成了一個(gè)重組成了一個(gè)重組 DNA分子（重組質(zhì)粒）分子（重組質(zhì)粒）限制酶限制酶黏性末端黏性末端同一種限制酶同一種限制酶切口切口相同的黏性末端相同的黏性末端1.過(guò)程過(guò)程:二、基因表達(dá)載體的構(gòu)建二、基因表達(dá)載體的構(gòu)建核心核心(1)用一定的用一定的_切割質(zhì)粒，使其出切割質(zhì)粒，使其出現(xiàn)一個(gè)切口，露出現(xiàn)一個(gè)切口，露出_。(2)用用_切斷目的基因，使

45、其切斷目的基因，使其產(chǎn)生產(chǎn)生_。(3)將切下的目的基因片段插入質(zhì)粒的將切下的目的基因片段插入質(zhì)粒的_處，再加入適量處，再加入適量_，形，形成了一個(gè)重組成了一個(gè)重組 DNA分子（重組質(zhì)粒）分子（重組質(zhì)粒）限制酶限制酶黏性末端黏性末端同一種限制酶同一種限制酶切口切口DNA連接酶連接酶相同的黏性末端相同的黏性末端1.過(guò)程過(guò)程:1.過(guò)程過(guò)程:二、基因表達(dá)載體的構(gòu)建二、基因表達(dá)載體的構(gòu)建質(zhì)粒質(zhì)粒DNA分子分子1.過(guò)程過(guò)程:二、基因表達(dá)載體的構(gòu)建二、基因表達(dá)載體的構(gòu)建質(zhì)粒質(zhì)粒DNA分子分子限制酶處理限制酶處理同一種同一種1.過(guò)程過(guò)程:二、基因表達(dá)載體的構(gòu)建二、基因表達(dá)載體的構(gòu)建質(zhì)粒質(zhì)粒DNA分子分子限制酶

46、處理限制酶處理一個(gè)切口一個(gè)切口兩個(gè)黏性末端兩個(gè)黏性末端兩個(gè)切口兩個(gè)切口獲得目的基因獲得目的基因同一種同一種1.過(guò)程過(guò)程:二、基因表達(dá)載體的構(gòu)建二、基因表達(dá)載體的構(gòu)建質(zhì)粒質(zhì)粒DNA分子分子限制酶處理限制酶處理一個(gè)切口一個(gè)切口兩個(gè)黏性末端兩個(gè)黏性末端兩個(gè)切口兩個(gè)切口獲得目的基因獲得目的基因DNA 連接酶連接酶同一種同一種1.過(guò)程過(guò)程:二、基因表達(dá)載體的構(gòu)建二、基因表達(dá)載體的構(gòu)建質(zhì)粒質(zhì)粒DNA分子分子限制酶處理限制酶處理一個(gè)切口一個(gè)切口兩個(gè)黏性末端兩個(gè)黏性末端兩個(gè)切口兩個(gè)切口獲得目的基因獲得目的基因DNA 連接酶連接酶重組重組DNA分子（重組質(zhì)粒）分子（重組質(zhì)粒）同一種同一種1.過(guò)程過(guò)程:二、基因表

47、達(dá)載體的構(gòu)建二、基因表達(dá)載體的構(gòu)建2.2.基因表達(dá)載體的作用基因表達(dá)載體的作用2.2.基因表達(dá)載體的作用基因表達(dá)載體的作用a. 使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在并使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在并 遺傳給子代遺傳給子代b. 同時(shí)使目的基因能表達(dá)和發(fā)揮作用同時(shí)使目的基因能表達(dá)和發(fā)揮作用2.2.基因表達(dá)載體的作用基因表達(dá)載體的作用a. 使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在并使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在并 遺傳給子代遺傳給子代b. 同時(shí)使目的基因能表達(dá)和發(fā)揮作用同時(shí)使目的基因能表達(dá)和發(fā)揮作用思考：思考：作為基因工程表達(dá)載體，只作為基因工程表達(dá)載體，只需含有目的基因就可以完成任務(wù)嗎？需含有目的基因就可以完成任

48、務(wù)嗎？為什么？為什么？不可以。不可以。因?yàn)槟康幕蛟诒磉_(dá)載體中得到因?yàn)槟康幕蛟诒磉_(dá)載體中得到表達(dá)并發(fā)揮作用，還需要有其他控制元件，表達(dá)并發(fā)揮作用，還需要有其他控制元件，如啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。必須構(gòu)如啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。必須構(gòu)建上述元件的主要理由是：建上述元件的主要理由是：(1)(1)生物之間進(jìn)行基因交流，只有使用受生物之間進(jìn)行基因交流，只有使用受體生物自身基因的啟動(dòng)子才能比較有利于體生物自身基因的啟動(dòng)子才能比較有利于基因的表達(dá)；基因的表達(dá)；(2)(2)通過(guò)通過(guò)cDNAcDNA文庫(kù)獲得的目的基因沒(méi)有啟文庫(kù)獲得的目的基因沒(méi)有啟動(dòng)子，只將編碼序列導(dǎo)入受體生物中無(wú)法動(dòng)子，只將編碼序列

