1、1專題2微生物的培養與應用2.1微生物的實驗室培養一、選擇題 12X41.在培養基的配制過程中，具體有如下步驟，其正確順序為( )溶化 調 pH 加棉塞 包扎 分裝稱量A .B .C .D .【答案】 B【解析】上述步驟中，培養基的配制順序為稱量T溶化T調 pHR分裝T加棉塞T包扎，B 正確。2.下列有關倒平板操作的敘述，錯誤的是()A 將滅過菌的培養皿放在火焰旁的桌面上B .使打開的錐形瓶瓶口迅速通過火焰C .將培養皿打開，培養皿蓋倒放在桌面上D .等待平板冷卻凝固后需要倒過來放置【答案】 C【解析】整個倒平板過程要防止外來雜菌的入侵，因此滅過菌的培養皿應放在火焰旁，A 正確；打開的錐形瓶瓶

2、口應迅速通過火焰， B 正確；培養皿應打開一條稍大于瓶口的縫隙，而不能將培養皿蓋完全打開，C錯誤；平板冷卻凝固后需要倒過來放置， D 正確。3.下列關于制備牛肉膏蛋白胨培養基的敘述，錯誤的是()A 培養基應先調 pH 再進行滅菌B .培養基應先滅菌再分裝到培養皿C .熔化瓊脂時要不斷用玻璃棒攪拌D .使用高壓蒸汽滅菌鍋時直接將滅菌鍋密封加熱【答案】 D【解析】 把滅菌鍋內的水加熱煮沸，將其中原有的冷空氣徹底排出后，將鍋密閉，繼續加熱使鍋內氣壓逐 步上升。4.下列有關平板劃線接種法的操作錯誤的是()A .將接種環放在火焰上灼燒B .將已冷卻的接種環伸入菌液中蘸取一環菌液C 沾取菌液和劃線要在火焰

3、旁進行D 接種環劃線要將最后一區的劃線與第一區的劃線相連【答案】 D2【解析】 為了避免雜菌污染，沾取菌液和劃線要在火焰旁進行，線操作結束仍需灼燒接種環，A 正確；灼燒接種環之后，要冷卻后才能伸入菌液，以免溫度太高，殺死菌種，B 正確；在平板劃線時不要將最后一區的劃線與第一區相連，D 錯誤。5 如圖為純化大腸桿菌的一個操作環節，下列相關敘述中，錯誤的是（）A 該操作步驟是接種，方法是平板劃線法B 除第一次劃線外，以后的每一次劃線的起點是上一次劃線的末端C.圖中細菌密度最小的是 5 處D 每次劃線前要用酒精燈灼燒接種環，接著進行下次劃線【答案】D【解析】 每次劃線前都要灼燒接種環滅菌，然后等其冷

4、卻后進行下次劃線，D 錯誤。6 稀釋涂布平板法是微生物培養中的一種常用的接種方法。下列相關敘述錯誤的是（）A 操作中需要將菌液進行一系列的濃度梯度稀釋B 需將不同稀釋度的菌液分別涂布到固體培養基表面C .不同濃度的菌液均可在培養基表面形成單個菌落D 操作過程中對培養基和涂布器等均需進行嚴格滅菌處理【答案】C【解析】 若菌液濃度過大，形成的菌落連在一起，得不到單個的菌落，C 錯誤。7 下圖是采用純化微生物培養的兩種接種方法接種后培養的效果圖，據圖分析不正確的是（）C 正確；每次劃線之前都需灼燒滅菌，劃3A 獲得圖 A 效果的接種方法是稀釋涂布平板法B 獲得圖 B 效果的接種方法是平板劃線法C .

