1、 實驗四實驗四 指導教師：張玲玲指導教師：張玲玲 食品微生物學實驗食品微生物學實驗 實驗實驗項目項目n肉膏湯培養基肉膏湯培養基的制備的制備n普通瓊脂平板培養基普通瓊脂平板培養基的制備的制備n半固體斜面培養基半固體斜面培養基的制備的制備 細菌培養基的制備細菌培養基的制備 一、目的一、目的 掌握掌握培養基的制備方法培養基的制備方法 二、原理二、原理 培養基是人工合成的一種混合營養料，培養基是人工合成的一種混合營養料，用以分離細菌。基礎培養基中含有大多數用以分離細菌。基礎培養基中含有大多數常見菌生長繁殖所需要的營養物質，并可常見菌生長繁殖所需要的營養物質，并可制成液體、半固體、固體三種不同的性狀制成

2、液體、半固體、固體三種不同的性狀以供選用。以供選用。 三、材料三、材料牛肉膏、蛋白胨牛肉膏、蛋白胨氯化鈉、蒸餾水氯化鈉、蒸餾水瓊脂，瓊脂，10%NaOH10%NaOHpHpH試紙、三角燒瓶試紙、三角燒瓶量筒，天平量筒，天平酒精燈、等。酒精燈、等。 四、方法四、方法 調配成分調配成分 溶解溶解 調節調節 pH 分裝分裝 滅菌滅菌 質量檢驗質量檢驗 保存保存 培養基配制步驟培養基配制步驟 各組所需要配制的培養基各組所需要配制的培養基 n1.肉膏湯培養基肉膏湯培養基 （ 先分裝先分裝7支）支）n3.普通斜面培養基普通斜面培養基n2.普通瓊脂平板培養基普通瓊脂平板培養基第第2組組:100ml（先分裝（

3、先分裝7支）支） 第第1組組:各各100ml 第第3.4.5.6組組:各各100ml 每組倒每組倒7枚平板供枚平板供6小組下次用小組下次用 四、方法四、方法1.肉膏湯培養基的配制肉膏湯培養基的配制: 稱樣：稱樣： 牛肉膏牛肉膏0.5g 蛋白胨蛋白胨1g 氯化鈉氯化鈉0.5g (2) 待冷至待冷至4050時，矯正酸堿度為時，矯正酸堿度為pH7.6 (3) 分裝于試管內（每管約分裝于試管內（每管約2ml）置高壓蒸汽）置高壓蒸汽 滅菌器內滅菌滅菌器內滅菌(121.3-20min)。 加至加至100ml蒸餾水蒸餾水中，加熱溶化中，加熱溶化 四、方法四、方法2.普通瓊脂平板培養基配制：普通瓊脂平板培養基

4、配制： 于于100ml肉膏湯培養基中加入肉膏湯培養基中加入2.5g瓊脂，瓊脂， 高壓蒸汽滅菌，待冷至高壓蒸汽滅菌，待冷至5060，倒制平板。，倒制平板。3.普通斜面培養基普通斜面培養基 于于100ml肉膏湯培養基中加入肉膏湯培養基中加入1g瓊脂，瓊脂， 分裝于試管內（每管約分裝于試管內（每管約3-4ml）置高壓蒸）置高壓蒸汽滅菌器內滅菌汽滅菌器內滅菌(121.3-20min) . 配制見瓶簽說明配制見瓶簽說明 四、方法四、方法1.細菌的接種方法細菌的接種方法（分區劃線法）分區劃線法） 12345(試教試教)四、方法四、方法細菌的接種方法細菌的接種方法 2.肉膏湯培養基肉膏湯培養基 3.普通斜面

5、培養基普通斜面培養基(試教試教) 四、方法四、方法 4.手指手指皮膚細菌檢測皮膚細菌檢測 未消毒未消毒手指劃手指劃線接種線接種消毒手指消毒手指劃線接種劃線接種放放37溫箱培養溫箱培養24小時看結果小時看結果 普通瓊脂平板普通瓊脂平板 4人接種人接種 四、方法四、方法 5.紫外線殺菌試驗紫外線殺菌試驗 1.無菌操作取細菌接種無菌操作取細菌接種 2.密集劃線法密集劃線法 3.紫外線下照射紫外線下照射30min4.放放37溫箱培養溫箱培養24小時看結果。小時看結果。 2.口腔細菌檢測口腔細菌檢測-咳碟法咳碟法（示教）示教）四、方法四、方法 四、方法四、方法 3.空氣細菌空氣細菌總數總數檢測檢測 (自

6、然沉降法自然沉降法)打開培養皿，在空打開培養皿，在空氣中暴露氣中暴露15min后，后，放放37溫箱培養溫箱培養24小時看結果。小時看結果。 以每平皿上平均菌落數（以每平皿上平均菌落數（cfu/皿）報告結果。皿）報告結果。 四、方法四、方法 4.水體中細菌檢測水體中細菌檢測 （傾注培養法）（傾注培養法） 1.污水污水1ml 2.加熱普通瓊脂加熱普通瓊脂 3.污水污水1ml +加熱普通瓊加熱普通瓊脂脂 4.放放37溫箱培養溫箱培養24小時看結果。小時看結果。 細菌總數細菌總數100/ml 五、結果五、結果 配制出以下培養基：配制出以下培養基： 1.肉膏湯培養基肉膏湯培養基 2.普通瓊脂平板培養基普通瓊脂平板培養基 3.普通斜面培養基普通斜面培養基 n何謂何謂培養基？培養基？n培養基的制備過程有哪幾個步驟？培養基的制備過程有哪幾個步驟？ 七七、思考題、思考題 六、實驗報告要求六、實驗報告要求實驗報告