1、病毒學 3000BC，埃及孟非思壁畫中長老患小兒麻痹癥。病毒virus 最微小，可通過除菌濾器，結構簡單，無完整的細胞結構，電子顯微鏡下觀察； 一種核酸（RNA或DNA） 在活細胞內存活,以復制方式繁殖Virus：體積小，結構簡單，只有一種類型的核酸，只能在活的、敏感細胞內以復制方式增殖的非細胞型微生物。病毒與其它微生物的區(qū)別 敏感性微生物種類 結構在無活細胞的培養(yǎng)基中生長二等分裂繁殖核酸類型 核糖體抗生素 干擾素細菌原核細胞型+D N A ， R N A+-支原體原核細胞型+D N A ， R N A+-立克次體 原核細胞型-+D N A ， R N A+-衣原體原核細胞型-+D N A ，

2、 R N A+-螺旋體原核細胞型-（ +）+D N A ， R N A+-真菌真核細胞型+出 芽 、 產 生 孢 子 D N A ， R N A+-病毒非細胞型-D N A或R N A-+病毒引起疾病的特點 傳播性 病死率 持續(xù)感染 腫瘤的形成關系第23章 病毒的基本性狀第一節(jié) 病毒的大小與形態(tài)病毒體（virion） 完整的成熟病毒顆粒，具有典型的形態(tài)結構，并有感染性。 測量單位為納米（nm,為1/1000m） 150nm 大型病毒（最大300 nm） 多數病毒呈球形或近似球形，桿狀，絲狀，少數可為子彈狀、磚塊狀，噬菌體可呈蝌蚪狀。微生物的大小比較葡萄球菌(1000nm） 牛痘病毒300250

3、nmABCDEFG立克次體450nm衣原體390nmA、大腸桿菌噬菌體 ( 65 95nm )B、腺病毒 (70nm )C、脊髓灰質炎病毒 (30nm )D、乙腦病毒 ( 40nm )E、蛋白分子 (10nm )F、流感病毒 ( 100nm )G、煙草花葉病毒病毒的結構和組成病毒體結構模式圖殼粒衣殼核心（核樣物）核衣殼包膜包膜病毒包膜子粒核心：核酸 基因組genome 決定病毒遺傳、變異 和復制殼粒capsomere 衣殼capsid 保護、介導、抗原性包膜envelope，包膜子粒peplomere（刺突spike） 保 護、介導、抗原性核衣殼的對稱形式Symmetry of Nucleoc

4、apsid螺旋對稱型（Helical Symmetry）二十面體立體對稱型（ Icosahedral Symmetry ） 復合對稱 型（Complex Symmetry ）五鄰體六鄰體RNA殼粒Enveloped Enveloped VirusVirusNaked Naked VirusVirusCubicHelical第二節(jié) 病毒的核酸與蛋白質一、病毒核酸多樣性DNA dsDNA ssDNA dsRNARNA ssRNA 分節(jié)段RNA線狀、環(huán)狀大小懸殊復制方式多樣存在形式多樣 有內含子，ORF間有重疊 克隆和表達 較大的遺傳不穩(wěn)定性 感染性二、病毒蛋白質由病毒核酸編碼 結構蛋白 組成病毒體

5、的成分 衣殼蛋白 包膜蛋白 基質蛋白連接衣殼蛋白與包膜蛋白的部分， 有跨膜及錨定功能區(qū) 非結構蛋白 病毒內酶 感染細胞內特殊作用蛋白第三節(jié) 病毒的培養(yǎng)和增殖（Culture and Replication of VirusesCulture and Replication of Viruses）一、病毒的培養(yǎng) 動物（Animals） 雞胚（Embryonated eggs） 組織培養(yǎng)（Organ and tissue culture）Organ culture胚胎Embryo cultureCell culture:原代細胞 傳代細胞 雙倍體細胞常用的細胞培養(yǎng)類型名稱原代細胞培養(yǎng)恒河猴腎細胞培