5、若在純化土壤細菌時菌液濃度過高，培養基上的菌落可能會連成一片D .在接種前要對培養基進行消毒處理【答案】 D【解析】 在接種前要對培養基進行高壓蒸汽滅菌處理， D 錯誤。8將接種后的培養基和一個未接種的培養基都放入37C恒溫箱的目的是()A .對比觀察培養基有沒有被微生物利用B .對比分析培養基是否被雜菌污染C 沒必要放入未接種的培養基D .為了下次接種時再使用【答案】 B【解析】 對未接種的培養基進行培養，起到對照作用，可確定培養基是否被雜菌污染，B 正確。9.利用稀釋涂布平板法純化的大腸桿菌，經培養后發現培養基上出現了多種菌落，不可能的原因是()A .培養基制備過程中被雜菌污染B .接種過

6、程中，無菌操作不符合要求C 系列稀釋時，無菌操作不符合要求D .大腸桿菌的種類不同【答案】 D【解析】 大腸桿菌培養基中出現了多種菌落，說明污染了雜菌，雜菌可能來自培養基，也可能是因為操作 過程中無菌操作不符合要求，A、B、C 正確；大腸桿菌就是一種類型的細菌，因此不會導致培養基上出現多種菌落， D 錯誤。10. 為了保持菌種的純凈需要進行菌種的保藏，下列有關敘述不正確的是()A 對于頻繁使用的菌種，可以采用臨時保藏的方法B .臨時保藏的菌種一般是接種到試管的斜面培養基上C .臨時保藏菌種容易被污染或產生變異D .對于需要長期保存的菌種，可以采用低溫4C保藏的方法【答案】 D【解析】 低溫 4

7、C保藏屬于臨時保藏的方法，而對于需要長期保存的菌種，需放在-20C的冷凍箱中保存，D 錯誤。11. 做 “微生物的分離與培養 ”實驗時，下列敘述正確的是 ()A .高壓滅菌加熱結束時，打開放氣閥使壓力表指針回到零后，開啟鍋蓋B .倒平板時，應將打開的皿蓋放到一邊，以免培養基濺到皿蓋上4C 為了防止污染，接種環經火焰后應趁熱快速挑取菌落D .用記號筆標記培養皿中菌落時，應標記在皿底上【答案】D【解析】 高壓滅菌加熱結束，等待壓力表指針回到零后，才能開啟鍋蓋，不能打開放氣閥使壓力表指針回 到零，A 錯誤；倒平板過程中培養皿的皿蓋打開一個稍大于瓶口的縫隙即可，B 錯誤；接種環火焰上灼燒后,待冷卻后才

8、可以快速挑取菌落，C 錯誤；用記號筆標記培養皿中菌落時，應標記在皿底上，D 正確。12.下圖是實驗室使用某種接種方法在培養基上培養某種微生物的結果，相關說法錯誤的是（）A 該圖最可能是用稀釋涂布平板法進行接種的B 在操作時，為防止雜菌污染，需進行嚴格的消毒和滅菌C 恒溫培養箱中培養時需要將平板倒置D .該接種方法常用于微生物的分離純化【答案】 A【解析】 培養基上微生物的分布有疏有密，應為平板劃線法接種，該接種方法常用于微生物的分離純化，A 錯誤，D 正確；在操作時，為防止雜菌污染，應對培養基和接種針等進行滅菌，對操作空間、衣著和手 進行消毒，B正確；恒溫培養箱中培養時需要將平板倒置，防止冷凝

9、水滴在培養基上，C 正確。二、非選擇題 6X2=1213科學家發現家蠅體內存在一種抗菌活性蛋白，這種蛋白質具有極強的抗菌能力，受到研究者重視。（1）可用金黃色葡萄球菌來檢驗該蛋白質的抗菌特性。抗菌實驗中所用培養基中的牛肉膏和蛋白胨主要為細 菌生長提供_ 和_ 。分別在加入和未加入該抗菌蛋白的培養基中接種等量菌液。培養一定時間后，比較兩種培養基中菌落的，確定該蛋白質的抗菌效果。（3）細菌培養常用的接種方法有 _ 和_ 。實驗結束后，對使用過的培養基應進行_處理。【答案】（1）碳源氮源（2）數量和大小（3）平板劃線法稀釋涂布平板法滅菌【解析】（1）牛肉膏和蛋白胨都是天然培養基成分，含有豐富的蛋白質