49、導(dǎo)入受體生物中無(wú)法轉(zhuǎn)錄；轉(zhuǎn)錄；(3)目的基因是否導(dǎo)入受體生物中需要有篩目的基因是否導(dǎo)入受體生物中需要有篩選標(biāo)記；選標(biāo)記；(4)為了增強(qiáng)目的基因的表達(dá)水平，往往還為了增強(qiáng)目的基因的表達(dá)水平，往往還要增加一些其他調(diào)控元件，如增強(qiáng)子等；要增加一些其他調(diào)控元件，如增強(qiáng)子等；(5)有時(shí)需要確定目的基因表達(dá)的產(chǎn)物存在有時(shí)需要確定目的基因表達(dá)的產(chǎn)物存在于細(xì)胞的什么部位，往往要加上可以標(biāo)識(shí)于細(xì)胞的什么部位，往往要加上可以標(biāo)識(shí)存在部位的基因（或做成目的基因與標(biāo)識(shí)存在部位的基因（或做成目的基因與標(biāo)識(shí)基因的融合基因），如綠色熒光蛋白基因基因的融合基因），如綠色熒光蛋白基因等。等。3.3.基因表達(dá)載體的組成：基因表達(dá)

50、載體的組成：a.目的基因目的基因 b. 啟動(dòng)子啟動(dòng)子c. 終止子終止子d. 標(biāo)記基因標(biāo)記基因3.3.基因表達(dá)載體的組成：基因表達(dá)載體的組成：它們有什么作用？它們有什么作用？a.目的基因目的基因 b. 啟動(dòng)子啟動(dòng)子c. 終止子終止子d. 標(biāo)記基因標(biāo)記基因3.3.基因表達(dá)載體的組成：基因表達(dá)載體的組成：它們有什么作用？它們有什么作用？a.目的基因目的基因 b. 啟動(dòng)子啟動(dòng)子c. 終止子終止子d. 標(biāo)記基因標(biāo)記基因位于基因的首端，是位于基因的首端，是mRNA結(jié)合位點(diǎn)結(jié)合位點(diǎn)3.3.基因表達(dá)載體的組成：基因表達(dá)載體的組成：它們有什么作用？它們有什么作用？a.目的基因目的基因 b. 啟動(dòng)子啟動(dòng)子c. 終

51、止子終止子d. 標(biāo)記基因標(biāo)記基因位于基因的首端，是位于基因的首端，是mRNA結(jié)合位點(diǎn)結(jié)合位點(diǎn)位于基因的末端，位于基因的末端，終止轉(zhuǎn)錄終止轉(zhuǎn)錄3.3.基因表達(dá)載體的組成：基因表達(dá)載體的組成：它們有什么作用？它們有什么作用？a.目的基因目的基因 b. 啟動(dòng)子啟動(dòng)子c. 終止子終止子d. 標(biāo)記基因標(biāo)記基因位于基因的首端，是位于基因的首端，是mRNA結(jié)合位點(diǎn)結(jié)合位點(diǎn)位于基因的末端，位于基因的末端，終止轉(zhuǎn)錄終止轉(zhuǎn)錄檢測(cè)目的基因是否導(dǎo)檢測(cè)目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞入受體細(xì)胞3.3.基因表達(dá)載體的組成：基因表達(dá)載體的組成：1.（多選）一個(gè)基因表達(dá)載體的構(gòu)建（多選）一個(gè)基因表達(dá)載體的構(gòu)建 應(yīng)包括應(yīng)包括 A. 目

52、的基因目的基因 B. 啟動(dòng)子啟動(dòng)子 C. 終止子終止子 D. 標(biāo)記基因標(biāo)記基因1.（多選）一個(gè)基因表達(dá)載體的構(gòu)建（多選）一個(gè)基因表達(dá)載體的構(gòu)建 應(yīng)包括應(yīng)包括 A. 目的基因目的基因 B. 啟動(dòng)子啟動(dòng)子 C. 終止子終止子 D. 標(biāo)記基因標(biāo)記基因2. 下列關(guān)于基因表達(dá)載體的敘述不正下列關(guān)于基因表達(dá)載體的敘述不正確的是確的是A. 啟動(dòng)子是與啟動(dòng)子是與RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，是起始密碼的部位，是起始密碼B. 啟動(dòng)子和終止子都是特殊結(jié)構(gòu)的啟動(dòng)子和終止子都是特殊結(jié)構(gòu)的DNA短片段，對(duì)短片段，對(duì)mRNA的轉(zhuǎn)錄起調(diào)控作用的轉(zhuǎn)錄起調(diào)控作用C. 標(biāo)記基因是為了鑒別受體細(xì)胞中是標(biāo)記基因是為了鑒別受體細(xì)胞中是否有目的基因從而便于篩選否有目的基因從而便于篩選D. 基因表達(dá)載體的構(gòu)建視受體細(xì)胞及基因表達(dá)載體的構(gòu)建視受體細(xì)胞及導(dǎo)入方式不同而有所差別導(dǎo)入方式不同而有所差別2. 下列關(guān)于基因表達(dá)載體的敘述不正下列關(guān)于基因表達(dá)載體的敘述不正確的是確的是A. 啟動(dòng)子是與啟動(dòng)子是與RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，是起始密碼的部位，是起始密碼B. 啟動(dòng)子和終止子都是特殊結(jié)構(gòu)的啟動(dòng)子和終止子都是特殊結(jié)構(gòu)的DNA短片段，對(duì)短片段，對(duì)mRNA的轉(zhuǎn)錄起調(diào)控作用的轉(zhuǎn)錄起調(diào)控作用C. 標(biāo)記基因是為