6、養(yǎng)， 人胚腎、 肺等細胞培養(yǎng)，雞胚成纖維細胞培養(yǎng)二倍體細胞株WI-38（人胚肺細胞株） ，HL-8（恒河猴胚細胞株）傳代細胞系Hela 細胞，Detroit 細胞（胸骨髓細胞系） ，Chang C/I/L/K（人結膜 C，腸 I，肝 L 與腎K 細胞系） ，Vero（綠猴腎細胞系） ，BHK-21（幼地鼠腎細胞系） 細胞病變(Cytopathic effect, CPE) 包涵體（Inclusion Bodies）正常細胞CPE狂犬病毒包涵體（Negri body）巨細胞病毒包涵體病毒數量和感染性測定1、蝕斑試驗2、ID50 或 TCID50 病毒感染雞胚、動物或細胞后，引起 50% 發(fā)生死亡

7、或病變的最小量。 病毒感染單層細胞后，產生的局限性病灶，稱蝕斑，蝕斑是由一個感染性病毒體復制形成的，稱蝕斑形成單位，病毒懸液中的感染性病毒量以每毫升的蝕斑形成單位PFU來表示。病毒的增殖活細胞敏感細胞復制( replication)病毒復制周期病毒基因為模板，籍DNA多聚酶或RNA多聚酶等，使細胞轉為復制病毒的基因組，轉錄、轉譯出相應的病毒蛋白，最終釋放出子代病毒。吸附和穿入adsorption and penetration脫殼uncoating生物合成biosynthesis組裝成熟與釋放assembly and release病毒的復制過程病毒的復制過程ADSORPTIONbudding

8、HIV 復制過程接觸結合特異性吸附（病毒配體位點與細胞膜特異受體結合） 穿入Adsorption and Penetration融合-有包膜病毒胞飲-無包膜病毒HIVHIV influenza virusinfluenza virus uncoatingBiosynthesis 隱蔽期 6大類型：雙鏈DNA病毒 單鏈DNA病毒 單正鏈RNA病毒 單負鏈RNA病毒 雙鏈RNA病毒 逆轉錄病毒 區(qū)域：DNA病毒 核內（除痘病毒） RNA病毒 胞質（除流感病毒及 部分副粘病毒） assembly and release 裝配（assemblyassembly）The stage of replica

9、tion during which all the structural components come together at one site in the cell and the basic structure of the virus particle is formed.裝配（assemblyassembly）釋放（release）裂解（Disintegration） : naked virus cause the host cell lysis出芽（Budding）: enveloped viruses皰疹病毒的復制過程三、病毒增殖的細胞效應 干擾現象interference 當

10、兩種病毒同時感染同一細胞時，可發(fā)生一種病毒的增殖抑制了 另一種病毒增殖的現象。 產生原因 干擾素interferon，IFN 第一種病毒改變了細胞表面受體結構或細胞代謝途徑；或抑制第二種病毒mRNA的轉譯四、病毒的異常增殖 缺陷病毒（ defective virus ）： 基因組不完整的病毒體 缺陷干擾顆粒（defective interfering particles, DIP) 缺陷病毒不能復制，但卻能干擾同種成熟病毒體進入細胞。 天然缺陷病毒 腺病毒伴隨病毒 頓挫感染（流產性感染）（abortive infection）：細胞條件不合適，病毒進入細胞但不能復制容許性細胞非容許性細胞第四節(jié)

11、 病毒的遺傳與變異 傳統(tǒng)遺傳學 分子遺傳學 突變株mutant溫度敏感突變株（temperature sensitive，ts） 2835可以復制， 3740不能復制 脊髓灰質炎減毒活疫苗宿主范圍突變株，抗原性突變株等變異株variant 突變株能穩(wěn)定地存在，可在相應的宿主或細胞中傳代與存活。重組與重配（基因間相互作用） 重組recombination 重配reassortment基因復活 交叉復活 多重復活表型混合（基因產物間相互作用） 兩株病毒混合感染時，裝配過程發(fā)生錯誤形成 主要表現為耐藥性，抗原性等改變，基因并未改變，改變的生物學性狀不能遺傳virus Avirus Bphenotyp