10、、糖類等營養成分，可以為微生物5的生長提供碳源和氮源以及生長因子。通過對比加入和未加入該抗菌蛋白的培養基中細菌菌落的數量和大小，確定該蛋白質的抗菌效果。(3)在培養細菌時，往往采用平板劃線法和稀釋涂布平板法進行接種；操作過程中用完的培養基都要進行滅 菌處理，以防止污染環境和對人造成感染。14 .下表是培養某微生物的培養基的配方，請回答下列問題：15 2=30試劑牛肉膏蛋白胨NaCI瓊脂加水定容至用量5 g10 g5 g20 g1000 mL(1) 培養基的類型很多，但培養基中一般都含有水、碳源、_ 和無機鹽。上述培養基配方中能充當碳源的成分是_ 。培養基配制完成以后，一般還要調節 pH 并對培

11、養基進行_ 處理。微生物在生長過程中對各種成分的需要量不同，配制培養基時各成分要有合適的_。在燒杯中加入瓊脂加熱時要不停地 _ ，防止_。(3) 將配制好的培養基分裝到試管中，加棉塞后，若干個試管一捆，包上牛皮紙并用皮筋勒緊放入_中滅菌，壓力為 _ kPa,溫度為_，時間為 _ 。滅菌完畢拔掉電源， 待鍋內壓力自然降到 0 時，將試管取出。如果棉塞上沾有培養基，此試管應 _ 。使用高壓蒸汽滅菌鍋時應注意，先向鍋內倒入 _。把鍋內水加熱煮沸并將其中原有冷空氣徹底排出后，將鍋密閉。(5)從一支試管向另一支試管接種時應注意，接種環要在酒精燈 _ (填 內”或夕卜”焰滅菌，并且待接種環_后沾取菌種，試

12、管口不能離開酒精燈火焰附近。將接種的試管在適溫下培養，長成菌落后放入_ C冰箱中保藏。【答案】(1)氮源 蛋白胨和牛肉膏滅菌(2)比例 攪拌 瓊脂糊底引起燒杯破裂高壓蒸汽滅菌鍋100 121C1530 mi n 廢棄適量水 外 冷卻 4【解析】(1)培養基中一般都含有水、無機鹽、碳源、氮源。培養基配制完成后要調pH 和滅菌。牛肉膏、蛋白胨中含碳元素，可作為有機碳源。(2) 在配制培養基時營養要協調，按所培養微生物對各種成分的需求確定其成分及比例；在加入瓊脂后，要 不斷攪拌，防止瓊脂糊底而導致燒杯破裂。培養基的滅菌應用高壓蒸汽滅菌鍋，在壓力為100 kPa、溫度為 121C條件下，滅菌 1530

13、 min。若棉塞上沾有培養基，易被雜菌污染，應廢棄。(4) 高壓蒸汽滅菌鍋操作步驟為先向鍋內倒入水，加熱煮沸，將冷空氣排出，將鍋密閉，繼續加熱使鍋內氣 壓和溫度上升到需要的程度。(5) 酒精燈外焰溫度高，滅菌效果好。灼燒后待冷卻再沾取菌種，否則會燙死菌種造成實驗失敗。15下圖甲、乙是微生物接種常用的兩種方法，請回答相關問題：1X10=106(1) 圖甲是利用 _ 法進行微生物接種，圖乙是利用 _ 法進行微生物接種。這兩種方法所用的接種工具分別是 _ 和 _ ；對這兩種接種工具進行滅菌和消毒的方法依次是 _和酒精消毒。(2) 平板劃線時，為保證微生物的數目隨劃線次數的增加而逐步減少，每次劃線都要從 _開始，平板劃線結束后，最后一次劃的線不能與第一次劃的線 _。(3) 接種操作為什么一定要在火焰附近進行？ _ 。(4)_下圖是接種后培養的效果圖解，其接種方法是(填“圖甲 ”或“圖乙 ”。)(5)假設用圖乙 所示方法 接種培 養結束 后，發現培養基上 菌落連成 一片， 可能的原因是什么？ 【答案】 (1) 平板劃線 稀釋涂布平板 接種環 涂布器 灼燒滅菌(2)上一次劃線的末端相連 (或相接、相交、交叉等 )(3)火焰附近存在著無菌區域7(4)圖乙(5)稀釋倍數不夠，菌液的