12、emixing virus Avirus B分子遺傳學 病毒基因組分析 病毒保護性表位的確定 病毒抗原高變區(qū)分析 毒力相關基因編碼區(qū)分析 耐藥性變異分析 作用于病毒蛋白質的某些細胞蛋白的研究第五節(jié) 病毒的分類 （Classification of Viruses）分類原則Basis of Classification核酸類型和結構（RNA/DNA, ds/ss, linear/circular, fragment /no-fragment)病毒體形狀和大小病毒體形態(tài)結構對脂溶劑敏感性 DNA病毒 RNA病毒 DNA 和RNA 逆轉錄病毒DNA virusesd s D N A , P r e

13、s e n c e o f a n envelope Poxviridae （痘病毒科）d s D N A , P r e s e n c e o f a n envelope Herpesviridae （皰疹病毒科）d s D N A , a b s e n c e o f a n envelope Adenoviridae （腺病毒科） Paproavairidae （乳多空病毒科）s s D N A , a b s e n c e o f a n envelope Paraoviridae （細小病毒科） dsRNA，fragments，absence envelope Reoviri

14、dae（呼腸病毒科） Birnaviridae（雙RNA病毒科） -ssRNA, no fragment , Presence envelope Paramyxoviridae （副粘病毒科） Rhabdoviridae （彈狀病毒科） - ssRNA，fragments， Presence envelope Or thomyxoviridae （正粘病毒科） Bunyaviridae （布尼亞病毒科） Arenaviridae （沙粒病毒科） +ssRNA, no fragments, absence envelope Picornaviridae（小RNA病毒科） Calicivirida

15、e （杯狀病毒科） Astroviridae （星狀病毒科） +ssRNA,no fragments , presence envelope Coronaviridae（冠狀病毒科） Flaviviridae （黃病毒科） Togaviridae （披膜病毒科）RNA VirusesDNA and RNA Viruses 嗜肝DNA病毒科（Hepadnasviridae） 逆轉錄病毒科（ Retroviridae ） 類病毒（ Viroids） 很小 (200-400nt),桿狀 RNA 分子，有二級結構 無衣殼或包膜 在核內增殖，嚴格細胞內寄生 多與植物疾病相關 衛(wèi)星病毒satellites

16、 多數與植物病毒有關有兩類：一類可編碼自身衣殼蛋白另一類為衛(wèi)星病毒RNA分子需輔助病毒才能復制HDVVirus：體積小，結構簡單，只有一種類型的核酸，只能在活的、敏感細胞內以復制方式增殖的非細胞型微生物。核心：核酸 基因組genome 決定病毒遺傳、變異 和復制殼粒capsomere 衣殼capsid 保護、介導、抗原性包膜envelope，包膜子粒peplomere（刺突spike） 保 護、介導、抗原性Enveloped Enveloped VirusVirusNaked Naked VirusVirusCubicHelical常用的細胞培養(yǎng)類型名稱原代細胞培養(yǎng)恒河猴腎細胞培養(yǎng)， 人胚腎、 肺等細胞培養(yǎng)，雞胚成纖維細胞培養(yǎng)二倍體細胞株WI-38（人胚肺細胞株） ，HL-8（恒河猴胚細胞株）傳代細胞系Hela 細胞，Detroit 細胞（胸骨髓細胞系） ，Chang C/I/L/K（人結膜 C，腸 I，肝 L 與腎K 細胞系） ，Vero（綠猴腎細胞系） ，BHK-21（幼地鼠腎細胞系）CPE裝配（assemblyassembly）